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公开(公告)号:CN110093453A
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201910286050.3
申请日:2019-04-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术技术领域,特别涉及一种检测猪Pegivirus的套式RT-PCR引物组、试剂盒及应用。所述的检测猪Pegivirus的套式RT-PCR引物组,其特征在于包含外围引物PPgV–F1、PPgV–R1,内围引物PPgV–F2、PPgV–R2,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1~4所示,本发明还提供了一种包含上述引物组的试剂盒,该试剂盒采用一步法RT-PCR和套式PCR相互配合,可高效、快速、特异地扩增目标序列,适用于疫病病原确诊和病原净化检测,例如:出入境现场、养殖场等。
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公开(公告)号:CN107034226A
公开(公告)日:2017-08-11
申请号:CN201710160147.0
申请日:2017-03-17
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12N15/70 , A61K39/12 , A61K2039/5258 , A61K2039/552 , C07K14/005 , C12N2750/10022 , C12N2750/10034 , C12N2800/22
Abstract: 本发明提供了一种可溶性重组蛋白,所述可溶性重组蛋白是将猪圆环病毒II型衣壳蛋白的基因进行原核表达得到的可溶性重组蛋白,所述猪圆环病毒II型衣壳蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明将Cap蛋白进行原核表达,其中表达Cap蛋白的基因经密码子优化,能显著提高其在大肠杆菌中的可溶性表达。本发明采用两步梯度盐析沉淀法纯化目的蛋白,不仅操作简便,纯度大幅提高,生产成本低廉,而且获得的蛋白免疫原性好,适于大规模工业生产。本发明所述PCV2病毒样颗粒疫苗不带病毒核酸,具良好安全性,制备的PCV2病毒样颗粒疫苗对实验动物没有致病性,且免疫动物后,产生猪圆环病毒抗体速度快、水平高且持续时间长。
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公开(公告)号:CN105999255A
公开(公告)日:2016-10-12
申请号:CN201610333059.1
申请日:2016-05-19
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: A61K39/12 , A61K39/39 , A61K2039/525 , A61K2039/575 , C12N2750/10034
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用,属于生物制药技术领域。本发明所述的病毒样颗粒疫苗包括可溶性蛋白,该可溶性蛋白为大肠杆菌表达猪圆环病毒II型完整衣壳蛋白基因得到的蛋白。其中该衣壳蛋白基因是筛选自目前国内猪圆环病毒II型流行毒株的衣壳蛋白基因,并且经过密码子优化,不仅能在大肠杆菌中大量表达,而且表达的可溶性蛋白还能形成病毒样颗粒。应用本发明的方法制备的猪圆环病毒II型亚单位疫苗具有抗原纯度高、免疫原性强等特点,此外该疫苗制备过程简单,生产成本低廉,有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN107338330A
公开(公告)日:2017-11-10
申请号:CN201710656101.8
申请日:2017-08-03
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/114
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及一种检测猪圆环病毒3型的实时荧光定量PCR引物、试剂盒和检测方法。所述的检测猪圆环病毒3型的实时荧光定量PCR引物其核苷酸序列如SEQ ID NO.1~2所示。本发明还提供了一种包含上述引物的试剂盒以及猪圆环病毒3型的检测方法。上述引物、试剂盒以及检测方法特异性强、灵敏性高和重复性稳定,扩增产物的融解曲线波峰单一,无引物二聚体,与猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪蓝耳病毒基因组均无交叉反应;灵敏性为102拷贝/μL,比常规PCR高100倍;组间和组内重复试验的变异系数均小3.0%。为该疫病的分子流行病学和防控研究奠定了基础。
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公开(公告)号:CN110016524A
公开(公告)日:2019-07-16
申请号:CN201910454967.X
申请日:2019-05-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6848 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供用于检测猪捷申病毒的套式PCR引物、方法及试剂盒。本发明提供的试剂盒根据猪捷申病毒的高度保守的特异性序列设计多组套式PCR引物,并通过引物筛选以及反应体系优化,研制出一种检测灵敏性高、特异性好的套式PCR检测试剂盒。本发明提供的检测试剂盒只需要一台普通PCR仪,即可获得与实时荧光定量PCR相当的检测灵敏性,不仅可监测捷申病毒的微量潜伏感染,实现对猪捷申病的早期预警,同时检测成本低,对检测仪器设备与人员操作水平要求较低,利于在养殖生产一线得到应用和推广。
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公开(公告)号:CN110093458A
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201910454968.4
申请日:2019-05-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供用于检测猪非典型性瘟病毒的套式PCR引物、方法及试剂盒。本发明提供的试剂盒根据猪非典型性瘟病毒的高度保守的特异性序列设计多组套式PCR引物,并通过引物筛选以及反应体系优化,研发出一种检测灵敏性高、特异性好的套式PCR检测试剂盒。本发明提供的检测试剂盒只需要一台普通PCR仪,即可获得与实时荧光定量PCR相当的检测灵敏性,不仅可监测猪非典型性瘟病毒的微量潜伏感染,实现对猪非典型性瘟病毒的早期预警,同时检测成本低,对检测仪器设备与人员操作水平要求较低,利于在养殖生产一线得到应用和推广。
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