公开(公告)号：CN105713911A

公开(公告)日：2016-06-29

申请号：CN201610113863.9

申请日：2016-02-29

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 蒋甲福 ,  高姣姣 ,  刘晨

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/81 ,  C12N15/01 ,  C12N15/66 ,  C12N1/19 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/84

CPC classification number: C07K14/415 ,  C12N15/102 ,  C12N15/66 ,  C12N15/81 ,  C12N2800/102 ,  C12Q1/02 ,  C12Q1/6858 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2565/125 ,  C12Q2535/125

Abstract: 本发明属于基因工程和生物技术领域，公开一种牡蒿质膜Na+/H+逆向转运蛋白AjSOS1耐盐关键氨基酸位点的筛选方法，提供了SOS1s基因的重组载体、转化细胞、酵母突变体的转化及转化细胞的耐盐性分析。AjSOS1耐盐关键氨基酸位点的筛选：(1)SOS1s基因的克隆；(2)酵母表达载体pAG426GPD?SOS1s的构建；(3)4个SOS1s酵母转化细胞的耐盐性分析；(4)AjSOS1耐盐关键氨基酸位点的筛选。通过定点突变产生一系列AjSOS1muts并回补酵母突变体ANT3，发现AjSOS1序列中耐盐关键氨基酸位点，为菊花及其近缘种属植物耐盐分子机理的研究提供新颖而实用的方法，将有效推动菊花生物技术育种进程。

公开(公告)号：CN105802993B

公开(公告)日：2020-01-21

申请号：CN201610221928.1

申请日：2016-04-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 蒋甲福 ,  高姣姣 ,  程培蕾 ,  刘维妙 ,  陈发棣 ,  陈素梅 ,  房伟民 ,  廖园

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  C12Q1/6895 ,  A01H5/00 ,  A01H6/14

Abstract: 本发明属于基因工程技术和转基因育种领域，公开一种通过转CmSOS1基因提高切花菊耐盐和耐涝性的方法，通过将CmSOS1基因植物表达载体导入切花菊进行超表达以提高切花菊的耐盐和耐涝性。包括如下步骤：(1)构建超表达CmSOS1基因植物表达载体；(2)农杆菌EHA105介导的叶盘法转化菊花；(3)转CmSOS1基因植株的耐盐和耐涝性分析。通过对抗性生根植株进行PCR、定量RT‑PCR检测证实CmSOS1基因已整合到转基因植株基因组中并转录表达，对转基因植株进行盐和淹水处理发现超表达株系耐盐和耐涝性提高，为利用基因工程技术选育菊花抗逆品种提供新颖而实用的方法，将有效推动菊花生物技术育种进程。

公开(公告)号：CN105802993A

公开(公告)日：2016-07-27

申请号：CN201610221928.1

申请日：2016-04-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 蒋甲福 ,  高姣姣 ,  程培蕾 ,  刘维妙 ,  陈发棣 ,  陈素梅 ,  房伟民 ,  廖园

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明属于基因工程技术和转基因育种领域，公开一种通过转CmSOS1基因提高切花菊耐盐和耐涝性的方法，通过将CmSOS1基因植物表达载体导入切花菊进行超表达以提高切花菊的耐盐和耐涝性。包括如下步骤：(1)构建超表达CmSOS1基因植物表达载体；(2)农杆菌EHA105介导的叶盘法转化菊花；(3)转CmSOS1基因植株的耐盐和耐涝性分析。通过对抗性生根植株进行PCR、定量RT?PCR检测证实CmSOS1基因已整合到转基因植株基因组中并转录表达，对转基因植株进行盐和淹水处理发现超表达株系耐盐和耐涝性提高，为利用基因工程技术选育菊花抗逆品种提供新颖而实用的方法，将有效推动菊花生物技术育种进程。