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公开(公告)号：CN117069866A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311333226.9
申请日：2023-10-16
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸭甲型肝炎病毒3型（DHAV‑3）重组免疫原及其应用。本发明将DHAV‑3结构蛋白VP1、VP3和VP0的保护性抗原优势区经柔性Linker串联后进行原核表达，以纯化的重组蛋白（rDHAV‑3‑VP）为免疫原，免疫5日龄SPF雏鸭，免疫后第10 d攻击1000 ELD50 DHAV‑3鸭胚匀浆毒，连续观察21 d，同时设置卵黄抗体预防组和PBS对照组，结果表明rDHAV‑3‑VP免疫组和卵黄抗体预防组提供相同的保护率，均为82%；免疫组攻毒后存活雏鸭的血清中和抗体效价为1：48；免疫组肝脏组织病变程度低于卵黄抗体预防组和PBS对照组，且免疫组和卵黄抗体预防组的病毒载量无差异，均显著低于PBS对照组。本发明的提出为制备预防DHAV‑3感染提供了一种新的技术手段。
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公开(公告)号：CN111603555B
公开(公告)日：2022-10-21
申请号：CN202010322065.3
申请日：2020-04-22
Applicant: 东北农业大学
IPC: A61K39/155 , A61P31/16 , C07K19/00
Abstract: 本发明公开了一种自组装牛副流感病毒3型纳米颗粒样抗原及其应用。所述的自组装BPIV3纳米颗粒样抗原是通过Bac‑to‑Bac杆状病毒表达系统表达获得的以Helicobacter pylori的ferritin蛋白作为载体携带BPIV3 HN蛋白的自组装BPIV3纳米颗粒样抗原(命名为HNex‑RFNp)，其中，HN蛋白融合在ferritin的N‑端，所述的HN蛋白为位于BPIV3‑vaccine株HN蛋白氨基端128‑572aa的片段。本发明从体液免疫、细胞免疫和动物保护性试验三方面评价了HNex‑RFNp的免疫效果，结果表明，HNex‑RFNp的免疫效果显著地好于灭活BPIV3蛋白和HNex蛋白。本发明的提出为研制可用于预防BPIV3感染的新型、安全和高效的疫苗奠定了理论基础，提供了技术平台。
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公开(公告)号：CN110095607B
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN201910304998.7
申请日：2019-04-16
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/576 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种用于检测1型和3型鸭甲型肝炎病毒血清抗体的通用型间接ELISA试剂盒及其应用。本发明建立了一种基于VP0重组蛋白检测1型和3型DHAV血清抗体的通用型间接ELISA检测方法，该方法是以原核表达的1型DHAV VP0重组蛋白为检测抗原，经Western blotting和间接ELSIA方法证实该VP0重组蛋白即可以与1型DHAV血清抗体发生特异性反应，也能与3型DHAV血清抗体发生特异性反应，因此以1型DHAV VP0重组蛋白为检测抗原进行间接ELISA检测可判断被检鸭血清是否含有1型和3型鸭甲型肝炎病毒的抗体及其抗体水平，本发明的提出为有效防治鸭甲型肝炎提供了新的快速检测手段。
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公开(公告)号：CN105198987B
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201510616098.8
申请日：2015-09-24
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K16/12 , C12N5/20 , C07K7/08 , C12N15/12 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗化脓隐秘杆菌PLO蛋白单克隆抗体及其识别的抗原表位和应用。本发明的一种抗化脓隐秘杆菌PLO蛋白单克隆抗体，由保藏编号为CGMCC NO.11188的杂交瘤细胞株或保藏编号为CGMCC NO.11189的杂交瘤细胞株分泌产生，该单克隆抗体对化脓隐秘杆菌PLO蛋白具有反应特异性，是针对化脓隐秘杆菌PLO蛋白的特异性的两株抗体。本发明还提供了与所述单克隆抗体特异性结合的抗原表位多肽。本发明的技术方案对PLO生物活性的研究及相关疫苗和治疗手段的开发具有重要意义。
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公开(公告)号：CN108841793A
公开(公告)日：2018-11-20
申请号：CN201810586835.8
申请日：2018-06-08
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/573 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了抗鸭Mx-A单克隆抗体及其在检测鸭Mx蛋白中的应用。本发明以含有鸭Mx基因的重组质粒为模板，设计1对特异性引物扩增得到编码鸭Mx N端1-100aa的基因片段Mx-A。构建其重组原核表达载体pET-30a-Mx-A和pET-32a-Mx-A，采用大肠杆菌原核表达技术表达鸭Mx-A，得到重组蛋白rDupET-30a-Mx-A和rDupET-32a-Mx-A。以重组蛋白rDupET-30a-Mx-A为免疫原，免疫小鼠，经筛选获得1株稳定分泌抗鸭Mx-A的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为4B6，保藏号是：CGMCC NO.15287。研究表明，该单克隆抗体能与原核表达的重组鸭Mx-A蛋白反应，同时也能够与转染真核表达载体pcDNA3.1-Mx的鸡胚成纤维细胞表达的鸭Mx蛋白及感染DHAV-3后鸭胚不同组织表达的鸭Mx蛋白发生特异性反应。因此，本发明的提出为检测鸭Mx蛋白提供了一种新的、有效的技术手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105886474A
公开(公告)日：2016-08-24
申请号：CN201610244264.0
申请日：2016-04-19
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/28 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了抗鹅CD8α链胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞中的应用。本发明以携带鹅CD8α链胞外区基因的原核表达载体为模板，设计1对特异性引物扩增得到鹅CD8α链胞外区238?480bp基因，构建重组原核表达载体，采用大肠杆菌表达鹅CD8α链胞外区80?160aa，得到重组蛋白rGopET?30a?CD8αex。以重组蛋白rGopET?30a?CD8αex为免疫原，免疫小鼠，经筛选获得1株稳定分泌抗鹅CD8α链胞外区80?160aa单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为9E4，保藏号是：CGMCCNO.11194。研究表明，该单克隆抗体能与纯化的重组鹅CD8α链胞外区80?160aa蛋白反应，同时也能够与分离的鹅、鸭以及鸡的外周血淋巴细胞发生特异性反应。因此，本发明的提出为检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞提供了一种新的、有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN102731655B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201210154983.5
申请日：2012-05-18
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了鹅免疫球蛋白编码区及其恒定区特异性单克隆抗体与应用。本发明提供的鹅免疫球蛋白编码区包含λ链的全部编码区序列，重链的可变区、D片段和J片段编码序列、α链的恒定区编码序列以及μ链、υ链恒定区的部分编码序列。本发明的免疫球蛋白恒定区可用于制备抗鹅免疫球蛋白λ链、μ链、α链、υ链恒定区抗体，还可用于鉴别与抗鹅免疫球蛋白单克隆抗体结合的鹅免疫球蛋白的类和型。本发明还提供了一种采用Protein A亲和层析方法纯化的鹅血清免疫球蛋白作为免疫原制备抗鹅免疫球蛋白单克隆抗体的方法及由该方法得到的单克隆抗体及分泌该抗体的杂交瘤细胞株。本发明的抗鹅免疫球蛋白恒定区抗体能够用于检测或纯化鹅免疫球蛋白。
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公开(公告)号：CN101870980B
公开(公告)日：2013-05-29
申请号：CN201010175292.4
申请日：2010-05-18
Applicant: 东北农业大学
Abstract: Asia 1型口蹄疫病毒3A非结构蛋白抗原表位缺失感染性cDNA及其构建方法，它涉及口蹄疫病毒3A非结构蛋白抗原表位缺失感染性cDNA及其构建方法。它解决了现有灭活疫苗纯化过程中很难监测，所以残留的非结构蛋白会干扰对自然感染动物的诊断，诊断的准确性低的问题。序列见SEQ ID NO：1。方法：一、从pBSAs全长重组质粒中克隆3A14L和3A14R，得到3A14L PCR产物和3A14R PCR产物，然后融合PCR回收融合产物；二、双酶切pBSAs全长重组质粒和融合产物，再连接并构建重组质粒pBSAs-3A14D即完成。本发明中缺失3A非结构蛋白的一部分，不会残留此部分的非结构蛋白，诊断的准确性高。
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公开(公告)号：CN102731655A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201210154983.5
申请日：2012-05-18
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了鹅免疫球蛋白编码区及其恒定区特异性单克隆抗体与应用。本发明提供的鹅免疫球蛋白编码区包含λ链的全部编码区序列，重链的可变区、D片段和J片段编码序列、α链的恒定区编码序列以及μ链、υ链恒定区的部分编码序列。本发明的免疫球蛋白恒定区可用于制备抗鹅免疫球蛋白λ链、μ链、α链、υ链恒定区抗体，还可用于鉴别与抗鹅免疫球蛋白单克隆抗体结合的鹅免疫球蛋白的类和型。本发明还提供了一种采用Protein A亲和层析方法纯化的鹅血清免疫球蛋白作为免疫原制备抗鹅免疫球蛋白单克隆抗体的方法及由该方法得到的单克隆抗体及分泌该抗体的杂交瘤细胞株。本发明的抗鹅免疫球蛋白恒定区抗体能够用于检测或纯化鹅免疫球蛋白。
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公开(公告)号：CN101591659A
公开(公告)日：2009-12-02
申请号：CN200810064638.6
申请日：2008-05-30
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/21
Abstract: 一种牛干扰素－α多肽基因，它涉及一种牛干扰素－α基因。它解决了目前牛干扰素－α基因在原核表达体系内存在低表达和构建表达载体后转录的mRNA翻译活性低的问题。本发明牛干扰素－α多肽基因序列如SEQ ID NO：1所示。本发明木糖还原酶基因序全长516bp，7bp处有起始密码子ATG，508bp处有终止密码子TAA，有504bp完整的开放阅读框。本发明牛干扰素－α多肽基因可以在原核表达系统中高效表达牛干扰素－α成熟多肽。本发明的牛干扰素－α多肽基因转录后mRNA的二级结构明显优于天然牛干扰素－α多肽基因，提高牛干扰素－α的mRNA翻译活性。
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