公开(公告)号：CN111440902A

公开(公告)日：2020-07-24

申请号：CN202010471892.9

申请日：2020-05-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 刘忠华 ,  梁文清 ,  陈湘 ,  司广斌

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供一种猪流行性腹泻病毒检测引物、试剂盒及其应用。本发明通过引入双启动寡核苷酸引物(Dual Priming Oligonucleotide，DPO)设计技术，根据猪流行性腹泻病毒(PEDV)的高度保守的特异性序列设计DPO引物，并通过反应体系优化，建立一种针对PEDV的DPO-RT-PCR检测方法以及相应的检测试剂盒。该试剂盒具备快速简便、特异性强、敏感性高、可靠性好的特点，可实现对PEDV的精准检测，助力PEDV的防控诊治，具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN111440901A

公开(公告)日：2020-07-24

申请号：CN202010360521.3

申请日：2020-04-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 贺东生 ,  司广斌 ,  马沐林 ,  陈志飞 ,  梁文清 ,  陈一波

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种鉴别猪急性腹泻综合征病毒和猪流行性腹泻病毒的PCR-HRM引物、方法及其应用。本发明提供的引物对特异性好，使用一对引物即可对SADS-CoV和PEDV进行PCR扩增，然后通过实时监测升温过程中双链DNA荧光染料与PCR扩增产物的结合情况，采集荧光数据，根据两种病毒熔解曲线的不同来鉴别。本发明提供的检测方法不需要病毒的分离鉴定，缩短了鉴别病毒的时间；不需要凝胶电泳观察结果，PCR结束即可利用软件分析结果；费用低，不需要特异性探针，荧光饱和染料便宜易得；具有特异性好、敏感性高和重复性好的特点，可以准确、快速地进行区分，可以在临床检测中推广使用。

公开(公告)号：CN111440901B

公开(公告)日：2021-09-24

申请号：CN202010360521.3

申请日：2020-04-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 贺东生 ,  司广斌 ,  马沐林 ,  陈志飞 ,  梁文清 ,  陈一波

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种鉴别猪急性腹泻综合征病毒和猪流行性腹泻病毒的PCR‑HRM引物、方法及其应用。本发明提供的引物对特异性好，使用一对引物即可对SADS‑CoV和PEDV进行PCR扩增，然后通过实时监测升温过程中双链DNA荧光染料与PCR扩增产物的结合情况，采集荧光数据，根据两种病毒熔解曲线的不同来鉴别。本发明提供的检测方法不需要病毒的分离鉴定，缩短了鉴别病毒的时间；不需要凝胶电泳观察结果，PCR结束即可利用软件分析结果；费用低，不需要特异性探针，荧光饱和染料便宜易得；具有特异性好、敏感性高和重复性好的特点，可以准确、快速地进行区分，可以在临床检测中推广使用。

公开(公告)号：CN111500598A

公开(公告)日：2020-08-07

申请号：CN202010380546.X

申请日：2020-05-08

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 贺东生 ,  蔡蔚游 ,  陈湘 ,  杨心怡 ,  司广斌 ,  周霞 ,  李锦辉 ,  李根 ,  冯军森 ,  韦柳明 ,  梁文清 ,  陈志飞 ,  陈一波

IPC: C12N15/40 ,  C12N15/62 ,  C07K14/08 ,  C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明提供了一种编码PRRSV N抗原的核酸分子及其应用、还提供了一种检测欧洲型PRRSV抗体效价的试剂盒及检测方法。本发明提供的检测试剂盒实用性大，可高通量操作，节约检测成本，使用方便。临床检测结果表明，本发明以N蛋白为包被抗原建立的间接ELISA检测方法特异性强，为继续研究欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒打下基础。