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公开(公告)号:CN119101501A
公开(公告)日:2024-12-10
申请号:CN202310685007.0
申请日:2023-06-09
Applicant: 佳能医疗系统株式会社 , 南京大学
IPC: C09K11/06 , C12Q1/44 , C09K11/02 , B82Y20/00 , B82Y40/00 , G01N21/76 , G01N27/26 , G01N27/327 , G01N27/30
Abstract: 本发明涉及使用了Pdots的基于Cas酶的ECL纳米探针、传感器、检测方法和检测用试剂盒。本发明的ECL纳米探针的制备方法包含以下工序:Pdots纳米颗粒合成工序,使共轭聚合物与共聚物分子聚合,合成Pdots纳米颗粒,和Pdots纳米颗粒修饰工序,使用具有淬灭剂分子修饰的寡核苷酸链对得到的Pdots纳米颗粒进行修饰。本发明的ECL检测方法中可以使用Cas酶和外切酶的双酶切系统,并且本发明的ECL传感器可以是一次性检测芯片。通过本发明,能够实现无需扩增的、具有高灵敏度、高准确性和特异性并且高灵活性的ECL检测。
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公开(公告)号:CN117470931A
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202210897954.1
申请日:2022-07-28
Applicant: 佳能医疗系统株式会社 , 南京大学
IPC: G01N27/327 , G01N21/76 , G01N33/53 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及基于界面增强和纳米信标的核酸特异位点修饰的电化学发光(ECL)检测方法、ECL检测方法中使用的基底电极、传感器及它们的制备方法、以及试剂盒。所述电化学发光检测方法中使用了本发明的ECL基底电极或传感器,所述ECL基底电极是通过将电催化剂溶液与金属纳米粒子混合后滴加到电极表面而得到的电催化剂‑金属纳米粒子共修饰的电极。本发明中,通过ECL纳米信标和ECL基底电极的信号放大作用,能够极大提高了电化学发光的检测灵敏度,由此能够提供具有灵敏度高、特异性强、检测限低的优异检测性能的在基因特异性水平上检测核酸特异位点修饰的ECL检测方法。
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公开(公告)号:CN119101500A
公开(公告)日:2024-12-10
申请号:CN202310682568.5
申请日:2023-06-09
Applicant: 佳能医疗系统株式会社 , 南京大学
Abstract: 本发明涉及基于热激子有机发光分子的电化学发光(ECL)纳米探针、使用了该电化学发光纳米探针的传感器、检测方法及检测用试剂盒。所述电化学发光纳米探针的制备方法包含下述工序:热激子纳米颗粒合成工序,使热激子有机发光分子与共聚物分子聚合,合成热激子纳米颗粒;和热激子纳米颗粒修饰工序,使用具有淬灭剂分子修饰的寡核苷酸链对得到的热激子纳米颗粒进行修饰,得到经修饰的热激子纳米颗粒。通过本发明,能够提升电化学发光的整体效能,从而实现对目标分子的快速非扩增的高通量检测,并且具有较宽的检测范围和极高的灵敏度。
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公开(公告)号:CN117169494A
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202210592343.6
申请日:2022-05-27
Applicant: 佳能医疗系统株式会社 , 南京大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/533 , G01N33/53 , G01N27/30 , G01N21/64
Abstract: 本发明涉及基于纳米信标的核酸特异位点修饰的电化学发光(ECL)检测方法、电化学发光(ECL)纳米信标及其制备方法以及试剂盒。所述电化学发光检测方法中使用了本发明所制备的电化学发光纳米信标,所述电化学发光纳米信标为二抗修饰了的金属掺杂无机氧化物纳米粒子,通过将包含电化学发光纳米信标和目标核酸的复合物置于电极表面,进行电化学发光检测,根据电化学发光信号有无和强度对目标核酸的修饰进行定性与定量分析。通过本发明的ECL检测方法,能够对核酸特异位点修饰、例如DNA的甲基化位点进行简单、灵敏、快速且通用的检测。
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公开(公告)号:CN115960323B
公开(公告)日:2025-04-08
申请号:CN202111189718.6
申请日:2021-10-12
Applicant: 南京大学
IPC: C08F289/00 , C08F220/54 , G01N21/64
Abstract: 本发明涉及一种细胞表面聚糖的可激活型标记方法。利用原子转移自由基聚合(ATRP)技术,在半乳糖氧化酶(GO)表面利用二硫键连接链引发剂,原位可控生长聚合物(PN),构建聚糖氧化探针GO‑PN。将探针与细胞共温育时,探针上的PN作为物理屏障,使细胞表面聚糖难以接近酶活性中心,GO‑PN无法氧化聚糖末端的半乳糖和N‑乙酰半乳糖胺(Gal/GalNAc)。当向体系中加入还原剂三(2‑羧乙基)膦(TCEP)时,PN和GO之间的二硫键断开使PN解离,探针的酶活性位点得以暴露,氧化细胞表面聚糖的Gal/GalNAc生成醛基。该醛基可进一步与酰肼修饰分子发生高效连接反应,从而实现细胞表面聚糖的可激活型标记。该方法实现了细胞膜聚糖标记的时间控制,为聚糖原位检测和功能研究提供了一种重要的工具。
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公开(公告)号:CN114152604B
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202010925734.6
申请日:2020-09-07
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/76 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种用于细胞成像的无试剂电致化学发光(ECL)检测方法。该方法用设计合成的三乙胺基团(TEA)偶联聚合点(TEA‑Pdots)为发光体,在无外加共反应剂存在时对活细胞表面待测分子进行原位无试剂ECL成像检测。本发明所述的成像方法首先将TEA‑Pdots与链霉亲和素(SA)偶联,再通过生物素标记抗体与相应待测分子及SA的双识别作用,将获得的SA@TEA‑Pdots标记到细胞表面待测分子上;进一步通过温育将该细胞固定在ITO导电玻片表面,利用循环电位扫描获得ECL信号。以人表皮生长因子受体‑2(HER2)为例,本发明实现了活细胞表面HER2的ECL成像检测。本发明基于分子内双电子转移增强聚合物点的ECL,首次实现了活细胞表面待测分子在无外加共反应剂存在时的ECL成像检测,为活细胞表面相关分子的原位检测提供了一个简单、可靠的生物成像方法。
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公开(公告)号:CN111394095B
公开(公告)日:2024-03-19
申请号:CN202010193744.5
申请日:2020-03-13
Applicant: 南京大学
Abstract: 一种基于铁卟啉金属‑有机框架材料/葡萄糖氧化酶的长时间化学发光体系。该化学发光体系以铁卟啉金属‑有机框架材料/葡萄糖氧化酶复合物为化学发光反应的催化剂,以鲁米诺和葡萄糖为化学发光底物,利用铁卟啉金属‑有机框架材料和葡萄糖氧化酶的局域级联催化产生长时间化学发光。铁卟啉金属‑有机框架材料是以Zr4+为金属中心、铁卟啉为配体,通过水热法制备而成,具有较高的过氧化物酶活性和稳定性;在铁卟啉金属‑有机框架材料表面通过静电吸附修饰葡萄糖氧化酶,制备铁卟啉金属‑有机框架材料/葡萄糖氧化酶复合物。含有铁卟啉金属‑有机框架材料/葡萄糖氧化酶复合物、鲁米诺和葡萄糖的混合溶液体系可以产生7.5小时稳定的高强度化学发光。该化学发光体系可在生理条件下产生长时间稳定的高强度化学发光,在生物检测和成像方面具有较好的应用前景。
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公开(公告)号:CN116925994A
公开(公告)日:2023-10-24
申请号:CN202210370892.9
申请日:2022-04-08
Applicant: 南京大学
IPC: C12N5/00
Abstract: 本发明涉及一种在混合活细胞悬浮液中免分离、选择性共价标记目标细胞的方法。该方法以适配体修饰的辣根过氧化酶为探针,以酪胺修饰的功能分子为标记分子。探针可在混合活细胞悬浮液中选择性结合目标细胞。加入过氧化氢和标记分子后,探针催化过氧化氢氧化标记分子生成极高反应活性、寿命极短的苯氧自由基。只有目标细胞上的探针可将标记分子共价连接在细胞膜上,溶液中悬浮的探针无法介导细胞标记,从而实现对目标细胞的免分离、选择性、快速标记。该方法适用于含酪胺基团的不同标记分子,并可在目标细胞上同时共价连接多种标记分子。利用标记分子的生物或化学反应可对混合活细胞悬浮液中的目标细胞进行荧光标记和检测以及细胞膜改造。
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公开(公告)号:CN116536396A
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN202210096855.3
申请日:2022-01-26
Applicant: 南京大学
IPC: C12Q1/6816
Abstract: 本发明公开了一种利用可拆卸DNA‑聚合物限域单细胞的方法,包括:体外制备检测DNA‑聚合物和封装DNA‑聚合物,检测DNA‑聚合物上连接有检测探针;胆固醇修饰的Anchor DNA插入到单细胞的细胞膜上,再根据DNA配对原则在Anchor DNA上依次组装检测DNA‑聚合物和封装DNA‑聚合物,从而在细胞膜上组装DNA‑聚合物交联网络达到限域单细胞的目的。本发明还包括上述利用可拆卸DNA‑聚合物限域单细胞的方法在分泌物检测上的应用。本发明具有操作简单、高单细胞封装率的优势,其构建过程中无需复杂的仪器设备,且构建的DNA‑聚合物具有良好的生物相容性及可拆卸性,支持受测细胞的后续应用。
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公开(公告)号:CN114209314A
公开(公告)日:2022-03-22
申请号:CN202111558686.2
申请日:2021-12-17
Applicant: 南京大学
IPC: A61B5/1477 , A61B5/1486 , A61B5/00 , G01N27/416
Abstract: 本发明为一种可穿戴汗液多生理参数电化学检测装置,包括柔性基底模块、电化学传感阵列模块、汗液导流模块、电路采集模块、蓝牙传输模块及移动终端模块。电化学传感阵列模块和汗液导流模块依次安装在柔性基底模块上,其中汗液导流模块的汗液收集区置于柔性基底模块的汗液收集孔上方,用于与皮肤接触并收集汗液,而汗液导流模块的汗液集中区置于电化学传感阵列模块上方,用于汗液检测;电路采集模块将得到的电化学信号转换成数字信号,再经蓝牙传输模块发送给移动终端模块进行分析处理及结果输出。本发明可对人体汗液中多项生物健康指标进行实时持续检测,方便快捷,简单实用。
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