公开(公告)号：CN115710558A

公开(公告)日：2023-02-24

申请号：CN202211251721.0

申请日：2022-10-13

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 董维亮 ,  荣欢 ,  姜岷 ,  刘嘉唯 ,  周杰

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/65 ,  C12N9/16 ,  C12N15/70 ,  C12N15/55 ,  C12P7/44 ,  B09B3/60 ,  C12R1/84 ,  B09B101/75

Abstract: 本发明公开了一种间接表面展示PETase蛋白的重组毕赤酵母，包括：(1)在毕赤酵母GS115中异源表达3×IM7‑SED1融合蛋白，构建IM7酵母。(2)在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达CL7‑PETase融合蛋白，构建CL7‑PETase蛋白。(3)将IM7酵母和CL7‑PETase蛋白进行结合，实现PETase蛋白在毕赤酵母上的表面展示。本发明采用的间接表面展示的构建方法，克服了直接表面展示系统的表达量不足的缺点，同时与游离酶相比具有稳定性高，分离回收容易，连续操作可控，工艺简便的特点，并且表面展示酶区别于传统的物理或化学的固定化方法，对于PET这种刚性底物，表面展示酶更能充分有效地与底物接触，最大限度催化底物，可作为全细胞催化剂应用于PET塑料降解中的应用。

公开(公告)号：CN115896193A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202310054434.9

申请日：2023-02-03

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 董维亮 ,  荣欢 ,  姜岷 ,  刘嘉唯 ,  周杰

IPC: C12P13/00

Abstract: 本发明属于环境科学领域，涉及一种双酶完全解聚热塑性聚酯型聚氨酯塑料的方法，具体以聚酯型聚氨酯塑料为底物，加入酯酶PETase和酯酶Aes72进行解聚反应。其中PETase水解酯键部分，Aes72主要水解氨基甲酸酯键，双酶协同促进热塑性聚酯型聚氨酯塑料的完全解聚。本发明利用双酶降解PBA‑PU，提高酶解效率的同时可以将PBA‑PU完全解聚成单体MDA，利用解聚后产生的单体进行再聚合或者其他高值化利用，从而提高产物利用率，提高酶法降解热塑性聚酯型聚氨酯塑料的竞争优势。