一种鉴别猪急性腹泻综合征病毒和猪流行性腹泻病毒的PCR-HRM引物、方法及其应用

    公开(公告)号:CN111440901B

    公开(公告)日:2021-09-24

    申请号:CN202010360521.3

    申请日:2020-04-30

    Abstract: 本发明公开了一种鉴别猪急性腹泻综合征病毒和猪流行性腹泻病毒的PCR‑HRM引物、方法及其应用。本发明提供的引物对特异性好,使用一对引物即可对SADS‑CoV和PEDV进行PCR扩增,然后通过实时监测升温过程中双链DNA荧光染料与PCR扩增产物的结合情况,采集荧光数据,根据两种病毒熔解曲线的不同来鉴别。本发明提供的检测方法不需要病毒的分离鉴定,缩短了鉴别病毒的时间;不需要凝胶电泳观察结果,PCR结束即可利用软件分析结果;费用低,不需要特异性探针,荧光饱和染料便宜易得;具有特异性好、敏感性高和重复性好的特点,可以准确、快速地进行区分,可以在临床检测中推广使用。

    一种用于猪急性腹泻综合征病毒检测的DPO引物对、方法、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN111676321A

    公开(公告)日:2020-09-18

    申请号:CN202010602461.1

    申请日:2020-06-29

    Abstract: 本发明公开了一种用于猪急性腹泻综合征病毒检测的DPO引物对、方法、试剂盒及其应用。所述的用于猪急性腹泻综合征病毒检测的DPO引物对核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。利用所述引物对进行PCR扩增,试验结果显示,引物的特异性产物随着引物浓度的增加而得到高效的扩增,并且没有任何杂带,SADS-CoV单项DPO-RT-PCR最低检测限为6.12×103copies/μL,特异性性好,临床检测准确率高。本发明丰富了猪急性腹泻综合征病毒的检测手段,检测速度快,具有很好的应用价值。

    一种猪德尔塔冠状病毒快速检测引物、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN111471802A

    公开(公告)日:2020-07-31

    申请号:CN202010471895.2

    申请日:2020-05-29

    Abstract: 本发明提供一种猪德尔塔冠状病毒快速检测引物、试剂盒及其应用。本发明通过引入双启动寡核苷酸引物(Dual Priming Oligonucleotide,DPO)设计技术,根据猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的高度保守的特异性序列设计DPO引物,并通过反应体系优化,建立一种针对PDCoV的检测方法以及相应的检测试剂盒。该试剂盒具备快速简便、特异性强、敏感性高、可靠性好的特点,可实现对PDCoV的精准检测,助力PDCoV的防控诊治,具有很好的应用前景。

    一种猪流行性腹泻病毒检测引物、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN111440902A

    公开(公告)日:2020-07-24

    申请号:CN202010471892.9

    申请日:2020-05-29

    Abstract: 本发明提供一种猪流行性腹泻病毒检测引物、试剂盒及其应用。本发明通过引入双启动寡核苷酸引物(Dual Priming Oligonucleotide,DPO)设计技术,根据猪流行性腹泻病毒(PEDV)的高度保守的特异性序列设计DPO引物,并通过反应体系优化,建立一种针对PEDV的DPO-RT-PCR检测方法以及相应的检测试剂盒。该试剂盒具备快速简便、特异性强、敏感性高、可靠性好的特点,可实现对PEDV的精准检测,助力PEDV的防控诊治,具有很好的应用前景。

    一种鉴别猪急性腹泻综合征病毒和猪流行性腹泻病毒的PCR-HRM引物、方法及其应用

    公开(公告)号:CN111440901A

    公开(公告)日:2020-07-24

    申请号:CN202010360521.3

    申请日:2020-04-30

    Abstract: 本发明公开了一种鉴别猪急性腹泻综合征病毒和猪流行性腹泻病毒的PCR-HRM引物、方法及其应用。本发明提供的引物对特异性好,使用一对引物即可对SADS-CoV和PEDV进行PCR扩增,然后通过实时监测升温过程中双链DNA荧光染料与PCR扩增产物的结合情况,采集荧光数据,根据两种病毒熔解曲线的不同来鉴别。本发明提供的检测方法不需要病毒的分离鉴定,缩短了鉴别病毒的时间;不需要凝胶电泳观察结果,PCR结束即可利用软件分析结果;费用低,不需要特异性探针,荧光饱和染料便宜易得;具有特异性好、敏感性高和重复性好的特点,可以准确、快速地进行区分,可以在临床检测中推广使用。

    检测猪非典型性瘟病毒的套式RT-PCR引物组、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN110093458A

    公开(公告)日:2019-08-06

    申请号:CN201910454968.4

    申请日:2019-05-29

    Abstract: 本发明提供用于检测猪非典型性瘟病毒的套式PCR引物、方法及试剂盒。本发明提供的试剂盒根据猪非典型性瘟病毒的高度保守的特异性序列设计多组套式PCR引物,并通过引物筛选以及反应体系优化,研发出一种检测灵敏性高、特异性好的套式PCR检测试剂盒。本发明提供的检测试剂盒只需要一台普通PCR仪,即可获得与实时荧光定量PCR相当的检测灵敏性,不仅可监测猪非典型性瘟病毒的微量潜伏感染,实现对猪非典型性瘟病毒的早期预警,同时检测成本低,对检测仪器设备与人员操作水平要求较低,利于在养殖生产一线得到应用和推广。

    用于检测猪捷申病毒的套式PCR引物、方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN110016524A

    公开(公告)日:2019-07-16

    申请号:CN201910454967.X

    申请日:2019-05-29

    Abstract: 本发明提供用于检测猪捷申病毒的套式PCR引物、方法及试剂盒。本发明提供的试剂盒根据猪捷申病毒的高度保守的特异性序列设计多组套式PCR引物,并通过引物筛选以及反应体系优化,研制出一种检测灵敏性高、特异性好的套式PCR检测试剂盒。本发明提供的检测试剂盒只需要一台普通PCR仪,即可获得与实时荧光定量PCR相当的检测灵敏性,不仅可监测捷申病毒的微量潜伏感染,实现对猪捷申病的早期预警,同时检测成本低,对检测仪器设备与人员操作水平要求较低,利于在养殖生产一线得到应用和推广。

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