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公开(公告)号：CN113278648B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202110246774.2
申请日：2021-03-05
Abstract: 本发明公开一种通过共转飞燕草DgAA7GT、DgAA7BG‑GT1和DgSCPL2基因培育蓝色菊花的方法，本发明构建包含DgAA7GT、DgAA7BG‑GT1和DgSCPL2，风铃草Cam F3'5'H和蝶豆CtA3’5’GT五个基因共表达载体，然后导入切花菊。研究证明，将外源飞燕草苷合成基因DgAA7GT、DgAA7BG‑GT1、DgSCPL2基因，在风铃草CamF3'5'H和蝶豆花CtA3'5'GT基因的辅助下，能够使菊花形成了纯正蓝色花色。本发明能填补现有技术只用风铃草CamF3’5’H和蝶豆花CtA3’5’GT基因不能使菊花变成纯正蓝色的空白，为利用基因工程技术选育蓝色菊花提供新颖而实用的方法，将有效推动菊花生物技术育种进程。
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公开(公告)号：CN113278648A
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN202110246774.2
申请日：2021-03-05
Abstract: 本发明公开一种通过共转飞燕草DgAA7GT、DgAA7BG‑GT1和DgSCPL2基因培育蓝色菊花的方法，本发明构建包含DgAA7GT、DgAA7BG‑GT1和DgSCPL2，风铃草Cam F3'5'H和蝶豆CtA3’5’GT五个基因共表达载体，然后导入切花菊。研究证明，将外源飞燕草苷合成基因DgAA7GT、DgAA7BG‑GT1、DgSCPL2基因，在风铃草CamF3'5'H和蝶豆花CtA3'5'GT基因的辅助下，能够使菊花形成了纯正蓝色花色。本发明能填补现有技术只用风铃草CamF3’5’H和蝶豆花CtA3’5’GT基因不能使菊花变成纯正蓝色的空白，为利用基因工程技术选育蓝色菊花提供新颖而实用的方法，将有效推动菊花生物技术育种进程。
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公开(公告)号：CN105713911A
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201610113863.9
申请日：2016-02-29
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/102 , C12N15/66 , C12N15/81 , C12N2800/102 , C12Q1/02 , C12Q1/6858 , C12Q2531/113 , C12Q2565/125 , C12Q2535/125
Abstract: 本发明属于基因工程和生物技术领域，公开一种牡蒿质膜Na+/H+逆向转运蛋白AjSOS1耐盐关键氨基酸位点的筛选方法，提供了SOS1s基因的重组载体、转化细胞、酵母突变体的转化及转化细胞的耐盐性分析。AjSOS1耐盐关键氨基酸位点的筛选：(1)SOS1s基因的克隆；(2)酵母表达载体pAG426GPD?SOS1s的构建；(3)4个SOS1s酵母转化细胞的耐盐性分析；(4)AjSOS1耐盐关键氨基酸位点的筛选。通过定点突变产生一系列AjSOS1muts并回补酵母突变体ANT3，发现AjSOS1序列中耐盐关键氨基酸位点，为菊花及其近缘种属植物耐盐分子机理的研究提供新颖而实用的方法，将有效推动菊花生物技术育种进程。
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公开(公告)号：CN105112403A
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201510587614.9
申请日：2015-09-15
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了菊花耐盐性关联分子标记及其获得方法和应用。该获得方法包括a.连续两年的耐盐性鉴定；b.菊花品种群体结构分析；c.菊花品种亲缘关系分析；d.与菊花耐盐性紧密关联的分子标记的确定。本方法同时运用SRAP、SCoT和EST-SSR三种分子标记技术对159个切花菊品种进行全基因组分子标记扫描，得到的染色条带数量丰富、多态性好、重复性高，有利于获得与耐盐性紧密关联的分子标记。本发明检测到3个标记位点与品种的耐盐性显著关联，为菊花耐盐性分子标记辅助选择提供一定参考。
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公开(公告)号：CN103004585B
公开(公告)日：2015-03-18
申请号：CN201210534830.3
申请日：2012-12-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用卡那霉素快速筛选菊花转基因植株的方法，包括以下几个步骤：（1）确定菊花叶盘不定芽分化Kan筛选浓度、菊花茎段生根Kan筛选浓度以及Kan溶液浸泡筛选浓度和观察时间；（2）对菊花转化植株进行分化再生阶段和生根阶段的筛选得到生根株系；再将生根株系经Kan溶液浸泡筛选后得到转基因菊花Kan抗性株系；（3）转基因菊花的PCR验证：根据转基因载体中的35S启动子序列设计引物对筛选的转基因菊花Kan抗性株系进行PCR 扩增，验证载体片段是否插入菊花基因组。该方法简单准确，能有效地剔除大量假阳性植株，对于实现菊花转基因植株的规模化快速筛选、加快育种进程具有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102841126B
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201210315398.9
申请日：2012-08-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N27/62
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定菊花花粉与柱头互作差异蛋白的方法，属于菊花蛋白质组学领域。该方法包括：以栽培菊花作母本，野菊为父本进行菊花远缘杂交工作。授粉后1h及24h，剪下已授粉的花序；去除取得的花序中舌状花花瓣及萼片得到雌蕊。所得的雌蕊用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质样品；运用iTRAQ与质谱技术快速鉴定差异蛋白，并进行生物信息学分析。本发明针对菊花及其近缘属野生种，提供了一种快速准确鉴定菊花花粉与柱头互作过程中的关键差异蛋白，为解决菊花远缘杂交不亲和性提供研究基础。
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公开(公告)号：CN103250495B
公开(公告)日：2014-10-15
申请号：CN201310208052.3
申请日：2013-05-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01C21/00
Abstract: 本发明公开了一种建立高品质切花菊生产定量精准施氮方案的方法，属于花卉栽培领域。它包括以下步骤：a、不同施氮水平下不同时期植株性状指标与土壤含氮量的测定；b、土壤适宜含氮量的确定：对不同时期植株性状指标与土壤含氮量进行相关回归分析，通过回归方程求解得出不同生长时期土壤适宜含氮量；c、适宜施氮量的确定：对采收期植株各性状指标与施氮量进行相关回归分析，得到回归方程，通过回归方程求解得出土壤适宜施氮量。本发明没有地域限制，适合不同的土壤条件及不同品种，实用性强，且所需设备简单，所得结果可直接应用于生产。
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公开(公告)号：CN103146712B
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201310096562.6
申请日：2013-03-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，涉及菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因及其植物表达载体和应用。本发明菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因序列如SEQ ID NO.1所示，所构建的表达载体pCAMBIA1301‐（+/‐）‐CmbHLH1是将CmbHLH1基因插入到克隆载体pMD19‐T simple vector(Takara)，后经过BamH I(Takara)和Sac I(Takara)双酶切后连接到表达载体pCAMBIA1301的BamH I和Sac I位点得到的。将该植物表达载体用于植物遗传转化，正反义CmbHLH1基因在CaMV35S启动子的启动下过量表达，从而达到影响下游目的基因的表达效果，提高植物铁离子的吸收能力并进一步验证该基因的功能。菊属中该基因是首次发现与铁离子吸收相关的bHLH转录因子。
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公开(公告)号：CN103250495A
公开(公告)日：2013-08-21
申请号：CN201310208052.3
申请日：2013-05-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01C21/00
Abstract: 本发明公开了一种建立高品质切花菊生产定量精准施氮方案的方法，属于花卉栽培领域。它包括以下步骤：a、不同施氮水平下不同时期植株性状指标与土壤含氮量的测定；b、土壤适宜含氮量的确定：对不同时期植株性状指标与土壤含氮量进行相关回归分析，通过回归方程求解得出不同生长时期土壤适宜含氮量；c、适宜施氮量的确定：对采收期植株各性状指标与施氮量进行相关回归分析，得到回归方程，通过回归方程求解得出土壤适宜施氮量。本发明没有地域限制，适合不同的土壤条件及不同品种，实用性强，且所需设备简单，所得结果可直接应用于生产。
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公开(公告)号：CN102242225B
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201110203309.7
申请日：2011-07-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种菊花CVB和CChMVd病毒的二重RT-PCR检测方法，属于分子生物学的病毒检测领域，该方法包括：（1）从菊花植株取样并提取总RNA；（2）分别针对CVB和CChMVd病毒设计两对特异性引物：CVB-F，CVB-R；CChMVd-F，CChMVd-R；（3）以随机六聚体为引物进行反转录得到两种cDNA；（4）利用RT-PCR技术扩增所述cDNA，将扩增的产物进行琼脂糖凝胶电泳，得到665bp特异性片段表示感染CVB，得到206bp特异性片段表示感染CChMVd。本发明提供的检测方法可同时检测被CVB和CChMVd复合侵染的病株，检测特异性强，灵敏度高，工序简单，节约成本。
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