对鲍氏志贺氏菌15型、痢疾志贺氏菌2型和大肠杆菌0112的O-抗原特异的核苷酸

    公开(公告)号:CN1438230A

    公开(公告)日:2003-08-27

    申请号:CN03100538.1

    申请日:2003-01-20

    Applicant: 南开大学

    Inventor: 王磊 郭宏杰 冯露

    Abstract: 本发明提供一种对鲍氏志贺氏菌15型、痢疾志贺氏菌2型和大肠杆菌0112的O-抗原特异的核苷酸,它是鲍氏志贺氏菌15型(Shigella boydii 15)中控制O-抗原合成的基因簇的核苷酸全序列;还包括O-抗原基因簇的结构以及源于鲍氏志贺氏菌15型的O-抗原基因簇中的糖基转移酶基因和寡糖单位处理基因(包括wzx基因或与wzx有相似功能的基因、wzy基因或与wzy有相似功能的基因)的寡核苷酸,并且包括获得细菌O-抗原基因簇的方法;本发明通过PCR证实它们对鲍氏志贺氏菌15型、痢疾志贺氏菌2型和大肠杆菌0112的O-抗原都有高度的特异性;本发明还公开了用本发明的寡核苷酸检测和鉴定人体及环境中的鲍氏志贺氏菌15型,痢疾志贺氏菌2型和大肠杆菌0112的方法。

    对痢疾志贺氏菌8型的O-抗原特异的核苷酸

    公开(公告)号:CN1429833A

    公开(公告)日:2003-07-16

    申请号:CN03100539.X

    申请日:2003-01-20

    Applicant: 南开大学

    Inventor: 王磊 郭宏杰 冯露

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明提供一种对痢疾志贺氏菌8型(Shigelladysenteriae 8)的O-抗原特异的核苷酸,它是痢疾志贺氏菌8型中控制O-抗原合成的基因簇的核苷酸全序列,如SEQ IDNO:1所示的分离的核苷酸,全长9227个碱基;或者具有一个或多个插入、缺失或取代的碱基,同时保持所述分离的核苷酸功能的SEQ ID NO:1的核苷酸;还包括源于痢疾志贺氏菌8型的O-抗原基因簇中的糖基转移酶基因和寡糖单位处理基因的寡核苷酸;本发明通过PCR证实寡核苷酸对痢疾志贺氏菌8型的O-抗原都有高度的特异性;本发明还公开了用本发明的寡核苷酸检测和鉴定人体及环境中的痢疾志贺氏菌8型的方法。

    一种对副溶血弧菌O9血清型O抗原分子分型的LAMP检测方法

    公开(公告)号:CN110684825A

    公开(公告)日:2020-01-14

    申请号:CN201911043452.7

    申请日:2019-10-30

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及一种对副溶血弧菌O9血清型O抗原分子分型的LAMP检测方法。本发明以副溶血弧菌O9的O抗原基因簇内的特异基因,即wvdH为靶基因,建立了对副溶血弧菌O9的O抗原分型的四条引物,为肠道及水环境中副溶血弧菌的O抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明的LAMP引物检测肠道及水环境中的副溶血弧菌,并且对其进行O抗原分型,具有操作简单、快速高效、高灵敏度等诸多优点。

    合成致新生儿脑膜炎大肠杆菌糖蛋白结合疫苗的大肠杆菌工程菌及用途

    公开(公告)号:CN108774628A

    公开(公告)日:2018-11-09

    申请号:CN201810705416.1

    申请日:2018-07-02

    Applicant: 南开大学

    Inventor: 王磊 黄笛 江小龙

    Abstract: 本发明公开了一种合成致新生儿脑膜炎大肠杆菌糖蛋白结合疫苗的大肠杆菌工程菌及用途。涉及构建合成致新生婴儿脑膜炎大肠杆菌O1血清型糖蛋白结合疫苗细胞工厂的方法。它是利用酿酒酵母高效的同源重组效率,基于DNA Assembler的方法,构建O1抗原合成基因簇质粒。在大肠杆菌JM109中转化O1抗原合成基因簇穿梭质粒,通过脂多糖提取,凝胶电泳和银染鉴定质粒;在FLP-FRT辅助下删除JM109中的waaL和wecA,排除原始不完整O抗原的干扰。改造pET28a(+)质粒,经诱导,合成糖蛋白结合疫苗,借助于AKTA Primeplus蛋白纯化工作站纯化糖蛋白并通过western-blotting鉴定该糖蛋白。本发明构建的重组大肠杆菌为生物法合成糖蛋白结合疫苗提供了新的思路。

    对柠檬酸杆菌O6和O9特异的核苷酸及其应用

    公开(公告)号:CN105219769B

    公开(公告)日:2018-05-15

    申请号:CN201510680492.8

    申请日:2015-10-20

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及柠檬酸杆菌O6和O9血清型特异的核苷酸及其应用,所述核苷酸为SEQ ID NO:1‑4所示的核苷酸中的至少一种。这些核苷酸可用于制备检测柠檬酸杆菌用PCR试剂盒。所述的柠檬酸杆菌可以取样于消化道、尿液、血液和伤口培养物的粗提液,也可以从人类和动物粪便环境中分离得到。本发明对柠檬酸杆菌O6和O9血清型特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒,PCR试剂盒配制方法简便,检测周期短、速度快,可操作性强,易于产业化生产,而检测成本却相对较低;准确性高;灵敏度高。

    对霍乱弧菌O18,O19,O23和O12特异的核苷酸及其应用

    公开(公告)号:CN105087569B

    公开(公告)日:2017-08-25

    申请号:CN201510562604.X

    申请日:2015-09-07

    Applicant: 南开大学

    CPC classification number: Y02A50/451 Y02A50/52

    Abstract: 本发明涉及一种对霍乱弧菌(Vibro cholerae)O抗原特异的核苷酸及其应用,所述核苷酸包括1)SEQ ID NO:1‑8所示的核苷酸中的至少一种;2)与SEQ ID NO:1‑8所示的核苷酸互补的核苷酸中的至少一种。这些核苷酸可用于制备检测霍乱弧菌用PCR试剂盒和基因芯片。本发明的对霍乱弧菌O抗原特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒、基因芯片的实用性强,PCR试剂盒配制方法简便,检测周期短、速度快,可操作性强,易于产业化生产,而检测成本却相对较低;准确性高;灵敏度高。

    对嗜肺军团菌O12型的wzm和wecA基因特异的核苷酸及其应用

    公开(公告)号:CN106929573A

    公开(公告)日:2017-07-07

    申请号:CN201710091774.3

    申请日:2017-02-21

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及一种对嗜肺军团菌血清型O12型的wzm与wecA基因特异的核苷酸及其应用,所述核苷酸为:SEQ ID NO:1所示的核苷酸和/或SEQ ID NO:2所示的核苷酸;SEQ ID NO:3所示的核苷酸和/或SEQ ID NO:4所示的核苷酸;与上述的核苷酸互补的核苷酸。这些核苷酸可用于制备检测嗜肺军团菌血清型O12型的PCR试剂盒、基因芯片或微阵列。本发明对嗜肺军团菌血清型O12型的wecA与wzm基因特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒、基因芯片或微阵列的实用性强,PCR试剂盒配制方法简便,检测周期短、速度快,可操作性强,易于商品化生产,而检测成本却相对较低;准确性高;灵敏度高。

    对普罗威登斯菌O31,O41,O42,O43和O50特异的核苷酸及其应用

    公开(公告)号:CN103993090B

    公开(公告)日:2016-05-11

    申请号:CN201410235140.7

    申请日:2014-05-29

    Applicant: 南开大学

    CPC classification number: C12N15/11 C12Q1/68 C12R1/01

    Abstract: 本发明涉及对普罗威登斯菌O31,O41,O42,O43和O50血清型特异的核苷酸及其应用,所述核苷酸包括1)SEQ ID NO:1-10所示的核苷酸中的至少一种;2)与SEQ ID NO:1-10所示的核苷酸互补的核苷酸中的至少一种。这些核苷酸可用于制备检测普罗威登斯菌用PCR试剂盒和基因芯片。本发明的对普罗威登斯菌O31,O41,O42,O43和O50血清型特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒、基因芯片的实用性强,PCR试剂盒配制方法简便,检测周期短、速度快,可操作性强,易于产业化生产,而检测成本却相对较低;准确性高;灵敏度高。

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