-
公开(公告)号：CN102247606B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201110135690.8
申请日：2011-05-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于DNA水平的高致病性猪蓝耳病病毒JEV复制子疫苗及其应用。本发明是通过引物扩增出高致病性猪蓝耳病病毒XH株的GP5和M基因，利用融合PCR的方法，在两个基因中间插入FMDV-2A的序列，从而得到G-2A-M片段，最后通过SpeI和SalI两个酶切位点克隆到JpJEV-REP；另外，为了使M蛋白能够产生真实的N末端，G-2A-M片段的下游插入了IRES序列（G-2A-M-IRES），最后利用SalI-HF和SpeI两个酶切位点插入到pJEV-REP中，最终构建基于JEV复制子并且能够表达GP5和M蛋白的高致病性蓝耳病疫苗。
-
公开(公告)号：CN102250950A
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN201110135709.9
申请日：2011-05-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于DNA水平的乙型脑炎病毒复制子载体系统及其构建方法和应用。本发明是利用RT-PCR和融合PCR的方法，以改造过的低拷贝质粒pOKM为骨架，在缺失绝大部分结构基因（第165-2402核苷酸）的情况下，构建包括CMV启动子、5’UTR、C蛋白N端的前23个氨基酸(C23)、E蛋白C端的25个氨基酸（E25）、所有非结构蛋白、3’UTR、核酶（HDVr）和polyA序列的基于DNA水平的JEV复制子载体系统。为了检测构建的JEV复制子能否表达外源基因，构建含有报告基因EGFP的质粒pJEV-REP-GFP-IRES与pJEV-REP-GFP。
-
公开(公告)号：CN102329784A
公开(公告)日：2012-01-25
申请号：CN201110277819.9
申请日：2011-09-19
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/04 , C12N15/85 , A61K39/12 , A61P31/14 , G01N33/543
CPC classification number: Y02A50/39
Abstract: 本发明公开了一种日本乙型脑炎病毒样颗粒（Virus Likeparticles,VLPs）及其制备方法和应用。该病毒样颗粒是由日本乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)的PrM/E基因和核苷酸序列如SEQIDNO:1的JEVRNA复制子组装而成。该病毒样颗粒的制备方法是将RT-PCR扩增的JEVPrM/E基因连接到Tet-onadvance表达系统的质粒pTRE-Tight中，形成重组载体，Xfect法转染HelaTet-onadvanced细胞，经HygB筛选鉴定后，有限稀释法获得可调控的稳定表达PrM/E基因的Hela细胞系，诱导可表达PrM/E蛋白，可包装出常规的病毒样颗粒；用JEV复制子RNA载体转染该Hela细胞系，可包装出具有“一过性感染”能力的病毒样颗粒。本发明的日本乙型脑炎病毒样颗粒可以用于制备疫苗或作为检测试剂，具有良好的免疫原性和反应性，安全可靠。
-
公开(公告)号：CN102247606A
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN201110135690.8
申请日：2011-05-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于DNA水平的高致病性猪蓝耳病病毒JEV复制子疫苗及其应用。本发明是通过引物扩增出高致病性猪蓝耳病病毒XH株的GP5和M基因，利用融合PCR的方法，在两个基因中间插入FMDV-2A的序列，从而得到G-2A-M片段，最后通过SpeI和SalI两个酶切位点克隆到JpJEV-REP；另外，为了使M蛋白能够产生真实的N末端，G-2A-M片段的下游插入了IRES序列（G-2A-M-IRES），最后利用SalI-HF和SpeI两个酶切位点插入到pJEV-REP中，最终构建基于JEV复制子并且能够表达GP5和M蛋白的高致病性蓝耳病疫苗。
-
-
-
Search Results
4
records
(took 0.028 seconds)
