一种水稻绿色组织特异表达合成启动子GSSP4及其应用

    公开(公告)号:CN111172160A

    公开(公告)日:2020-05-19

    申请号:CN201910075501.9

    申请日:2015-08-03

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及一种水稻绿色组织特异表达合成启动子GSSP4及其应用。本发明将一些功能清晰且与水稻组织特异表达相关的调控序列以不同的方式进行融合,并将上述合成启动子融合GUS报告基因导入水稻品种“中花11”中。转基因水稻GUS分析结果显示,本发明成功获得了5个新的水稻绿色组织特异表达合成启动子,其中:核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:4所示的合成启动子GSSP4在水稻穗和茎中为高强度表达,该启动子的应用,可以作为水稻遗传改良的重要启动子资源。

    一种抗草铵膦油菜的培育方法

    公开(公告)号:CN110195067B

    公开(公告)日:2020-05-05

    申请号:CN201910491859.X

    申请日:2019-06-06

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,尤其涉及一种抗草铵膦油菜的培育方法。本发明将抗草铵膦基因Syn1‑Rep导入受体甘蓝型油菜基因组中,外源基因能在后代中稳定遗传并保持相应的抗草铵膦除草剂特性,可节省劳动力资源,提高油菜种植效益,同时对环境友好。其技术要点包括:获取外源基因Syn1–Rep片段;构建表达载体,并与外源基因连接,得到重组载体;将重组载体导入大肠杆菌DH5α中验证;提取验证成功的质粒,导入农杆菌菌株中,得到转化工程菌;利用农杆菌介导的遗传转化方法将转化工程菌导入到植物组织中;转基因植株检测。

    一种草甘膦氧化酶突变体及其克隆、表达与应用

    公开(公告)号:CN111041011A

    公开(公告)日:2020-04-21

    申请号:CN201910851757.4

    申请日:2019-09-10

    Abstract: 本发明属于基因工程及分子生物学技术领域,具体涉及一种经定向进化技术人工改造的可显著提高草甘膦降解性能的草甘膦氧化酶突变体,并进一步公开了该突变体及其编码基因在新型耐草甘膦作物的培育以及草甘膦污染生物降解领域中的应用。本发明所述方案通过DNA改组技术(DNA shuffling),基于已知的草甘膦氧化酶突变体,构建得到草甘膦氧化酶突变体库,并从大量的突变体中筛选得到了两个对草甘膦催化效率提高的突变体B5R18和B5R26。本发明所述突变体B5R18和B5R26具有很高的的草甘膦降解活性,有效解决了现有草甘膦氧化酶活性低的缺陷,在草甘膦抗性作物培育及草甘膦污染的降解处理等方面具有很大的潜在应用价值。

    一种分离的二化螟CYP15C1基因及其编码蛋白

    公开(公告)号:CN109112117A

    公开(公告)日:2019-01-01

    申请号:CN201710786843.2

    申请日:2017-09-04

    Abstract: 本发明属于昆虫基因工程技术领域,具体涉及一种分离的二化螟CYP15C1基因及其编码蛋白。本发明分离的二化螟CYP15C1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还包括二化螟CYP15C1基因RNA干扰序列如SEQ ID NO:3的应用,所述的序列对二化螟CYP15C1基因具有良好的沉默效果。涂抹饲喂该干扰序列,显著提高了二化螟幼虫的死亡率,抑制了二化螟的变态发育,最终导致二化螟的畸形,从而可以有效的控制其种群的发展。进一步,本发明的基因及蛋白可用于转基因抗虫植物的开发以及二化螟的生物防治。

    一种利用二化螟小RNA培育抗虫水稻的方法

    公开(公告)号:CN107663522A

    公开(公告)日:2018-02-06

    申请号:CN201610596743.9

    申请日:2016-07-26

    CPC classification number: C12N15/113 C12N15/8286 C12N2310/141

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及一种利用二化螟小RNA培育抗虫水稻的方法。本发明对所获得的二化螟[Chilo suppressalis(Walker)内源小RNA序列进行了功能验证和应用研究,利用高通量小RNA测序和生物信息学分析,得到一条SEQ ID NO:1所示的二化螟内源的小RNA csu-53的核苷酸序列,利用csu-53的序列构建人工microRNA(amiRNA)表达载体并转化水稻,离体茎秆接虫试验表明,转基因水稻能显著延长二化螟幼虫在稻株上的生长周期,降低虫重和蛹重。本发明分离的二化螟内源小RNA可应用于水稻抗虫改良中,特别是能应用于抑制水稻害虫二化螟生长中的应用。

    水稻内源双向表达启动子的分离克隆及功能分析

    公开(公告)号:CN106676107A

    公开(公告)日:2017-05-17

    申请号:CN201610279163.7

    申请日:2016-04-28

    Inventor: 林拥军 王睿

    CPC classification number: C12N15/113 C12N2310/10 C12Q1/6895

    Abstract: 本发明属于植物基因工程领域。涉及水稻内源双向表达启动子的分离克隆及功能分析。本发明结合MSU和RAP数据库中的RNA‑seq数据以及CREP数据库中的表达谱芯片数据在水稻基因组中选取了候选双向启动子BIP1,通过实验证明它具有双向表达活性。然后对其进行5’和3’缺失分析,鉴定出其双向表达调控区段以及控制其5’和3’方向基本表达活性的区段。随后,利用生物信息学手段分析了BIP1在禾本科植物中的保守性。本发明公开了双向启动子的筛选及分离克隆方法、转化载体的构建过程、水稻遗传转化过程和转化植物的GUS组织化学染色、GUS蛋白活性检测、GFP组织学分析、GFP定量分析和双向启动子的保守性分析等方法。

    一种分离的5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因

    公开(公告)号:CN103834674B

    公开(公告)日:2016-03-23

    申请号:CN201410108595.2

    申请日:2014-03-21

    Abstract: 本发明属于农业微生物基因工程技术领域,具体涉及一种抗草甘膦5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的分离鉴定,所述的5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述,该基因编码的蛋白质的序列如SEQ ID NO:2所述。5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因是根据Genbank中报导的放线细菌Isoptericola Variabilis的aroA基因序列合成得到,包含该基因质粒的重组大肠杆菌LZD002保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为CCTCC NO:M2013632。经过生物学实验验证,证明该基因对草甘膦具有一定的耐受性。

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