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公开(公告)号:CN1896245A
公开(公告)日:2007-01-17
申请号:CN200610026204.8
申请日:2006-04-28
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种基因重组融合蛋白K1-EN的制备方法。该方法包括以下步骤:重组质粒pPICZαA-K1-EN的构建、重组酵母基因工程菌pPICZαA-K1-EN/ GS115的构建、重组融合蛋白K1-EN的表达、重组融合蛋白K1-EN的纯化。毕赤酵母是真核表达系统,能以甲醇为唯一碳源,pPICZαA是分泌型表达质粒,含有醇氧化酶的强启动子(PAOX1),在甲醇的诱导下能表达外源蛋白,并能分泌到胞外,方便蛋白的提取与纯化。毕赤酵母能通过发酵罐发酵生产大量的目的蛋白,不需要外加热源,成本低,规模大。
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公开(公告)号:CN1295511C
公开(公告)日:2007-01-17
申请号:CN200510023579.4
申请日:2005-01-26
Applicant: 上海大学
IPC: G01N33/559 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12P21/08 , G01N21/64
Abstract: 发明涉及一种玉米赤霉烯酮的检测方法,它是利用玉米赤霉烯酮单克隆抗体制备的免疫亲和柱及荧光光度计来检测玉米赤霉烯酮的方法,属生物细胞学及微生物菌类毒性代谢产物检测方法技术领域。本发明的方法具有以下检测过程和步骤:一.免疫亲和柱的准备和制备:1.制备单克隆抗体:单克隆抗体的制备要通过抗原合成、小鼠免疫、细胞融合、杂交瘤筛选及获取杂交瘤细胞株、采集单克隆抗体等步骤来获得,2.利用上述的单克隆抗体来制备免疫亲和柱;二.样品中玉米赤霉烯酮的分离与检测方法:将玉米试样用甲醇/水溶液提取其中的ZEN,经过过滤步骤并进行适当稀释之后,将液体样品流经亲和柱,再用甲醇洗脱下来后,用荧光分光光度计测定样液中玉米赤霉烯酮的含量。
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公开(公告)号:CN1818069A
公开(公告)日:2006-08-16
申请号:CN200510111331.3
申请日:2005-12-09
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种基因重组融合蛋白PFK-K5的制备方法。该方法包括以下步骤:重组质粒pPICZαA-PFK-K5的构建,其中包括重组质粒pPICZαA-PFK的构建、重组质粒pPICZαA-PFK-K5的构建、重组酵母基因工程菌pPICZαA-PFK-K5/GS115的构建、重组融合蛋白PFK-K5的表达、重组融合蛋白PFK-K5的纯化。毕赤酵母是真核表达系统,能以甲醇为唯一碳源,pPICZαA是分泌型表达质粒,含有醇氧化酶的强启动子(PAOX1),在甲醇的诱导下能表达外源蛋白,并能分泌到胞外,方便蛋白的提取与纯化。毕赤酵母能通过发酵罐发酵生产大量的目的蛋白,不需要外加热源,成本低,规模大。
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公开(公告)号:CN101241128B
公开(公告)日:2012-05-02
申请号:CN200810034739.9
申请日:2008-03-18
Applicant: 上海大学
IPC: G01N33/531 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及一种黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法。该方法的具体步骤为:酰肼化抗体的制备:用过碘酸钠将抗体非结合活性区域Fc端羟基氧化成醛基,再与己二酸二酰肼反应,生成酰肼化抗体;醛基化固相基质的制备:将含有连二醇结构的固相基质用过碘酸钠氧化,得到醛基化的固相基质;抗体与固相基质的偶联:将酰肼化抗体和醛基化的固相基质混合,振荡反应,待反应结束后,再加入硼氢化钠封闭固相基质上未反应的醛基,得到偶联抗体的固相基质;装柱。本发明将抗体的非结合活性区域Fc端定向偶联到固相基质上,更好地保持抗体的活性;将抗体衍生上酰肼,而不是固相基质,避免酰肼基团可能带来的非特异性吸附;合成好的亲和柱,除偶联抗体外,未引入新基团(如羧基、氨基等),避免由此可能引起的非特异性吸附。
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公开(公告)号:CN101066463B
公开(公告)日:2010-09-15
申请号:CN200710041163.4
申请日:2007-05-24
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌DNA疫苗pcDNA3.1(+)-Minigene及其制备方法。本发明构建的DNA疫苗pcDNA3.1(+)-Minigene,通过免疫小鼠实验显示,该DNA疫苗能刺激小鼠机体产生明显和持久的特异性淋巴细胞增殖反应以及一定水平的体液免疫,与相应的pcDNA3.1接种的阴性对照组比较,差异具有显著性(P<0.05)。同时从攻毒实验的结果来看,pcDNA3.1(+)-Minigene质粒能诱导小鼠产生了抗金葡菌感染的抗体,对免疫小鼠起到了免疫保护的作用。
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公开(公告)号:CN101333515A
公开(公告)日:2008-12-31
申请号:CN200810038429.4
申请日:2008-06-02
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种用DCIK细胞培养的上清液及其应用。本发明的上清液以及予以冷冻干燥浓缩制成的冻干粉制剂,在肿瘤治疗中具有良好的抗肿瘤活性。DCIK细胞培养上清液中含有一系列具有生物活性的细胞因子混合物,直接作用于体外培养的细胞株,能引起小鼠黑色素瘤B16和THP-1等细胞株的细胞形态影响并产生生长抑制。体内抗肿瘤实验表明,DCIK细胞培养上清液及其冻干粉制剂可明显抑制皮下接种的小鼠B16黑色素瘤的生长,且无明显毒副作用。本发明充分说明了DCIK培养上清的应用研究前景,并为抗肿瘤药物研究开辟了新的途径。
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公开(公告)号:CN101264331A
公开(公告)日:2008-09-17
申请号:CN200810033063.1
申请日:2008-01-24
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种杏仁的新用途,即杏仁作为壳聚糖包覆胰岛素脂质体Ch-Ins-Lipo肠道吸收促进剂的应用以及作为壳聚糖包覆胰岛素脂质体Ch-Ins-Lipo药物缓释剂的应用。杏仁能明显促进该药物的口服肠道吸收,提高其药物的生物利用度,并且能明显延长胰岛素的药效时间,缓释作用明显,药效发挥时间超过三周。
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公开(公告)号:CN101066463A
公开(公告)日:2007-11-07
申请号:CN200710041163.4
申请日:2007-05-24
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌DNA疫苗pcDNA3.1(+)-Minigene及其制备方法。本发明构建的DNA疫苗pcDNA3.1(+)-Minigene,通过免疫小鼠实验显示,该DNA疫苗能刺激小鼠机体产生明显和持久的特异性淋巴细胞增殖反应以及一定水平的体液免疫,与相应的pcDNA3.1接种的阴性对照组比较,差异具有显著性(P<0.05)。同时从攻毒实验的结果来看,pcDNA3.1(+)-Minigene质粒能诱导小鼠产生了抗金葡菌感染的抗体,对免疫小鼠起到了免疫保护的作用。
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公开(公告)号:CN1955278A
公开(公告)日:2007-05-02
申请号:CN200610026205.2
申请日:2006-04-28
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种重组酵母基因工程菌pPICZαA-K1-VEGF165/GS115的制备方法。该方法包括以下步骤:重组质粒pPICZαA-K1-VEGF165的构建(包括重组质粒pPICZαA-K1的构建、重组质粒pPICZαA-K1-VEGF165的构建)、重组酵母基因工程菌pPICZαA-K1-VEGF165/GS115的构建。毕赤酵母是真核表达系统,能以甲醇为唯一碳源,pPICZαA是分泌型表达质粒,含有醇氧化酶的强启动子(PAOX1),在甲醇的诱导下能表达外源蛋白,并能分泌到胞外,方便蛋白的提取与纯化。毕赤酵母能通过发酵罐发酵生产大量的目的蛋白,不需要外加热源,成本低,规模大。
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公开(公告)号:CN1272312C
公开(公告)日:2006-08-30
申请号:CN200410025228.2
申请日:2004-06-17
Applicant: 上海大学
IPC: C07C235/80 , G01N33/535 , C12Q1/28
Abstract: 本发明涉及一种酶标记克伦特罗及其制备方法。本发明的一种酶标记克伦特罗,其结构为:见右式(I),其中,E 的结构为:见右式(II),其中,见右式(III),本发明的制备方法包括:1.克伦特罗衍生物半戊二酸克伦特罗的合成;2.克伦特罗衍生物长臂克伦特罗的合成,3.长臂克伦特罗与辣根过氧化物酶的交联。采用本发明制备的酶标记克伦特罗,通过其与β2-肾上腺素能受体的亲和力,可以快速、准确的检测出β2-兴奋剂,而且该方法操作简单、成本低、使用方便。
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