胞外酶催化合成鼠李糖脂的方法

    公开(公告)号:CN113249419B

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202110466767.3

    申请日:2021-04-28

    Abstract: 本发明公开了胞外酶催化合成鼠李糖脂的方法,利用鼠李糖基转移酶RhlB在胞外催化鼠李糖脂前体dTDP‑L‑鼠李糖和HAAs合成鼠李糖脂。其中dTDP‑L‑鼠李糖和HAAs基于基因改造菌株生产,其中一株菌可合成dTDP‑L‑rhamnose但不能合成HAAs,另外一株菌只能合成HAAs不能合成dTDP‑L‑rhamnose。将这两株菌合成的鼠李糖脂前体进行混合后,可在胞外利用鼠李糖脂合成酶RhlB在胞外催化前体dTDP‑L‑rhamnose和HAAs间连接合成鼠李糖脂。本发明的方法在实施过程中仅需短暂摇匀混合,可以解决鼠李糖脂发酵过程中大量起泡的问题,在鼠李糖脂生物合成领域具有广泛的应用前景。

    一种工程菌株全细胞催化合成没食子酸的方法

    公开(公告)号:CN116769846A

    公开(公告)日:2023-09-19

    申请号:CN202310869995.4

    申请日:2023-07-17

    Abstract: 本发明涉及一种工程菌株全细胞催化合成没食子酸的方法,包括:构建表达具核梭杆菌单宁酶的重组大肠杆菌基因工程菌;利用重组大肠杆菌基因工程菌全细胞催化底物合成没食子酸;其中,所述具核梭杆菌单宁酶的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的方法以新来源的单宁酶构建重组大肠杆菌基因工程菌作为没食子酸合成的全细胞催化剂,可在高温条件下催化单宁底物合成没食子酸,且以塔拉粉作为底物时37℃就有良好的催化合成效果,整体反应可在12h内达到平衡,并可利用高浓度底物获取高产量的没食子酸。

    聚氨酯降解酶特异性荧光探针、其制备方法及应用

    公开(公告)号:CN115109079B

    公开(公告)日:2023-07-04

    申请号:CN202210703623.X

    申请日:2022-06-21

    Abstract: 本发明涉及聚氨酯降解酶特异性荧光探针、其制备方法及应用。利用4,4’‑亚甲基双(异氰酸苯酯)与1,4’‑丁二醇合成聚氨酯骨架结构后,将荧光分子与3‑氨基丙酸反应得到带羧基的荧光分子,所述带羧基的荧光分子与合成的所述聚氨酯骨架结构上的羟基发生酯化反应,得到所述聚氨酯降解酶特异性荧光探针。本发明设计的探针对参与聚氨酯降解的酯酶具有高度选择特异性,可以有效避免其他非特异性酶的干扰。探针被菌株分泌的酯酶水解后具有荧光增强效应,利用菌株对荧光探针水解效果不同导致的荧光差异为筛选指标,进行液滴微流控分选,挑选出荧光强度高的菌株。

    一种基于表面活性剂调控的β-榄香烯双相发酵生产方法

    公开(公告)号:CN116254300A

    公开(公告)日:2023-06-13

    申请号:CN202310219279.1

    申请日:2023-03-09

    Abstract: 本发明公开了一种基于表面活性剂调控的β‑榄香烯双相发酵生产方法,包括:取活化后的产天然产物β‑榄香烯的酵母菌菌种接种到合成培养基中培养得到种子液;将所述种子液接入合成培养基,使得初始OD为0.5~0.8,在28~30℃、180~240rpm条件下培养16~24h;之后加入萃取剂,再于28~30℃、180~240rpm条件下培养至72h;之后加入表面活性剂,继续培养至168~192h,收集有机相,即得。本发明通过优化表面活性剂的种类、添加量和添加时间,提高发酵系统中β‑榄香烯的生产效率,具有工艺简单,无环境污染物产生,适合于工业化生产的优点。

    一种双酶完全解聚热塑性聚酯型聚氨酯塑料的方法

    公开(公告)号:CN115896193A

    公开(公告)日:2023-04-04

    申请号:CN202310054434.9

    申请日:2023-02-03

    Abstract: 本发明属于环境科学领域,涉及一种双酶完全解聚热塑性聚酯型聚氨酯塑料的方法,具体以聚酯型聚氨酯塑料为底物,加入酯酶PETase和酯酶Aes72进行解聚反应。其中PETase水解酯键部分,Aes72主要水解氨基甲酸酯键,双酶协同促进热塑性聚酯型聚氨酯塑料的完全解聚。本发明利用双酶降解PBA‑PU,提高酶解效率的同时可以将PBA‑PU完全解聚成单体MDA,利用解聚后产生的单体进行再聚合或者其他高值化利用,从而提高产物利用率,提高酶法降解热塑性聚酯型聚氨酯塑料的竞争优势。

    一种表面展示PET解聚酶的重组黏细菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN115725491A

    公开(公告)日:2023-03-03

    申请号:CN202211322969.1

    申请日:2022-10-27

    Abstract: 本发明提供了一种表面展示PET解聚酶的重组黏细菌及其构建方法与应用,以黄色黏球菌M.xanthus DK1622作为底盘细胞,将信号肽、PET解聚酶、锚定肽的基因序列的重组表达质粒导入所述底盘细胞后得到;所述PET解聚酶为密码子优化后的PET解聚酶DuraPETase,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;编码所述信号肽SP的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;编码所述锚定肽的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。本发明提供的重组黄色黏球菌M.xanthus DK1622可实现聚对苯二甲酸乙二醇酯水解酶(DuraPETase)的表达,并实现对聚酯型模式底物Impranil DLN的水解,有望实现塑料污染的原位修复。

    一种提高废弃涤纶布料酶降解效率的化学预处理方法

    公开(公告)号:CN112853764B

    公开(公告)日:2022-10-25

    申请号:CN202110250290.5

    申请日:2021-03-08

    Abstract: 本发明公开一种提高废弃涤纶布料酶降解效率的化学预处理方法,包括:将洁净、干燥的废弃涤纶布料溶于有机溶剂中,得到涤纶溶液,之后倒入水中,使得涤纶析出,后加入到含有涤纶降解酶LCC的酶催化体系中,于pH=8,温度67℃条件下进行涤纶的酶降解。采用本发明的方法,能将涤纶废弃布料的结晶度从45%降低到约40%,能将原本不可直接生物降解的废弃涤纶的酶降解效率提高到56%。与现有的技术相比,本方法具有绿色无污染、可操作性强、降解率大幅提高的特点。

    一种鼠李糖脂酸沉淀的方法

    公开(公告)号:CN109265500B

    公开(公告)日:2022-02-22

    申请号:CN201811071999.3

    申请日:2018-09-14

    Abstract: 本发明涉及一种鼠李糖脂酸沉淀的方法,采用离心的方法去除菌体,收集上清液,然后将收集的上清液置于水浴锅中水浴除蛋白,采用离心的方法去除沉淀的蛋白,收集上清液,加入磷酸调节pH至2让鼠李糖脂析出,产生沉淀,在4℃静置18h。最后经过离心收集鼠李糖脂沉淀。本发明的方法通过水浴去蛋白结合磷酸沉淀获取鼠李糖脂,鼠李糖脂回收率高、纯度高,此外,本发明的方法操作简单、经济,高效,适合工业化的批量生产。

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