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公开(公告)号:CN111440901B
公开(公告)日:2021-09-24
申请号:CN202010360521.3
申请日:2020-04-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鉴别猪急性腹泻综合征病毒和猪流行性腹泻病毒的PCR‑HRM引物、方法及其应用。本发明提供的引物对特异性好,使用一对引物即可对SADS‑CoV和PEDV进行PCR扩增,然后通过实时监测升温过程中双链DNA荧光染料与PCR扩增产物的结合情况,采集荧光数据,根据两种病毒熔解曲线的不同来鉴别。本发明提供的检测方法不需要病毒的分离鉴定,缩短了鉴别病毒的时间;不需要凝胶电泳观察结果,PCR结束即可利用软件分析结果;费用低,不需要特异性探针,荧光饱和染料便宜易得;具有特异性好、敏感性高和重复性好的特点,可以准确、快速地进行区分,可以在临床检测中推广使用。
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公开(公告)号:CN110527746A
公开(公告)日:2019-12-03
申请号:CN201910697281.3
申请日:2019-07-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供用于检测塞内卡谷病毒与猪圆环3型病毒的双重PCR引物、方法及试剂盒。本发明根据猪塞内卡谷病毒与猪圆环3型病毒的高度保守的特异性序列设计双重PCR引物,并通过引物筛选以及反应体系优化,建立单管同步检测塞内卡谷病毒与猪圆环3型病毒的双重PCR检测试剂盒。试剂盒具备快速简便、特异性强、灵敏度高、可靠性好的特点,同时可进行批量样本分析,一次反应便能鉴别诊断样本是否存在塞内卡谷病毒与猪圆环3型病毒的感染情况,为猪塞内卡谷病毒与猪圆环3型病毒疫情的监测与防控提供强有力的技术支持,有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN105925597B
公开(公告)日:2019-11-08
申请号:CN201610256701.0
申请日:2016-04-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种PEDV S基因主要抗原表位串联的重组基因及其制备方法和应用,属于PEDV S蛋白主要中和表位区高效表达方法领域。本发明的PEDV S基因主要抗原表位串联的重组基因,将PEDV S基因3个主要抗原表位串联获得,且各主要抗原表位之间以柔性氨基酸的碱基序列连接,名称为S123,碱基序列如序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的重组基因包含大部分PEDV抗原表位,且所选的片段避开了高变异区,表达量高效稳定且免疫原性强;应用PEDV S基因主要抗原表位串联的重组蛋白在PEDV的间接ELISA检测试剂盒中的应用,既能快速诊断PEDV,又能很好地监测和评估猪群中和保护。
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公开(公告)号:CN110257557B
公开(公告)日:2023-10-13
申请号:CN201910496100.0
申请日:2019-06-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术技术领域,特别涉及一种TGEV、PEDV、SADS‑CoV和PDCoV的多重RT‑PCR检测引物组。所述的TGEV、PEDV、SADS‑CoV和PDCoV的多重RT‑PCR检测引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.1~8所示,本发明还提供了一种包含上述引物组的试剂盒,该引物组和试剂盒采用一次性PCR反应,可快速区分鉴定TGEV、PEDV、SADS‑CoV和PDCoV,特异性好,灵敏度高,重复性与稳定性好,适用于TGEV、PEDV、SADS‑CoV和PDCoV的鉴别诊断,该多重PCR试剂盒非常适用于疫病病原确诊、病原净化检测和流行病学调查,例如:实验室、出入境现场、养殖场等。
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公开(公告)号:CN113278593A
公开(公告)日:2021-08-20
申请号:CN202110590168.2
申请日:2021-05-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61K47/68 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种欧洲型PRRSV‑N蛋白单克隆抗体,该单克隆抗体的制备方法及其在制备用于检测欧洲型PRRSV感染的免疫检测工具中的应用。本发明以欧洲型PRRSV‑N蛋白为免疫原免疫小鼠,制备阳性单克隆杂交瘤细胞株,并通过诱生腹水与纯化,得到欧洲型PRRSV‑N蛋白单克隆抗体,该单克隆抗体具有特异性好、敏感度高、纯度高的优点,具备较高检测灵敏性与特异性,为进一步应用于欧洲型PRRSV病原的检测奠定基础。
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公开(公告)号:CN111500598A
公开(公告)日:2020-08-07
申请号:CN202010380546.X
申请日:2020-05-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/40 , C12N15/62 , C07K14/08 , C07K19/00 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种编码PRRSV N抗原的核酸分子及其应用、还提供了一种检测欧洲型PRRSV抗体效价的试剂盒及检测方法。本发明提供的检测试剂盒实用性大,可高通量操作,节约检测成本,使用方便。临床检测结果表明,本发明以N蛋白为包被抗原建立的间接ELISA检测方法特异性强,为继续研究欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒打下基础。
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公开(公告)号:CN110093453A
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201910286050.3
申请日:2019-04-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术技术领域,特别涉及一种检测猪Pegivirus的套式RT-PCR引物组、试剂盒及应用。所述的检测猪Pegivirus的套式RT-PCR引物组,其特征在于包含外围引物PPgV–F1、PPgV–R1,内围引物PPgV–F2、PPgV–R2,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1~4所示,本发明还提供了一种包含上述引物组的试剂盒,该试剂盒采用一步法RT-PCR和套式PCR相互配合,可高效、快速、特异地扩增目标序列,适用于疫病病原确诊和病原净化检测,例如:出入境现场、养殖场等。
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公开(公告)号:CN107955840A
公开(公告)日:2018-04-24
申请号:CN201711324308.1
申请日:2017-12-13
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明提供了用于检测用于口蹄疫病毒和塞内加谷病毒的双重PCR引物、检测方法及试剂盒。本发明提供的试剂盒根据检测猪口蹄疫病毒和塞内加谷病毒的高度保守的特异性序列设计双重PCR引物,建立了单管、同步检测猪口蹄疫病毒和塞内加谷病毒的检测方法。本发明试剂盒具有快速简便、特异性强、敏感性高、可靠性好的特点,可以同时进行大批量的样本分析,一次反应便能鉴别诊断样本是猪口蹄疫病毒感染,或猪塞内加谷病毒感染,或两者共同感染,为猪口蹄疫病毒和塞内加谷病毒疫情的监测、防控提供强有力的技术支持,有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN105821159A
公开(公告)日:2016-08-03
申请号:CN201610246485.1
申请日:2016-04-20
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6848 , C12Q2531/113 , C12Q2549/119 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明公开了一种区分PEDV变异株和经典株的套式RT?PCR检测方法,属于PEDV病毒的快速检测技术领域。本发明为了克服病毒分离鉴定、基因测序繁琐、成本高、耗时长的缺点,也为了解决传统RT?PCR特异性低、灵敏性差的问题;本发明提供了一种区分PEDV变异株和经典株的套式RT?PCR检测方法,该方法操作简便,使用简单,准确率高,特异性强,灵敏度高,既能检测发病动物机体感染PEDV是否为变异毒株,更能定性检测病料中PEDV的存在与否,极大地方便了生产中对PEDV区分是否为变异毒株的检测技术,更丰富了实验室对PEDV研究的内容。
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公开(公告)号:CN111676321A
公开(公告)日:2020-09-18
申请号:CN202010602461.1
申请日:2020-06-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于猪急性腹泻综合征病毒检测的DPO引物对、方法、试剂盒及其应用。所述的用于猪急性腹泻综合征病毒检测的DPO引物对核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。利用所述引物对进行PCR扩增,试验结果显示,引物的特异性产物随着引物浓度的增加而得到高效的扩增,并且没有任何杂带,SADS-CoV单项DPO-RT-PCR最低检测限为6.12×103copies/μL,特异性性好,临床检测准确率高。本发明丰富了猪急性腹泻综合征病毒的检测手段,检测速度快,具有很好的应用价值。
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