一种黄牛IGF2基因单核苷酸多态性的检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN103290123A

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201310204434.9

    申请日:2013-05-28

    Abstract: 本发明公开了一种黄牛IGF2基因单核苷酸多态性的检测方法及试剂盒,以包含IGF2基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,PCR扩增黄牛IGF2基因;通过DNA测序和限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术(PCR-RFLP)进行基因多态性的检测与快速分型,该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生长性状密切相关的分子遗传标记。本发明提供的检测方法可用于黄牛生长性状的分子标记辅助选择,进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。本发明检测方法简单、成本低,检测结果直接、可靠,适用于对黄牛IGF2基因突变位点的大规模的筛查和诊断。

    一种黄牛ZBED6基因单核苷酸多态性的检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN103290122A

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201310204433.4

    申请日:2013-05-28

    Abstract: 本发明公开了一种黄牛ZBED6基因单核苷酸多态性的检测方法及试剂盒,以包含ZBED6基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,PCR扩增黄牛ZBED6基因;通过DNA测序和PCR-RFLP技术进行基因多态性的检测与快速分型,该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生长性状密切相关的分子遗传标记,故本发明提供的检测方法可用于黄牛生长性状的分子标记辅助选择,进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。本发明检测方法简单、成本低,检测结果直接、可靠,适用于对黄牛ZBED6基因突变位点的大规模的筛查和诊断。

    秦川牛FoxO1基因单核苷酸多态性分子标记的检测方法与应用

    公开(公告)号:CN103233001A

    公开(公告)日:2013-08-07

    申请号:CN201210210461.2

    申请日:2012-06-25

    Abstract: 本发明公开了一种黄牛FoxO1基因的单核苷酸多态性及其检测方法,其基因单核苷酸多态性包括:以包含FoxO1基因的待测秦川牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增秦川牛FoxO1基因;用限制性内切酶HhaI消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据电泳结果鉴定秦川牛FoxO1基因第178132位的碱基多态性。由于FoxO1基因对动物肌肉脂肪性状、生长发育性状具有重要作用。所以,该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与秦川牛生长性状密切相关的分子遗传标记,以用于秦川牛的辅助选择和分子育种,加快秦川牛良种繁育速度。

    一种PAX6基因检测牛生长性状的方法及其诊断试剂盒

    公开(公告)号:CN103146810A

    公开(公告)日:2013-06-12

    申请号:CN201210549736.5

    申请日:2012-12-18

    Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛生长性状的基因诊断试剂盒,是一种PAX6基因检测黄牛生长性状的方法,该方法以包含PAX6基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增黄牛PAX6基因;通过DNA测序和PCR-SSCP技术进行基因多态性的检测与快速分型,该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生长性状密切相关的分子遗传标记,故本发明提供的检测方法可用于黄牛生长性状的分子标记辅助选择,进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。本发明检测方法简单、成本低,检测结果直接、可靠,适用于对黄牛PAX6基因第17056位突变的大规模的筛查和诊断。

    牛质粒型腺病毒载体pAd-ZBED6及其构建方法和用途

    公开(公告)号:CN103031336A

    公开(公告)日:2013-04-10

    申请号:CN201210524888.X

    申请日:2012-12-10

    Abstract: 本发明牛质粒型腺病毒载体pAd-ZBED6及其构建方法和用途,属于基因工程技术领域。牛质粒型腺病毒载体pAd-ZBED6的构建方法包括:(1)将秦川牛ZBED6基因插入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭质粒的CMV启动子之下,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-ZBED6;(2)Pme I线性化后转化含有pAdEasy-l质粒的E.coli BJ5183感受态细胞,利用E.coli BJ5183内Cre重组酶高效的同源重组系统,在细菌中完成pAdTrack-CMV-ZBED6和pAdEasy-1的同源重组,将正确的重组腺病毒质粒命名为pAd-ZBED6;(3)pAd-ZBED6经Pac I酶切线性化后,脂质体转染293A细胞和秦川牛原代肌肉细胞,产生并获得重组病毒颗粒。本发明可应用于秦川牛ZBED6基因功能研究、鉴定和对种子细胞进行改造,调控肌肉生长发育相关基因的代谢。

    一种检测黄牛PPARGC1A基因单核苷酸多态性的方法

    公开(公告)号:CN102888451A

    公开(公告)日:2013-01-23

    申请号:CN201210124717.8

    申请日:2012-04-25

    Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛PPARGC1A基因单核苷酸多态性的方法,以包含PPARGC1A基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增黄牛PPARGC1A基因,再进行琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物片段大小;然后进行SSCP多态性的检测。该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生长性状密切相关的分子遗传标记,故本发明提供的检测方法可用于中国黄牛肉用和生长性状的分子标记辅助选择,进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。

    奶山羊PITX1基因单核苷酸多态性位点及其检测方法和应用

    公开(公告)号:CN102649956A

    公开(公告)日:2012-08-29

    申请号:CN201210114962.0

    申请日:2012-04-18

    Abstract: 本发明奶山羊PITX1基因单核苷酸多态性位点及其检测方法和应用,属于动物分子遗传育种技术领域。该基因单核苷酸多态性位点包括奶山羊PITX1基因第201位为G或A的单核苷酸多态性位点,基因型为GG、GA、AA。通过以包含PITX1基因的DNA序列为模板,以引物对P为引物,PCR扩增奶山羊PITX1基因;然后利用限制性内切酶MspI对PCR产物进行酶切;再通过琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物即可鉴定奶山羊PITX1基因的单核苷酸多态性位点。本发明的方法具有能在奶山羊的标记辅助选择(MAS)育种中,有利于快速建立遗传资源优良的奶山羊种群,而且该方法操作简单、快速,成本低,而且检测的精确度高的优点。

    一种检测黄牛SREBP1c基因单核苷酸多态性的方法

    公开(公告)号:CN101875977B

    公开(公告)日:2012-05-23

    申请号:CN201010235173.3

    申请日:2010-07-23

    Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛SREBP1c基因单核苷酸多态性的方法,以包含SREBP1c基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增黄牛SREBP1c基因;用限制性内切酶Bgl I消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛SREBP1c基因第10914位的单核苷酸多态性。由于SREBP1c基因功能涉及体重、日增重、体斜长和胸围4个重要的生长性状,本发明提供的检测方法为SREBP1c基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础,以便用于中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS),快速建立遗传资源优良的黄牛种群。

    一种质粒型腺病毒载体pAd-NRIP1及其构建方法

    公开(公告)号:CN102399819A

    公开(公告)日:2012-04-04

    申请号:CN201110244070.8

    申请日:2011-08-24

    Abstract: 构建含秦川牛NRIP1(nuclear receptor interacting protein 1)基因的重组腺病毒载体,可应用于秦川牛NRIP1基因功能研究、鉴定和对种子细胞进行改造,调控肌肉、脂肪、生殖等组织相关基因的代谢。方法是将秦川牛NRIP1基因插入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭质粒的CMV启动子之下,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-NRIP1。PmeI线性化后转化含有pAdEasy-1质粒的E.coli BJ5183感受态细胞,利用E.coli BJ5183内Cre重组酶高效的同源重组系统,在细菌中完成pAdTrack-CMV-NRIP1和pAdEasy-1的同源重组。将正确的重组腺病毒质粒命名为pAd-NRIP1。pAd-NRIP1经PacI酶切线性化后,脂质体转染293A细胞产生并获得重组病毒颗粒。

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