水稻绿色组织特异表达合成启动子的构建及鉴定

    公开(公告)号:CN106399305A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201510481080.1

    申请日:2015-08-03

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及水稻绿色组织特异表达合成启动子的构建及鉴定。本发明将一些功能清晰且与水稻组织特异表达相关的调控序列以不同的方式进行融合,并将上述合成启动子融合GUS报告基因导入水稻品种中花11中。转基因水稻GUS分析结果显示,本发明成功获得了5个新的水稻绿色组织特异表达合成启动子,且它们在不同绿色组织中的表达强度不尽相同,能够满足不同的应用目的。本发明公开了合成启动子、转化载体的构建方法、水稻遗传转化和转化植物的GUS组织化学染色方法以及对GUS蛋白活性检测方法等过程。

    一种水稻绿色组织特异表达合成启动子GSSP4及其应用

    公开(公告)号:CN111172160A

    公开(公告)日:2020-05-19

    申请号:CN201910075501.9

    申请日:2015-08-03

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及一种水稻绿色组织特异表达合成启动子GSSP4及其应用。本发明将一些功能清晰且与水稻组织特异表达相关的调控序列以不同的方式进行融合,并将上述合成启动子融合GUS报告基因导入水稻品种“中花11”中。转基因水稻GUS分析结果显示,本发明成功获得了5个新的水稻绿色组织特异表达合成启动子,其中:核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:4所示的合成启动子GSSP4在水稻穗和茎中为高强度表达,该启动子的应用,可以作为水稻遗传改良的重要启动子资源。

    水稻内源双向表达启动子的分离克隆及功能分析

    公开(公告)号:CN106676107A

    公开(公告)日:2017-05-17

    申请号:CN201610279163.7

    申请日:2016-04-28

    Inventor: 林拥军 王睿

    CPC classification number: C12N15/113 C12N2310/10 C12Q1/6895

    Abstract: 本发明属于植物基因工程领域。涉及水稻内源双向表达启动子的分离克隆及功能分析。本发明结合MSU和RAP数据库中的RNA‑seq数据以及CREP数据库中的表达谱芯片数据在水稻基因组中选取了候选双向启动子BIP1,通过实验证明它具有双向表达活性。然后对其进行5’和3’缺失分析,鉴定出其双向表达调控区段以及控制其5’和3’方向基本表达活性的区段。随后,利用生物信息学手段分析了BIP1在禾本科植物中的保守性。本发明公开了双向启动子的筛选及分离克隆方法、转化载体的构建过程、水稻遗传转化过程和转化植物的GUS组织化学染色、GUS蛋白活性检测、GFP组织学分析、GFP定量分析和双向启动子的保守性分析等方法。

    水稻绿色组织特异表达合成启动子GSSP2及其应用

    公开(公告)号:CN111172160B

    公开(公告)日:2022-05-24

    申请号:CN201910075501.9

    申请日:2015-08-03

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及水稻绿色组织特异表达合成启动子GSSP2及其应用。本发明将一些功能清晰且与水稻组织特异表达相关的调控序列以不同的方式进行融合,并将上述合成启动子融合GUS报告基因导入水稻品种“中花11”中。转基因水稻GUS分析结果显示,本发明成功获得了5个新的水稻绿色组织特异表达合成启动子,其中:核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示的合成启动子GSSP2在水稻叶片、叶鞘、穗和茎中特异表达,该启动子的应用,可以作为水稻遗传改良的重要遗传资源。

    筛选水稻组织特异表达顺式作用元件及其侧翼序列的方法

    公开(公告)号:CN106566825A

    公开(公告)日:2017-04-19

    申请号:CN201510653791.2

    申请日:2015-10-10

    Inventor: 林拥军 王睿

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及筛选水稻组织特异表达顺式作用元件及其侧翼序列的方法。根据水稻全生育期表达谱芯片数据库中的信息,将所有组织特异表达基因按照表达模式分类。根据植物顺式作用元件数据库中的信息,对水稻不同组织特异表达基因的启动子区域进行顺式作用元件扫描及统计,选出在绿色组织特异表达基因的启动子区域中高频出现的顺式元件作为绿色组织特异表达相关的候选元件。对其中一个候选元件GEAT的侧翼序列做了生物信息学预测,并将该元件和侧翼序列的组合与-46Minimal 35S启动子融合以驱动GUS基因表达进行功能鉴定。GUS分析显示,其与绿色组织特异表达相关。通过侧翼序列定点突变试验,找到了对维持GEAT的功能起关键作用的碱基。

    筛选水稻组织特异表达顺式作用元件及其侧翼序列的方法

    公开(公告)号:CN106566825B

    公开(公告)日:2019-07-05

    申请号:CN201510653791.2

    申请日:2015-10-10

    Inventor: 林拥军 王睿

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及筛选水稻组织特异表达顺式作用元件及其侧翼序列的方法。根据水稻全生育期表达谱芯片数据库中的信息,将所有组织特异表达基因按照表达模式分类。根据植物顺式作用元件数据库中的信息,对水稻不同组织特异表达基因的启动子区域进行顺式作用元件扫描及统计,选出在绿色组织特异表达基因的启动子区域中高频出现的顺式元件作为绿色组织特异表达相关的候选元件。对其中一个候选元件GEAT的侧翼序列做了生物信息学预测,并将该元件和侧翼序列的组合与‑46Minimal 35S启动子融合以驱动GUS基因表达进行功能鉴定。GUS分析显示,其与绿色组织特异表达相关。通过侧翼序列定点突变试验,找到了对维持GEAT的功能起关键作用的碱基。

    水稻绿色组织特异表达合成启动子的构建及鉴定

    公开(公告)号:CN106399305B

    公开(公告)日:2019-07-05

    申请号:CN201510481080.1

    申请日:2015-08-03

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及水稻绿色组织特异表达合成启动子的构建及鉴定。本发明将一些功能清晰且与水稻组织特异表达相关的调控序列以不同的方式进行融合,并将上述合成启动子融合GUS报告基因导入水稻品种中花11中。转基因水稻GUS分析结果显示,本发明成功获得了5个新的水稻绿色组织特异表达合成启动子,且它们在不同绿色组织中的表达强度不尽相同,能够满足不同的应用目的。本发明公开了合成启动子、转化载体的构建方法、水稻遗传转化和转化植物的GUS组织化学染色方法以及对GUS蛋白活性检测方法等过程。

    水稻内源双向表达启动子的分离克隆及功能分析

    公开(公告)号:CN106676107B

    公开(公告)日:2019-04-05

    申请号:CN201610279163.7

    申请日:2016-04-28

    Inventor: 林拥军 王睿

    Abstract: 本发明属于植物基因工程领域。涉及水稻内源双向表达启动子的分离克隆及功能分析。本发明结合MSU和RAP数据库中的RNA‑seq数据以及CREP数据库中的表达谱芯片数据在水稻基因组中选取了候选双向启动子BIP1,通过实验证明它具有双向表达活性。然后对其进行5’和3’缺失分析,鉴定出其双向表达调控区段以及控制其5’和3’方向基本表达活性的区段。随后,利用生物信息学手段分析了BIP1在禾本科植物中的保守性。本发明公开了双向启动子的筛选及分离克隆方法、转化载体的构建过程、水稻遗传转化过程和转化植物的GUS组织化学染色、GUS蛋白活性检测、GFP组织学分析、GFP定量分析和双向启动子的保守性分析等方法。

    一种转基因抗纹枯病水稻的培育方法

    公开(公告)号:CN105647967A

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201410640572.6

    申请日:2014-11-14

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及一种转基因抗纹枯病水稻的培育方法。以多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因OsPGIP1为目标基因,以Hyg基因作为选择标记基因,采用农杆菌介导的水稻遗传转化法,将目标基因导入受体水稻品种中花11中,通过超表达OsPGIP1基因获得对纹枯病有显著抗性的转基因水稻材料OEpgip1-3。本发明公开了植物转化载体的构建、水稻遗传转化、转化植物的分子鉴定以及田间纹枯病抗性评价试验等过程。

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