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公开(公告)号：CN113827714A
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN202111130198.1
申请日：2021-09-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , A61K39/39 , A61K39/385 , A61P31/16 , C07K19/00 , C07K14/11 , C12N15/62 , C12N15/866 , C12N7/01
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种H7N9亚型禽流感病毒样颗粒疫苗制剂及制备和应用。本发明提供的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒疫苗制剂包含重组嵌合蛋白HMN和H7N9亚型禽流感病毒样颗粒，其中，所述的重组嵌合蛋白HMN由禽流感病毒保守性抗原表位、蜂毒信号肽以及6x‑His标签蛋白嵌合而成，该重组嵌合蛋白HMN与H7N9亚型禽流感病毒样颗粒抗原联合使用，弥补了禽流感病毒样颗粒疫苗针对变异毒株交叉保护效力不足的缺陷，针对H7N9亚型变异毒株的攻击提供完全的保护，从而实现对禽流感疫情更有效的防控。
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公开(公告)号：CN113527476A
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN202110714355.7
申请日：2021-06-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗H5亚型禽流感病毒新纳米抗体及其应用，所述抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。并将抗体基因通过连接肽与麦芽糖结合蛋白(MBP)基因连接，构建表达载体，诱导融合蛋白表达，来促进抗H5禽流感病毒纳米抗体融合蛋白在表达系统中的可溶表达，从而解决了抗H5禽流感纳米抗体蛋白在原核系统呈不可溶的难题，提高了准确性和重复性。可用于探测、诊断、预防或治疗禽流感病毒，特别是H5亚型禽流感病毒。对鸡H5禽流感的监测具有重大的意义。
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公开(公告)号：CN113308477A
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202110379859.8
申请日：2021-04-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种优化的鸭IL‑2基因真核表达重组质粒及其制备方法。本发明首先根据鸭密码子偏嗜性将鸭IL‑2基因进行优化，所得优化的鸭IL‑2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，再将优化的鸭IL‑2基因连接到真核表达载体pCAGGK，得到了鸭IL‑2基因真核表达重组质粒。本发明获得的真核表达重组质粒在细胞内能成功表达鸭IL‑2蛋白，真核表达重组质粒可作为免疫增强剂和免疫佐剂使用，增强鸭类体内细胞和体液免疫反应，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN113009156A
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN202110300708.9
申请日：2021-03-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用绿色荧光蛋白报告基因检测犬IFN‑α生物学活性的方法，属于蛋白活性检测技术领域。本发明将犬ISRE启动子片段插入带有绿色荧光蛋白的质粒中，构建表达绿色荧光蛋白的重组质粒，通过检测绿色荧光蛋白的表达情况来判断ISRE启动子的激活情况，从而检测犬α‑IFN生物学活性。本发明利用绿色荧光蛋白报告基因检测犬α‑IFN生物学活性的方法与传统检测方法MDCK‑VSV相比，避免了VSV病毒感染人的风险，提高了生物安全性。本发明操作简单，可重复性高，成本低，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN110184284B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201910429596.X
申请日：2019-05-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种携带NanoLuc基因的重组禽流感病毒及其在活体成像小鼠模型中的应用。本发明提供了一种DNA片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，可将其用于构建重组质粒、重组病毒和小鼠模型。本发明中构建一种重组禽流感病毒，其与野生型病毒的复制能力和致病力相近。在SPF鸡胚传代中，收集的4代病毒液都能检测到NanoLuc荧光素酶基因，具有良好的稳定性。本发明中还成功构建了活体成像小鼠模型，具有可视化功能，在不需要剖解小鼠情况下，能够检测流感病毒在小鼠的分布位置。能够实现纵向评估，在同一小鼠上连续时间观察流感病毒的感染动态过程，为流感病毒的研究补充了一种可视化工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108486108B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201810220691.4
申请日：2018-03-16
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开一种敲除人HMGB1基因的细胞株及其应用，属于分子生物学领域。本发明提供一种靶向敲除人HMGB1基因的gRNA序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。利用CRISPR‑Cas9技术首次在人Huh7细胞基因组上敲除HMGB1基因，使得HMGB1蛋白的表达完全丧失，获得HMGB1敲除的Huh7细胞株，且敲除细胞株形态、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异，是较为理想的HMGB1敲除的细胞模型；且操作简便，周期短，成本低，改造后细胞株稳定，可用于研究HMGB1蛋白在自噬、凋亡、细胞炎症、病毒感染等方面的具体作用机制。本发明获得的细胞株能够显著增强乙型脑炎病毒毒株的感染。
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公开(公告)号：CN110878368A
公开(公告)日：2020-03-13
申请号：CN201911236437.4
申请日：2019-12-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了一种可检测SNP的新型LAMP方法，包括以下步骤：(1)提取DNA为待检测模板；(2)设计荧光基团修饰的环引物探针、内引物和外引物，环引物探针具有与DNA突变位点相结合的RNA碱基；(3)建立反应体系，将待检测模板加入到反应体系中，检测反应物是否产生荧光信号，若产生荧光信号则表示待检测模板中具有目标DNA，若未产生荧光信号则表示待检测模板中无目标DNA。相应的，本发明还公开了基于上述方法的用于检测鸡白痢沙门菌的引物组和试剂盒。本发明的检测方法具有特异性强和灵敏度高的优点。
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公开(公告)号：CN110878367A
公开(公告)日：2020-03-13
申请号：CN201911236426.6
申请日：2019-12-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6858 , C12Q1/10 , C12N15/11 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了一种可检测SNP的新型CPA方法，包括以下步骤：(1)提取DNA为待检测模板；(2)设计交叉引物组，交叉引物上设计与该DNA突变位点相结合的RNA碱基；(3)建立反应体系，反应体系中包含RnaseHⅡ酶，将待检测模板加入到反应体系中进行扩增，当交叉引物与DNA突变位点相结合时，激活RnaseHⅡ酶发生切割，使扩增反应继续进行，当交叉引物与DNA突变位点不能结合时，扩增反应无法进行；(4)判断反应物中是否具有目标DNA。相应的，本发明还公开了基于上述方法的用于检测鸡白痢沙门菌的引物组和试剂盒。本发明的检测方法具有特异性强和灵敏度高的优点。
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公开(公告)号：CN110184284A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910429596.X
申请日：2019-05-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种携带NanoLuc基因的重组禽流感病毒及其在活体成像小鼠模型中的应用。本发明提供了一种DNA片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，可将其用于构建重组质粒、重组病毒和小鼠模型。本发明中构建一种重组禽流感病毒，其与野生型病毒的复制能力和致病力相近。在SPF鸡胚传代中，收集的4代病毒液都能检测到NanoLuc荧光素酶基因，具有良好的稳定性。本发明中还成功构建了活体成像小鼠模型，具有可视化功能，在不需要剖解小鼠情况下，能够检测流感病毒在小鼠的分布位置。能够实现纵向评估，在同一小鼠上连续时间观察流感病毒的感染动态过程，为流感病毒的研究补充了一种可视化工具。
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公开(公告)号：CN105497887B
公开(公告)日：2019-08-09
申请号：CN201510934797.7
申请日：2015-12-15
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , C12N15/866 , C12N7/01 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种提高禽流感灭活疫苗异源保护力的辅助制剂及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明所述的辅助制剂是以杆状病毒为载体，能够在脊椎动物体内表达禽流感病毒保守抗原表位的重组杆状病毒。禽流感病毒快速变异，而现有禽流感灭活疫苗对异源毒株保护力弱，本发明将禽流感病毒高度保守、具有交叉保护作用的抗原片段HA2 76‑130、3M2e、NP55‑69、NP380‑393的编码基因插入杆状病毒基因组，制备成经肌肉注射免疫的禽流感灭活疫苗辅助制剂，与灭活苗联合使用。该辅助制剂克服了传统禽流感灭活疫苗对异源毒株交叉保护力方面的不足，从而实现对禽流感疫情有效的防控。
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