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公开(公告)号：CN103849602B
公开(公告)日：2016-02-10
申请号：CN201310285025.6
申请日：2013-07-08
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种牛睾丸细胞系。本发明还提供了该细胞系的建立方法，主要步骤为：(1)原代培养：无菌获取初生犊牛睾丸，清除粘附组织，采用胰酶消化法分离获得高活力的牛睾丸细胞；将分离得到的高活力的牛睾丸细胞培养于DMEM培养基中，置于37℃，5％CO2条件下培养，得原代牛睾丸细胞；(2)转染和筛选：提取纯化含有hTERT基因的真核表达质粒pCI-neo-hTERT，采用脂质体转染法，将提取纯化的真核表达质粒pCI-neo-hTERT导入步骤(1)原代培养的牛睾丸细胞进行转染；(3)筛选和扩大培养。本发明牛睾丸细胞易于培养，生长速度较快，能稳定传代，细胞活率高、纯度高且能很好保藏；本发明方法操作简便，便于推广应用。本细胞系可应用于生产猪瘟疫苗、羊痘、羊口疮疫苗等。
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公开(公告)号：CN102816864A
公开(公告)日：2012-12-12
申请号：CN201110152681.X
申请日：2011-06-08
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明根据GenBank上的猪瘟病毒(CSFV)的基因组核酸序列，设计一对猪瘟病毒的特异性检测引物，结合市售的病毒RNA提取试剂盒(TRIZOL)高效的RT-PCR商品化试剂，经过条件优化，组合而成的一种一步法RT-PCR检测试剂盒。该试剂盒能对待检样品进行直接检测，检测过程简单，省时省力。从病料处理到获得结果需要3.5小时，本方法具有灵敏度高，检测结果准确、特异等优点，是目前猪瘟病毒病进行快速检测的一种好方法。
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公开(公告)号：CN119881304A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202510203512.6
申请日：2025-02-24
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 青岛农业大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/569 , C12N15/09 , C12N15/11 , C12N15/62
Abstract: 本发明适用于生物检测应用领域，提出了一种RHDV2抗体间接ELISA检测试剂盒及测定方法，包括抗原包被的ELISA板、RHDV2阴性血清、RHDV2阳性血清；根据抗原表位分析，设计截短原核表达RHDV2VP60‑1、RHDV2VP60‑2、RHDV2VP60‑3、RHDV2VP60‑4四段抗原表位，从中筛选生物活性与稳定性最优的重组蛋白RHDV2VP60‑2；以重组蛋白RHDV2VP60‑2为抗原建立间接ELISA抗体检测方法，并对反应条件进行优化。综上，本发明的检测试剂盒敏感性高，能够快速精准的检测RHDV2。
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公开(公告)号：CN114539379A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210214020.3
申请日：2022-03-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C07K14/465 , C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/113 , A61K39/12
Abstract: 本发明公开了鸡AQP1突变型基因，突变型蛋白、该基因突变细胞系及其在细胞悬浮培养中的应用。本发明还公开了AQP1突变型细胞系的制备方法。本发明通过敲除了鸡胚成纤维细胞系DF‑1细胞AQP1蛋白第一个跨膜区后间隔序列，获得的AQP1突变型细胞系更易于悬浮驯化，且遗传性状稳定，不具有致瘤性，增殖病毒能力不受影响，应用到家禽病毒疫苗生产中，替代固相培养的疫苗生产工艺，可大幅度提高生产效率。
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公开(公告)号：CN111848772B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202010770180.7
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东绿都生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了SAMD9突变型蛋白，所述SAMD9突变型蛋白的氨基酸序列缺少第61~448位氨基酸。本发明还公开了编码该蛋白的基因、细胞系及其在制备山羊痘病毒疫苗中的应用。本发明还公开了SAMD9突变型蛋白的Vero细胞系的制备方法。本发明通过基因编辑技术敲除了Vero细胞SAMD9基因的AlbA_2结构域及其两侧序列，以降低Vero细胞的病毒抑制功能，获得的SAMD9突变型蛋白Vero细胞对山羊痘病毒具有更高的易感性，且遗传性状稳定，能够应用到山羊痘病毒等病毒疫苗生产中，替代原代细胞疫苗生产工艺，大幅度降低生产成本，并提高疫苗的安全性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113956351A
公开(公告)日：2022-01-21
申请号：CN202111323477.X
申请日：2021-11-08
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种抗猪圆环病毒2型Cap蛋白纳米抗体、双价中和纳米抗体及其应用。该抗猪圆环病毒2型Cap蛋白双价中和纳米抗体由两个相同氨基酸序列的单价纳米抗体组成，单价纳米抗体的可变区具有3个特定序列的互补决定区CDR1、CDR2、CDR3。该抗猪圆环病毒2型Cap蛋白双价中和纳米抗体既具有优异的特异性抗原结合能力，又具有稳定的PCV2病毒中和活性；在猪圆环病毒相关疾病防治、尤其是在PCV2感染后作为治疗药物中的应用具有广泛价值。
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公开(公告)号：CN111848772A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010770180.7
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东绿都生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了SAMD9突变型蛋白，所述SAMD9突变型蛋白的氨基酸序列缺少第61~448位氨基酸。本发明还公开了编码该蛋白的基因、细胞系及其在制备山羊痘病毒疫苗中的应用。本发明还公开了SAMD9突变型蛋白的Vero细胞系的制备方法。本发明通过基因编辑技术敲除了Vero细胞SAMD9基因的AlbA_2结构域及其两侧序列，以降低Vero细胞的病毒抑制功能，获得的SAMD9突变型蛋白Vero细胞对山羊痘病毒具有更高的易感性，且遗传性状稳定，能够应用到山羊痘病毒等病毒疫苗生产中，替代原代细胞疫苗生产工艺，大幅度降低生产成本，并提高疫苗的安全性。
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公开(公告)号：CN103849602A
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201310285025.6
申请日：2013-07-08
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种牛睾丸细胞系。本发明还提供了该细胞系的建立方法，主要步骤为：(1)原代培养：无菌获取初生犊牛睾丸，清除粘附组织，采用胰酶消化法分离获得高活力的牛睾丸细胞；将分离得到的高活力的牛睾丸细胞培养于DMEM培养基中，置于37℃，5％CO2条件下培养，得原代牛睾丸细胞；(2)转染和筛选：提取纯化含有hTERT基因的真核表达质粒pCI-neo-hTERT，采用脂质体转染法，将提取纯化的的真核表达质粒pCI-neo-hTERT导入步骤(1)原代培养的牛睾丸细胞进行转染；(3)筛选和扩大培养。本发明牛睾丸细胞易于培养，生长速度较快，能稳定传代，细胞活率高、纯度高且能很好保藏；本发明方法操作简便，便于推广应用。本细胞系可应用于生产猪瘟疫苗、羊痘、羊口疮疫苗等。
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公开(公告)号：CN118962130A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411123799.3
申请日：2024-08-16
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域，提供了一种检测驴冠状病毒抗体的间接ELISA试剂盒。该试剂盒以如SEQ ID NO:1所示的重组驴冠状病毒N蛋白作为包被抗原。本发明填补了驴冠状病毒抗体检测技术的空缺，检测方法特异性高、敏感性高、操作简单，且可在短时间内完成一次检测，适用于大规模推广使用和生产。
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公开(公告)号：CN114539379B
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202210214020.3
申请日：2022-03-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C07K14/465 , C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/113 , A61K39/12
Abstract: 本发明公开了鸡AQP1突变型基因，突变型蛋白、该基因突变细胞系及其在细胞悬浮培养中的应用。本发明还公开了AQP1突变型细胞系的制备方法。本发明通过敲除了鸡胚成纤维细胞系DF‑1细胞AQP1蛋白第一个跨膜区后间隔序列，获得的AQP1突变型细胞系更易于悬浮驯化，且遗传性状稳定，不具有致瘤性，增殖病毒能力不受影响，应用到家禽病毒疫苗生产中，替代固相培养的疫苗生产工艺，可大幅度提高生产效率。
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