公开(公告)号：CN104725477B

公开(公告)日：2019-07-23

申请号：CN201510150563.3

申请日：2015-03-31

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 别小妹 ,  姜健 ,  陆兆新 ,  张充

IPC: C07K7/06 ,  C12N15/75 ,  C12N15/31 ,  C12P21/02 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明属于微生物发酵生产领域，提供一种新型抗菌脂肽，命名为[ΔLeu3]Surfactin，共有3种组分，包括C13的抗菌脂肽类化合物1、包括C14的抗菌脂肽类化合物2、包括C15的抗菌脂肽类化合物3，分子量分别为909、923、937Da。本发明还提供产该抗菌脂肽工程菌枯草芽孢杆菌LS1菌株的构建方法及该抗菌脂肽的制备过程和应用。[ΔLeu3]Surfactin是一种新型surfactin类抗菌脂肽，相比于surfactin其具有较弱的溶血活性，但对短小芽孢杆菌、藤黄微球菌、蜡状芽孢杆菌都有抑制作用，能够防治多种植物病害，其毒性较低，在生物防治、食品加工和农产品贮藏保鲜等方面具有应用潜力。

公开(公告)号：CN105695543B

公开(公告)日：2019-06-04

申请号：CN201610046208.6

申请日：2016-01-22

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陆兆新 ,  唐伟 ,  吕凤霞 ,  别小妹 ,  赵海珍 ,  张充

IPC: C12P21/04 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明公开了一种生物表面活性素的生产方法，将解淀粉芽孢杆菌fmb50先后接种于PDA斜面培养基进行培养，培养后再接种于BPY种子培养基继续培养，最后再接种于发酵培养基培养后得到含有生物表面活性素的培养液；然后将培养液加水稀释后调节pH，再通过加入壳聚糖、海藻酸钠和硅藻土进行絮凝后过滤；最后将滤饼使用低级醇溶解提取后过滤，将滤液减压蒸馏得到生物表面活性素粗品。本发明提供的生物表面活性素的生产方法能够实现工业化制备生物表面活性素，并且制备得到的生物表面活性素纯度高，有效弥补了目前生物表面活性素不能大规模生产的不足。

公开(公告)号：CN109111584A

公开(公告)日：2019-01-01

申请号：CN201810690653.5

申请日：2018-06-28

Applicant: 南京农业大学 ,  泰兴市东圣生物科技有限公司

Inventor： 张充 ,  步国建 ,  张晓健

IPC: C08J5/18 ,  C08L89/00 ,  C08L5/06 ,  C08L5/08 ,  C12N15/70 ,  C12N9/02 ,  A23B4/10 ,  A23B7/16

Abstract: 本发明属于食品工业生物技术领域，涉及一种蛋白/果胶/壳聚糖复合膜的制备方法及应用。该复合膜是通过将蛋白(明胶蛋白、大豆蛋白、酪蛋白、乳清蛋白中的任意一种)、果胶、壳聚糖、增塑剂、表面活性剂、热稳定重组细菌漆酶共混制备得到成膜液，pH调节到5-8并超声脱气后，倒入聚四氟乙烯板,60-90℃酶催化反应10-20分钟,100-120℃灭酶、杀菌处理10-20分钟，控制湿度RH30％-50％、温度20-30℃，干燥12-18h揭膜制得。本发明以蛋白、果胶、壳聚糖为基料，添加增塑剂、表面活性剂，通过添加热稳定重组细菌漆酶作为交联剂所制备的复合膜，拉伸强度、延展性、抗菌性、阻气性、阻水性、可塑性等方面均表现出良好的性质。

公开(公告)号：CN109022474A

公开(公告)日：2018-12-18

申请号：CN201811024407.2

申请日：2018-09-04

Applicant: 南京农业大学 ,  南京福斯弗瑞生物科技有限公司

Inventor： 陆兆新 ,  孙静 ,  吕凤霞 ,  别小妹 ,  张充 ,  李金良

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12P21/02 ,  C07K7/56

CPC classification number: C12N15/70 ,  C07K7/56 ,  C12N15/66 ,  C12P21/02

Abstract: 本发明涉及通过过表达spo0A基因提高抗真菌肽bacillomycin D产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以CGMCC No.0943枯草芽孢杆菌fmbJ为出发菌株，以大肠杆菌‑枯草芽孢杆菌穿梭克隆载体pMAD为骨架构建一个基因过表达载体pCBS‑LPSpo0AR，利用同源重组原理，通过双交换过程在淀粉酶位点敲入枯草芽孢杆菌fmbJ基因组Spo0A基因的方法构建了一个高产bacillomycin D菌株fmbJspo0A。经过高效液相色谱分析，确定改良菌株产bacillomycin D的能力提高1.82倍。

公开(公告)号：CN108713585A

公开(公告)日：2018-10-30

申请号：CN201810439061.6

申请日：2018-05-09

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 吕凤霞 ,  陆兆新 ,  李秀秀 ,  曾维伟 ,  别小妹 ,  赵海珍 ,  张充

IPC: A23B4/20 ,  A23B4/22 ,  C12P21/00 ,  C12R1/07 ,  C12R1/25

Abstract: 本发明涉及了一种淡水鱼复合保鲜剂及保鲜方法。所述复合保鲜剂包括细菌素粗提物、抗菌脂肽粗提物、百里酚和水。本发明针对淡水鱼中的主要腐败菌群而研制的绿色复合保鲜剂，具有无毒、抗菌谱广和抗菌性强等特点，适用于淡水鱼防腐保鲜，使用方法简单，生产成本低，可有效延长淡水鱼货架期达9 d，提高了冷藏保鲜鱼品质和贮藏稳定性，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN107904198A

公开(公告)日：2018-04-13

申请号：CN201711121738.3

申请日：2017-11-14

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陆兆新 ,  徐超 ,  吕凤霞 ,  别小妹 ,  赵海珍 ,  张充 ,  朱筱玉

IPC: C12N1/21 ,  C12P21/04 ,  G01N33/68 ,  C12R1/10

Abstract: 本发明公开了一种高产杆菌肽A的地衣芽孢杆菌基因改组菌株及应用。本发明采取了育种新技术中的等离子体诱变技术，与传统物理、化学诱变方法相结合，并采用基因组改组技术，效果明显，产量提高显著。本发明提供的用于杆菌肽A高效发酵生产的基因改组菌株F2-X1，降低了以地衣芽孢杆菌为发酵菌株，生产杆菌肽的成本。而且产量提高明显，经所述条件发酵后，杆菌肽A产量可达到1.7g/L,适用于大规模发酵生产杆菌肽A。本发明提供的以HPLC检测方法简单准确，是用于快速准确检测杆菌肽A产量。

公开(公告)号：CN107746890A

公开(公告)日：2018-03-02

申请号：CN201711229375.5

申请日：2017-11-29

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陆兆新 ,  陶婷婷 ,  别小妹 ,  吕凤霞 ,  张充

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

CPC classification number: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2600/16 ,  C12Q2537/143

Abstract: 本发明公开了鉴定单增李斯特菌血清型的多重PCR检测引物及方法，属于生物技术领域。所述引物分别为单增李斯特菌种上下游引物、1/2a血清型上下游引物、1/2b血清型上下游引物、1/2c血清型上下游引物和4b血清型上下游引物；所述检测方法采用上述5对引物，分别以单增李斯特菌1/2a血清型DNA、1/2b血清型DNA、1/2c血清型DNA和4b血清型DNA为模板进行多重PCR扩增反应，并将PCR扩增产物进行电泳检测，验证引物的特异性。本发明仅需要常规仪器，通过单次PCR扩增反应即可鉴定单增李斯特菌4种主要血清型，此检测方法具有特异性强、检测灵敏度高、抗干扰性强等特点。

公开(公告)号：CN104591407B

公开(公告)日：2016-05-04

申请号：CN201510026991.5

申请日：2015-01-19

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张充 ,  陆兆新 ,  卢静 ,  吕凤霞 ,  别小妹 ,  赵海珍

IPC: C12N15/70 ,  C12N9/02 ,  C02F3/34 ,  C12R1/385 ,  C02F101/38

Abstract: 本发明公开了一种利用重组脂肪氧合酶降解三苯甲烷类染料的方法。重组脂肪氧合酶rLOX-27853在降解三苯甲烷类染料中的应用，所述的重组脂肪氧合酶rLOX-27853氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种利用重组脂肪氧合酶rLOX-27853降解三苯甲烷类染料的方法，向含有亚油酸钠和三苯甲烷类染料的介质中加入所述的重组脂肪氧合酶rLOX-27853对其进行降解。本发明人从铜绿假单胞菌ATCC27853菌株基因组中，克隆获得一种新型的原核脂肪氧合酶基因LOX‐27853，并利用发酵培养的方法实现了在大肠杆菌表达宿主菌的异源高效表达，可高效地催化三苯甲烷类染料苯胺蓝、孔雀石绿、亮绿的降解。

公开(公告)号：CN103300083B

公开(公告)日：2014-12-24

申请号：CN201310180887.2

申请日：2013-05-15

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陆兆新 ,  吕凤霞 ,  张爽 ,  张充 ,  别小妹 ,  赵海珍 ,  曹林

IPC: A21D8/04 ,  C12N9/02

Abstract: 本发明涉及利用重组脂肪氧合酶提高面包焙烤特性的方法，属于食品加工技术领域。该方法包括如下步骤：将重组脂肪氧合酶以10‐50U/g面粉的比例添加到小麦粉中；小麦粉、酵母粉、糖、水加入到搅拌机中进行搅拌，加入食盐搅拌至面团可拉伸成均匀的薄膜；将得到的面团依次进行预发酵、分割称重、成型、二次发酵；焙烤得到成品。本发明的重组脂肪氧合酶能有效提高面团的操作性能，强化面筋网络，显著改善面包的比容、硬度、质地、面包芯颜色等烘焙品质，可成为替代溴酸钾的新型生物面粉品质改良剂。同时，提高面食制品的安全性。

公开(公告)号：CN103667106A

公开(公告)日：2014-03-26

申请号：CN201310470098.2

申请日：2013-10-10

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陆兆新 ,  胡美忠 ,  吕凤霞 ,  别小妹 ,  张充 ,  赵海珍

IPC: C12N1/20 ,  C12P21/02 ,  C07K7/06 ,  C07K14/335 ,  C07K1/36 ,  C07K1/30 ,  C07K1/20 ,  C07K1/16 ,  A23L3/3526 ,  A61K38/08 ,  A61K38/16 ,  A61P31/00 ,  C12R1/25

Abstract: 本发明公开了一种植物乳杆菌、其细菌素以及培养与分离纯化方法，其中植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）163菌种保藏号为CGMCC NO.8224。该植物乳杆菌在MRS液体培养基或者白菜番茄培养基中进行培养，可以发酵产生细菌素，其中所产生的细菌素为由两种氨基酸序列构成一级结构的两种新型细菌素，细菌素通过四次分离纯化以及鉴定得到。经过测定，该细菌素具有较广的抑菌谱以及较好的热稳定性和pH稳定性，可以广泛应用于食品及医药领域中。