酵母展示脂肪酶催化合成维生素E亚油酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212576A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110107125.0

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成维生素E亚油酸酯的方法,包括:将维生素E和亚油酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,无氧条件下于50~60℃反应10~14小时,分离、纯化制得维生素E亚油酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成维生素E亚油酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸亚油酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212574A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110110343.X

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸亚油酸酯的方法,包括:将L-抗坏血酸和亚油酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,无氧条件下于50~60℃反应4~8小时,分离、纯化制得L-抗坏血酸亚油酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成L-抗坏血酸亚油酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酿酒酵母展示亚油酸异构酶催化合成共轭亚油酸的方法

    公开(公告)号:CN102206688A

    公开(公告)日:2011-10-05

    申请号:CN201110106809.9

    申请日:2011-04-27

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酿酒酵母展示亚油酸异构酶催化合成共轭亚油酸的方法,将含有重组质粒的酿酒酵母K601,接种到YPG培养基中,诱导培养,收集菌体,洗涤,得到酿酒酵母展示亚油酸异构酶催;然后将得到的酿酒酵母展示亚油酸异构酶加入到含有亚油酸的缓冲液中,振荡反应。本发明将亚油酸异构酶展示表达在酿酒酵母细胞外表面,直接与底物亚油酸接触,提高共轭亚油酸的转化效率,降低生成成本。

    一种检测黄酒中氨基甲酸乙酯的方法

    公开(公告)号:CN101620206B

    公开(公告)日:2011-09-21

    申请号:CN200910099554.0

    申请日:2009-06-18

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测黄酒中氨基甲酸乙酯的方法,包括(1)利用减压蒸馏,对黄酒进行预处理,使得黄酒体积减少为初始体积的1/5~1/10;(2)将经过预处理的黄酒与盐酸及9-羟基吨溶液混合进行衍生化反应,得到衍生化后的黄酒;(3)利用高效液相色谱仪对衍生化后的黄酒进行组分分离,采用外标法计算氨基甲酸乙酯含量。本发明方法操作简单,检测成本低,与固相萃取-气相色谱/质谱联用(SPE-GC/MS)分析方法相比需要的仪器设备简单,样品前处理不复杂,所需要的检测条件简便,花费的检测时间较短。

    利用蚕蛹制取降血压肽的方法

    公开(公告)号:CN1896267B

    公开(公告)日:2011-07-27

    申请号:CN200610052094.2

    申请日:2006-06-23

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用蚕蛹制取降血压肽的方法,包括以下步骤:将脱脂干蚕蛹粉或蚕蛹蛋白粉与水按照1∶6~7的重量比混和后,先调节pH值为6.0~6.5,再加入中性蛋白酶进行酶解反应,所得酶解液即为降血压肽;所述中性蛋白酶的重量是脱脂干蚕蛹粉或蚕蛹蛋白粉的0.9%~1.1%,酶解反应温度50℃~55℃,酶解反应时间120~200分钟。本发明的利用蚕蛹制取降血压肽的方法,成本低、效果好。

    微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法

    公开(公告)号:CN102115772A

    公开(公告)日:2011-07-06

    申请号:CN201010592602.2

    申请日:2010-12-16

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法,包括:向灭过菌的培养液中接入爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706,得到预反应体系;再加入含有异黄腐酚的底物溶液,于25-30℃转化反应5-7天得到转化后的培养液,其中异黄腐酚用量以每升培养液计为0.01-0.1g;转化后的培养液经后处理得到8-异戊烯基柚皮素。该方法较直接提取法和化学合成法具有操作简单、转化条件温和,效率高、安全性好、成本低、转化过程安全可靠等特点。

    一种地衣芽孢杆菌纤溶酶及其生产方法

    公开(公告)号:CN101113422B

    公开(公告)日:2011-06-15

    申请号:CN200710069670.9

    申请日:2007-06-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种地衣芽孢杆菌纤溶酶,通过如下方法制得:将菌种地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)ZJUEL31410 CGMCC 1397进行发酵培养得到发酵液,从发酵液中分离纯化得到地衣芽孢杆菌纤溶酶。本发明首次发现地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)ZJUEL31410 CGMCC1397能用于生产纤溶酶。生产的地衣芽孢杆菌纤溶酶产品以廉价的农副产品豆粕、膨化大豆和麸皮为主要原料,安全无毒,采用液体发酵方法生产,工艺流程短,成本低,工业化生产效率高,酶活高,具有开发价值。

    一种生物合成川芎嗪的方法

    公开(公告)号:CN101906448A

    公开(公告)日:2010-12-08

    申请号:CN201010104264.3

    申请日:2010-02-02

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种生物合成川芎嗪的方法,利用紫红曲菌种(Monascus purpureusTMP-001),包括以下步骤:A)在无菌环境下将紫红曲菌种转接于麦芽汁琼脂培养基上活化培养;B)将步骤A)所得的培养物洗入无菌水中,制成孢子悬浮液;然后将孢子悬浮液转移到种子培养基中培养;得种子液;C)将种子液转接到基础发酵培养基中培养,得含有川芎嗪的液体发酵产物。采用该方法生物合成川芎嗪,具有转化反应易于控制、安全性高等特点。

    一种控制早籼米辛烯基琥珀酸淀粉钠粘度的方法

    公开(公告)号:CN100527987C

    公开(公告)日:2009-08-19

    申请号:CN200610155361.9

    申请日:2006-12-21

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种控制早籼米辛烯基琥珀酸淀粉钠粘度的方法,依次进行以下步骤,以下份数均按重量计:1)150份干基的早籼米辛烯基琥珀酸淀粉钠与850份水混合后,以3000转/分钟搅拌1小时配成乳液;再加入0.5份α-淀粉酶在80℃、500转/分钟的搅拌条件下酶解30~180分钟;2)然后加入9.8份浓硫酸,10~30℃的温度下500转/分钟搅拌30分钟;再加入5~8份干基的氢氧化钠,10~30℃的温度下3000转/分钟搅拌10分钟;得混合物;3)用水清洗上述混合物3次,每次用水200份、清洗时间5分钟;然后离心去除上清,沉淀经喷雾干燥,即得不同粘度的早籼米辛烯基琥珀酸淀粉钠。利用本发明的方法能方便地制造出实际所需粘度的辛烯基琥珀酸淀粉钠。

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