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公开(公告)号:CN108107208A
公开(公告)日:2018-06-01
申请号:CN201711372077.1
申请日:2017-12-19
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535 , G01N21/78 , G01N21/31
Abstract: 本发明公开了一种基于F蛋白的检测血清8型禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒,包括包被有血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因F的表达蛋白的ELISA酶标板,阳性、阴性对照,HRP标记的兔抗鸡二抗,稀释液、显色液、洗涤液、终止液。本发明的ELISA试剂盒能特异性的检测出FAdV‑8抗体,而与抗流感病毒血清、抗马立克病毒血清、抗新城疫病毒血清、抗鸡传染性贫血病病毒血清、网状内皮细胞增生病病毒、抗血清4型禽腺病毒血清、抗减蛋综合征病毒血清以及SPF鸡血清不反应。因此,该试剂盒具有良好FAdV‑8的特异性,能用于FAdV‑8感染及免疫状况流行病学调查。
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公开(公告)号:CN105274089B
公开(公告)日:2018-04-20
申请号:CN201510802359.5
申请日:2015-11-19
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种表达绿色荧光囊膜融合蛋白的REV病毒传染性克隆的构建方法,是将特定PCR引物扩增出的绿色荧光EGFP基因片段,插入到线性化的REV病毒基因组Env基因的N端,利用商品化的重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应,直接在体外快速重组克隆,随后转化到大肠杆菌进行质粒扩增与鉴定;并将阳性克隆转染DF1细胞,拯救获得表达绿色荧光囊膜融合蛋白的REV病毒。
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公开(公告)号:CN106018780B
公开(公告)日:2017-12-26
申请号:CN201610327488.8
申请日:2016-05-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域,具体涉及一种基于F1蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F1蛋白的293T细胞,FITC标记的羊抗鸡抗体,样品稀释液,洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性;该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查,而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平,用于评价免疫保护性抗体水平等。
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公开(公告)号:CN107365787A
公开(公告)日:2017-11-21
申请号:CN201710763557.4
申请日:2017-08-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 具有免疫抑制作用禽白血病病毒衣壳蛋白真核表达载体的构建方法及应用,涉及病毒编码蛋白表达及功能研究生物技术领域。本发明以pGEX-6p-1-p27/BL21质粒作为模板,采用特异性引物进行PCR扩增,回收PCR片段后与pcDNA3.1载体链接,得到阳性的重组质粒,即具有抑制细胞对LPS和Poly(I:C)刺激免疫反应功能的真核表达载体。本发明构建方法简单、合理,真核表达载体转染细胞表达后,可应用于抑制LPS或Poly(I:C)刺激细胞免疫反应中,为抗禽白血病免疫抑制药物的研究与开发提供靶点。
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公开(公告)号:CN104357402B
公开(公告)日:2017-11-17
申请号:CN201410607122.7
申请日:2014-10-31
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: Y02A50/407
Abstract: 本发明公开了一种涉及两株能分泌具有预防和/或治疗作用的抗小鹅瘟病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株,细胞株利用纯化的小鹅瘟病毒免疫小鼠制备得到,分别命名为GPV‑Mab‑6D8和GPV‑Mab‑4E7,细胞保藏编号分别为CGMCC NO.9577和CGMCC NO.9578。一种具有预防和治疗小鹅瘟作用的单克隆抗体,所述单克隆抗体由保藏编号CGMCC NO.9577和CGMCC NO.9578的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明利用两株杂交瘤所制备的单克隆抗体不但可以在体外中和小鹅瘟病毒的感染,在动物实验中还能够预防和/或治疗小鹅瘟。
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公开(公告)号:CN104450695B
公开(公告)日:2017-08-25
申请号:CN201410704520.0
申请日:2014-11-26
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种流感病毒基因克隆方法,具体涉及A型流感病毒基因PCR扩增引物及A型流感病毒基因快速克隆方法。本发明提供了A型流感病毒8个基因片段的PCR扩增引物和流感病毒反向遗传线性化载体的引物。本发明还提供了A型流感病毒基因快速克隆方法,用上述引物通过PCR反应即聚合酶链式反应扩增出流感病毒基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体,然后利用重组酶将上述线流感病毒各基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体在体外重组克隆,并转化到大肠杆菌进行克隆。本发明的大大简化了传统的流感病毒反向遗传技术中的基因克隆过程,解决传统的流感病毒反向遗传技术中流感病毒基因的克隆过程复杂、效率不高的问题。
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公开(公告)号:CN106831957A
公开(公告)日:2017-06-13
申请号:CN201710248387.6
申请日:2017-04-17
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01
Abstract: 本发明涉及一种源于鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)VP1‑aa 1‑19多肽作为高效细胞穿膜肽的应用。所述VP1‑aa 1‑19多肽序列如SEQ ID NO.2所示。该多肽可以携带FITC在30min内进入293T细胞、HCT‑116细胞、3T3细胞、MDCK细胞、MSB1细胞,而且穿膜效率与穿膜肽浓度呈正相关性,关键特点其可高效进入悬浮培养细胞。结合激光共聚焦显微镜和流式细胞术结果显示,鸡传染性贫血病毒VP1‑aa 1‑19多肽的穿膜效率明显高于TAT短肽。
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公开(公告)号:CN106399347A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610838066.7
申请日:2016-09-21
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N15/70 , C07K14/005 , C12N2750/10022
Abstract: 本发明涉及一种GyV5新型环形病毒VP3蛋白的制备方法。该方法以pGEX-6p-1质粒以及GyV5病毒VP3基因为模板,PCR分别扩增出含pGEX-6p-1线性化载体以及GyV5病毒VP3基因片段,并利用重组酶ExnaseTM II进行快速重组克隆;阳性克隆转化到大肠杆菌,实现VP3蛋白表达。本发明可直接提供VP3蛋白作为GyV5诊断抗原;作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体;为开展GyV5血清学流行病学调查及VP3功能研究提供有效免疫学试剂,填补国内外空白。
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公开(公告)号:CN106318963A
公开(公告)日:2017-01-11
申请号:CN201610837858.2
申请日:2016-09-21
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N15/70 , C07K14/005 , C12N2750/10022
Abstract: 本发明涉及一种GyV6新型环形病毒VP3蛋白的制备方法。该方法是以pGEX-6p-1质粒以及GyV6病毒VP3基因为模板,PCR分别扩增出含pGEX-6p-1线性化载体以及GyV6病毒VP3基因片段,并利用重组酶进行快速重组克隆;阳性克隆转化到大肠杆菌,实现VP3蛋白表达。本发明可直接提供VP3蛋白作为GyV6诊断抗原;作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体;为开展GyV6血清学流行病学调查及VP3功能研究提供有效免疫学试剂,填补国内外空白。
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公开(公告)号:CN105385765A
公开(公告)日:2016-03-09
申请号:CN201510953062.9
申请日:2015-12-17
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2545/113 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
Abstract: 实时荧光绝对定量检测家禽beta连环蛋白的试剂盒及应用,属于分析检测领域,检测试剂盒包含上游引物β-catenin F:SEQ ID N0. 1,下游引物β-catenin R: SEQ IDN0. 2,以及TaqMan探针β-catenin P: 5‘-FAM-aag ctg act tga tgg agt tgga-TAMRA-3'。本发明可以精确定量检测标本中禽家β-catenin的mRNA表达量。该试剂盒可以用于鸡体内各组织脏器中禽家β-catenin的表达分析,也可以用于检测不同状态下细胞中禽家β-catenin表达水平的变化,具有高灵敏度、高特异性、高重复性的优点。
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