公开(公告)号：CN104711294A

公开(公告)日：2015-06-17

申请号：CN201510154789.0

申请日：2015-04-02

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  田晓彦 ,  范中雷 ,  秦爱建 ,  邵红霞

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明涉及一种基于禽网状内皮组织增生症病毒LTR的真核表达载体的构建及应用。该方法是利用序列如SEQ ID NO.1和2的引物，以SNV毒株为模板，进行PCR扩增得REV病毒LTR线性化载体。此发明不仅可用于研究REV或其它反转录病毒的复制、转译、致病等机制；而且能实现对外源基因的快速克隆、高效表达。

公开(公告)号：CN103278635A

公开(公告)日：2013-09-04

申请号：CN201310213811.5

申请日：2013-05-31

Applicant: 中国兽医药品监察所 ,  扬州大学

Inventor： 丁家波 ,  秦爱建 ,  王芳 ,  王楠 ,  赵妮 ,  冯忠泽 ,  顾进华 ,  冯忠武 ,  张广川 ,  郭辉 ,  程君生 ,  毛开荣

IPC: G01N33/577

Abstract: 本发明涉及一种快速、高效、准确的动物布鲁氏菌病诊断方法。一方面，该方法中使用了一种能与布鲁氏菌特异性结合的3E4株单克隆抗体，在布鲁氏菌病抗体检测中，该单克隆抗体3E4株能与布鲁氏菌产生的抗体产生特异性竞争，而与其它病原细菌无竞争性，特别是与布鲁氏菌有强烈交叉反应的小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157抗血清无竞争性，有效解决了目前商品化布病竞争ELISA试剂盒无法区分小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157干扰的技术缺陷，提高了检测的特异性。另一方面，本试剂盒使用了对猪、牛、羊均具有良好反应原性的猪种布鲁氏菌（S2株）脂多糖（LPS）作为包被抗原，不仅提高了LPS的产量，降低了生产成本，而且提高了检测的敏感性。

公开(公告)号：CN102636646A

公开(公告)日：2012-08-15

申请号：CN201210152290.2

申请日：2012-05-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  钱琨 ,  梁有志 ,  尹丽萍 ,  邵红霞 ,  金文杰

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/558

Abstract: 本发明提供了一种快速检测禽白血病抗原的试纸条及其制备方法。所说的试纸条由标记好对照线和检测线的NC膜、免疫金垫、样品垫、吸水滤纸和PVC底板构成。其中所说的对照线的成分是抗鼠IgG，检测线的成分是抗禽白血病抗原的单克隆抗体；所说的免疫金垫是载有胶体金标记的单克隆抗体的玻璃棉。上述试纸条包括胶体金标记抗体、喷金、制作硝酸纤维素膜和组装的步骤。本发明的试纸条用于检测样本中的禽白血病抗原，从而可以用于禽白血病检测和诊断。该方法简便、快速，可以用肉眼直接观察，3-10分钟即出结果，适用于基层各级兽医部门和出入境禽白血病的快速大量筛选检测。该方法所需成本低廉，经济效益显著、应用前景广泛。

公开(公告)号：CN101899534B

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201010173082.1

申请日：2010-05-14

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  金文杰 ,  刘岳龙 ,  李清 ,  钱琨 ,  邵红霞 ,  鹿钟文 ,  钟蕾 ,  鲍衍清 ,  王希 ,  刘学贤

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种用二重PCR技术对感染番鸭群中小鹅瘟病毒(Goose Parvovirus，GPV)和番鸭细小病毒(Muscovy Duck Parvovirus，MDPV)进行快速鉴别诊断的试剂盒及检测方法。本发明含有Taq DNA聚合酶(5U/μL)、10×PCR buffer、Mg2+(10mmol/L)、dNTP(10mmol/L)、2对特异性引物。通过对组织样品中DNA提取、PCR，从而鉴别出感染番鸭群的病毒类型。解决了现有技术无法快速鉴别两种病毒的缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速等特点，适于临床快速鉴别诊断。

公开(公告)号：CN101957375A

公开(公告)日：2011-01-26

申请号：CN201010295008.7

申请日：2010-10-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  杨功俊 ,  秦爱建 ,  吴丽萍 ,  王倩倩 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  余兵 ,  李东明 ,  蔡宝亮

IPC: G01N33/558 ,  G01N27/02 ,  G01N27/30

Abstract: 本发明涉及呋喃它酮残留物无标记的阻抗型免疫传感器，及其制备方法和应用，所说的该传感器通过金胶制备、金电极的预处理、1，4-苯二硫醇修饰金电极、单层纳米金胶的自组装和抗体的固定5个步骤而制得。其特征在于是将纳米金通过自组装方法固定于金电极表面，用来固定呋喃它酮残留物的单克隆抗体而构建得到。使用时，先建立阻抗的相对变化率%△Rct与AMOZ浓度的关系，再根据待测样品的阻抗相对变化率%△Rct就可确定其AMOZ浓度。采用本发明的传感器和检测方法具有快速简便的特点，解决当前呋喃它酮残留检测操作费时的缺陷。

公开(公告)号：CN1763534A

公开(公告)日：2006-04-26

申请号：CN200510095208.7

申请日：2005-10-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  许金俊 ,  李瑞芳 ,  金文杰 ,  邵红霞

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/531

Abstract: 奶牛结核病的快速检测方法及特异性单克隆抗体BovIFN－γ－4A3、BovIFN－γ－4G5的构建方法，涉及奶牛结核病的检测技术领域。用重组菌诱导表达的融合蛋白GST－BovIFN－γ免疫Balb/c小鼠，通过杂交瘤技术研制出抗BovIFN－γ的单克隆抗体，即获得特异性单克隆抗体BovIFN－γ－4A3和BovIFN－γ－4G5。单抗BovIFN－γ－4A3属于IgG2b亚类，单抗BovIFN－γ－4G5属于IgM亚类，能特异性识别BovIFN－γ。本发明在制备了rBovIFN－γ的基础上，研制出抗BovIFN－γ的单克隆抗体，以单克隆抗体为基础建立快速检测病牛血细胞分泌的IFN－γ量，从而判断奶牛的结核病感染情况。该方法检测步骤简单、敏感性高、快速，整个检测过程只需4小时。

公开(公告)号：CN1513996A

公开(公告)日：2004-07-21

申请号：CN03131926.2

申请日：2003-06-16

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  陈鸿军 ,  金文杰 ,  刘岳龙

IPC: C12N15/38 ,  C12N7/01 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/68 ,  A61K39/255

Abstract: 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产药物的技术领域，用PCR法从CVI988/Rispens弱毒疫苗株感染的鸭胚或鸡胚成纤维细胞(DEF)基因组DNA扩增UL49h基因片段，获得大小为732bp的PCR产物。将PCR产物克隆并测序分析，与经典MDV强毒GA株比较，确定弱毒株CVI988的UL49h存在3个定点突变(第172、244和733位bp)和一个缺失性突变，缺失的氨基酸为200TTKSER205，该位点亲水性强，用Jarmeson－Wolf法分析，该位点位于VP22主要的抗原决定簇区。利用CVI988 VP22基因或部分基因序列开发传导人或动物病原体主要保护性抗原、传导人或动物治疗性药物、提高目的蛋白的免疫保护效果和增强药物的疗效。

公开(公告)号：CN118894915A

公开(公告)日：2024-11-05

申请号：CN202411032283.8

申请日：2024-07-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 王胜男 ,  苗田田 ,  罗毅 ,  武佳妍 ,  李璟雯 ,  李拓凡 ,  谢泉 ,  万志敏 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  叶建强

IPC: C07K14/465 ,  C12N15/70 ,  C12N15/12 ,  C07K16/06 ,  C07K16/18 ,  C07K19/00 ,  G01N33/68 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种可溶性鸡源PML蛋白及其高效原核表达方法和应用，所述PML蛋白命名为PML‑P2，如SEQ ID NO:1所示。本发明筛选的蛋白PML‑P2不仅高效表达，其融合蛋白免疫小鼠产生的多抗血清，不仅能够与鸡源PML发生特异性反应，还能有效识别人、犬的细胞中内源性PML蛋白，表现出优异的广谱反应性，同时该多抗血清还能在免疫沉淀试验中高效地将外源高表达的鸡PML蛋白进行免疫沉淀。本发明表达载体构建及纯化的PML‑P2融合蛋白将为探究鸡源PML生物学功能及其在疾病中的作用提供有效的免疫学试剂，也为其他物种相关生物学研究提供了有效生物学材料。

公开(公告)号：CN118879777A

公开(公告)日：2024-11-01

申请号：CN202410983164.4

申请日：2024-07-22

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李拓凡 ,  王泽铭 ,  相汝苹 ,  武佳妍 ,  王胜男 ,  谢泉 ,  万志敏 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  叶建强

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/54 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9敲除鸡EphrinA2基因的细胞系的构建方法，包括如下步骤：设计特异性靶向鸡源EphrinA2基因的sgRNA；构建含有Cas9蛋白基因和特异性靶向鸡源EphrinA2基因的sgRNA的敲除质粒；对细胞进行转染，利用CRISPR‑Cas9系统达到基因沉默，随后通过亚克隆获得鸡源EphrinA2敲除细胞。本发明获得鸡源EphrinA2基因敲除的细胞模型，不仅方法成本低、效率高、简单易用，并且所构建的敲除鸡EphrinA2基因细胞系细胞活性显著降低，为解析EphrinA2在鸡体内中的功能作用及其在某些病毒入侵宿主中的作用与机制提供帮助。

公开(公告)号：CN118406798A

公开(公告)日：2024-07-30

申请号：CN202310045665.3

申请日：2023-01-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  吴少鹏 ,  丁天 ,  钱琨 ,  邵红霞 ,  叶建强

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种鉴别不同血清型马立克氏病病毒的方法及其组合物和试剂盒，该组合物含有SEQ ID NO.1‑6所示引物和SEQ ID NO.7‑10所示探针，试剂盒含有该组合物。本发明试剂盒可对I型和III型马立克氏病毒病毒进行定量检测，特异性强，与其他禽源病毒没有交叉反应；检测灵敏度高，在标准品为1×101～1×108拷贝范围内有极好的线性关系，能够同时准确定量马立克氏病病毒血清I型野毒、血清I型疫苗毒CVI988和血清III型疫苗毒HVT的拷贝数，还可用于免疫814或SC9‑1疫苗的鸡场的马立克氏病野毒感染的快速检测。