一种基于纤突蛋白F的检测血清8型禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒

    公开(公告)号:CN108107208A

    公开(公告)日:2018-06-01

    申请号:CN201711372077.1

    申请日:2017-12-19

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于F蛋白的检测血清8型禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒,包括包被有血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因F的表达蛋白的ELISA酶标板,阳性、阴性对照,HRP标记的兔抗鸡二抗,稀释液、显色液、洗涤液、终止液。本发明的ELISA试剂盒能特异性的检测出FAdV‑8抗体,而与抗流感病毒血清、抗马立克病毒血清、抗新城疫病毒血清、抗鸡传染性贫血病病毒血清、网状内皮细胞增生病病毒、抗血清4型禽腺病毒血清、抗减蛋综合征病毒血清以及SPF鸡血清不反应。因此,该试剂盒具有良好FAdV‑8的特异性,能用于FAdV‑8感染及免疫状况流行病学调查。

    一种表达绿色荧光囊膜融合蛋白的REV病毒传染性克隆的构建方法

    公开(公告)号:CN105274089B

    公开(公告)日:2018-04-20

    申请号:CN201510802359.5

    申请日:2015-11-19

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种表达绿色荧光囊膜融合蛋白的REV病毒传染性克隆的构建方法,是将特定PCR引物扩增出的绿色荧光EGFP基因片段,插入到线性化的REV病毒基因组Env基因的N端,利用商品化的重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应,直接在体外快速重组克隆,随后转化到大肠杆菌进行质粒扩增与鉴定;并将阳性克隆转染DF1细胞,拯救获得表达绿色荧光囊膜融合蛋白的REV病毒。

    具有预防和治疗小鹅瘟作用的单克隆抗体

    公开(公告)号:CN104357402B

    公开(公告)日:2017-11-17

    申请号:CN201410607122.7

    申请日:2014-10-31

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: Y02A50/407

    Abstract: 本发明公开了一种涉及两株能分泌具有预防和/或治疗作用的抗小鹅瘟病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株,细胞株利用纯化的小鹅瘟病毒免疫小鼠制备得到,分别命名为GPV‑Mab‑6D8和GPV‑Mab‑4E7,细胞保藏编号分别为CGMCC NO.9577和CGMCC NO.9578。一种具有预防和治疗小鹅瘟作用的单克隆抗体,所述单克隆抗体由保藏编号CGMCC NO.9577和CGMCC NO.9578的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明利用两株杂交瘤所制备的单克隆抗体不但可以在体外中和小鹅瘟病毒的感染,在动物实验中还能够预防和/或治疗小鹅瘟。

    A型流感病毒基因PCR扩增引物及其快速克隆方法

    公开(公告)号:CN104450695B

    公开(公告)日:2017-08-25

    申请号:CN201410704520.0

    申请日:2014-11-26

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种流感病毒基因克隆方法,具体涉及A型流感病毒基因PCR扩增引物及A型流感病毒基因快速克隆方法。本发明提供了A型流感病毒8个基因片段的PCR扩增引物和流感病毒反向遗传线性化载体的引物。本发明还提供了A型流感病毒基因快速克隆方法,用上述引物通过PCR反应即聚合酶链式反应扩增出流感病毒基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体,然后利用重组酶将上述线流感病毒各基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体在体外重组克隆,并转化到大肠杆菌进行克隆。本发明的大大简化了传统的流感病毒反向遗传技术中的基因克隆过程,解决传统的流感病毒反向遗传技术中流感病毒基因的克隆过程复杂、效率不高的问题。

    一种GyV5新型环形病毒VP3蛋白制备方法

    公开(公告)号:CN106399347A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610838066.7

    申请日:2016-09-21

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12N15/70 C07K14/005 C12N2750/10022

    Abstract: 本发明涉及一种GyV5新型环形病毒VP3蛋白的制备方法。该方法以pGEX-6p-1质粒以及GyV5病毒VP3基因为模板,PCR分别扩增出含pGEX-6p-1线性化载体以及GyV5病毒VP3基因片段,并利用重组酶ExnaseTM II进行快速重组克隆;阳性克隆转化到大肠杆菌,实现VP3蛋白表达。本发明可直接提供VP3蛋白作为GyV5诊断抗原;作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体;为开展GyV5血清学流行病学调查及VP3功能研究提供有效免疫学试剂,填补国内外空白。

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