-
公开(公告)号:CN104560865A
公开(公告)日:2015-04-29
申请号:CN201410831496.7
申请日:2014-12-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗A亚群禽白血病病毒的细胞系及其构建方法与应用,属于农业生物技术领域。本发明中所述的抗A亚群禽白血病病毒的细胞系,命名为抗ALV-A鸡胚成纤维细胞系DF-1/A;保藏于中国典型培养物保藏中心;保藏地址为中国武汉武汉大学;保藏编号为CCTCC NO:C2014180;保藏起始日期为2014年10月15日;所述的抗A亚群禽白血病病毒的细胞系应用于A亚群禽白血病病毒的诊断。本发明所得到的抗A亚群禽白血病病毒的细胞系可以稳定传代,长期保存;利用ALV超感染的特性,可以有助于准确鉴别ALV的亚群分类,可应用于A亚群禽白血病病毒的诊断。
-
公开(公告)号:CN102839195A
公开(公告)日:2012-12-26
申请号:CN201210248620.8
申请日:2012-07-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/866 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种利用pFast Bac Dual杆状病毒表达PCV2Cap蛋白的方法,该方法包括以下步骤:扩增带有His标签的编码PCV 2 Cap蛋白的基因片段;将上述基因片段连接到pFast Bac Dual质粒上,获得重组转移质粒pFast Bac-p10-ORF2-pH-ORF2;将重组转移质粒转化大肠杆菌DH10Bac,经蓝白斑筛选后得到重组穿梭载体Bac-p10-ORF2-pH-ORF2;将重组穿梭载体转染昆虫细胞,获得重组杆状病毒Ac.Dual-Cap;将重组杆状病毒接毒于昆虫细胞,培养后收集昆虫细胞,将表达产物纯化后得到重组Cap蛋白。本发明方法解决了Cap蛋白在真核细胞中表达量低的难题。本发明方法重组的Cap蛋白设计有His标签,利于其后续的纯化,并且其生物活性优于原核表达系统所表达的Cap蛋白,可以应用于流行病学诊断方法的建立及PCV2亚单位疫苗的研发。
-
公开(公告)号:CN102250950A
公开(公告)日:2011-11-23
申请号:CN201110135709.9
申请日:2011-05-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于DNA水平的乙型脑炎病毒复制子载体系统及其构建方法和应用。本发明是利用RT-PCR和融合PCR的方法,以改造过的低拷贝质粒pOKM为骨架,在缺失绝大部分结构基因(第165-2402核苷酸)的情况下,构建包括CMV启动子、5’UTR、C蛋白N端的前23个氨基酸(C23)、E蛋白C端的25个氨基酸(E25)、所有非结构蛋白、3’UTR、核酶(HDVr)和polyA序列的基于DNA水平的JEV复制子载体系统。为了检测构建的JEV复制子能否表达外源基因,构建含有报告基因EGFP的质粒pJEV-REP-GFP-IRES与pJEV-REP-GFP。
-
公开(公告)号:CN101220375B
公开(公告)日:2011-07-27
申请号:CN200710062632.0
申请日:2007-01-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/863 , A61K31/7088 , A61K48/00
Abstract: 本发明提供了一种鸡痘病毒双基因表达载体,其具有SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列,包括启动子P7.5、LacZ基因、位于LacZ基因上的多克隆位点、稀有酶切位点Not1、鸡痘病毒DNA同源臂TK1和TK2、KanR抗性标记基因、复制起点(ori),以及连接区段。本发明构建的双基因表达载体,最大限度地减少了载体长度,从而可以容纳更大的外源基因;增加了可用酶切位点数量,方便克隆不同的外源基因;对插入位点Not1处的启动子不作限定,可以自由选择与外源基因搭配的启动子,从而提高了表达效率,并且,采用反式表达的方法,从而提高了外源基因的表达效率。
-
公开(公告)号:CN100432047C
公开(公告)日:2008-11-12
申请号:CN200610036326.5
申请日:2006-07-03
Applicant: 华南农业大学 , 广东温氏食品集团有限公司
IPC: C07C251/06 , C07C249/02 , A61K31/155 , A61P31/12 , A61P11/00
Abstract: 本发明涉及药物化合物领域,公开了一种抗流感及禽流感病毒药物帕拉米韦的合成方法。本发明以文斯内酰胺和2-乙基丁醛为主要原料,采用八步法合成帕拉米韦。本发明的制备方法步骤简单、操作易行;不用二氧化铂作催化剂,原料便宜;不用苯氰、苯等有毒试剂,降低了环保要求。产率高,单步反应达到80%~95%,总产率可达52.7%。
-
公开(公告)号:CN101220374A
公开(公告)日:2008-07-16
申请号:CN200710062631.6
申请日:2007-01-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/863 , A61K48/00 , A61K31/7088
Abstract: 本发明提供了一种鸡痘病毒双基因表达载体,其具有SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列,包括启动子P7.5、LacZ基因、位于LacZ基因上的多克隆位点、稀有酶切位点Not1、鸡痘病毒DNA同源臂F11L1和F11L2、AmpR抗性标记基因、复制起点(ori)。本发明构建的双基因表达载体,最大限度地减少了载体长度,从而可以容纳更大的外源基因;增加了可用酶切位点数量,方便克隆不同的外源基因;对插入位点Not1处的启动子不作限定,可以自由选择与外源基因搭配的启动子,从而提高了表达效率,并且,采用反式表达的方法,从而提高了外源基因的表达效率。
-
公开(公告)号:CN101195830A
公开(公告)日:2008-06-11
申请号:CN200710032964.4
申请日:2007-12-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种简单快捷构建克隆载体的方法,简称LJY法和用此方法已构建好的4个克隆载体。本发明以pBR322的AmpR基因和ori复制起始点为骨架,通过独特的引物设计方法和平端连接,可简单快速地在新构建的克隆载体质粒中引入所需的限制性内切酶识别位点,并有效地提高载体的外源基因容量和稳定性,避免大片段基因克隆时常出现的目的基因意外突变等问题。
-
公开(公告)号:CN119033926A
公开(公告)日:2024-11-29
申请号:CN202411010424.6
申请日:2024-07-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , C12N15/867 , C12N15/12 , C12N15/113 , A61K48/00 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了调控C4BPM表达的试剂盒在制备抗禽流感病毒制剂中的应用。本发明发现C4BPM过表达有利于禽流感病毒增殖,敲除C4BPM,抑制C4BPM表达,则抑制禽流感病毒增殖。本发明首次公开了C4BPM是对禽流感病毒增殖具有重要影响的宿主因子。促进C4BPM表达的鸡源细胞有利于禽流感病毒的增殖,从而可用于禽流感疫苗的制备;抑制C4BPM表达的鸡源细胞则抑制禽流感病毒的增殖,因此,抑制C4BPM表达的试剂能开发作为抗禽流感病毒的药物。
-
公开(公告)号:CN117987579B
公开(公告)日:2024-06-28
申请号:CN202410409552.1
申请日:2024-04-07
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , C12R1/42
Abstract: 本申请属于生物技术领域,公开了一种检测鸡白痢沙门菌的引物和探针,所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。该引物和探针是针对于鸡白痢标准菌(Salmonella enterica subsp.enterica serovar Pullorum str.ATCC 9120)中的798087~799391 bp(靶标group_17537基因)及其中第170 bp的SNP位点开发,其具有高度特异,能够准确鉴别是否存在鸡白痢沙门菌。同时,本发明还提出了一种检测体系和用途。
-
公开(公告)号:CN117535212A
公开(公告)日:2024-02-09
申请号:CN202210941651.5
申请日:2022-08-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/31 , C12N15/52 , C12N15/56 , C07K14/24 , A61K35/742 , A61P31/04 , A23K10/18 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一株具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株及其构建方法与应用。该枯草芽孢杆菌工程菌株是通过将优化的mcyABCD基因和mcjABCD基因分别插入宿主枯草芽孢杆菌的Amye和SigF位点,获得的可同时生产微菌素Y和微菌素J25的枯草芽孢杆菌WYA25S工程菌株;其中,优化的mcyABCD基因序列如SEQ ID NO.1所示,优化的mcjABCD基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明中的枯草芽孢杆菌WYA25S工程菌株在正常生长(无诱导,无抗性)的情况下,对沙门氏菌等菌株具有抑菌作用,且在生长过程中不产生芽孢,具有生长可控性和菌株安全性,其应用前景好。
-
-
-
-
-
-
-
-
-