公开(公告)号：CN108841793B

公开(公告)日：2021-08-27

申请号：CN201810586835.8

申请日：2018-06-08

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 马波 ,  郝春雪 ,  崔嘉琦 ,  张文晶 ,  刘悦 ,  王君伟

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/40 ,  G01N33/577 ,  G01N33/573 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了抗鸭Mx‑A单克隆抗体及其在检测鸭Mx蛋白中的应用。本发明以含有鸭Mx基因的重组质粒为模板，设计1对特异性引物扩增得到编码鸭Mx N端1‑100aa的基因片段Mx‑A。构建其重组原核表达载体pET‑30a‑Mx‑A和pET‑32a‑Mx‑A，采用大肠杆菌原核表达技术表达鸭Mx‑A，得到重组蛋白rDupET‑30a‑Mx‑A和rDupET‑32a‑Mx‑A。以重组蛋白rDupET‑30a‑Mx‑A为免疫原，免疫小鼠，经筛选获得1株稳定分泌抗鸭Mx‑A的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为4B6，保藏号是：CGMCC NO.15287。研究表明，该单克隆抗体能与原核表达的重组鸭Mx‑A蛋白反应，同时也能够与转染真核表达载体pcDNA3.1‑Mx的鸡胚成纤维细胞表达的鸭Mx蛋白及感染DHAV‑3后鸭胚不同组织表达的鸭Mx蛋白发生特异性反应。因此，本发明的提出为检测鸭Mx蛋白提供了一种新的、有效的技术手段。

公开(公告)号：CN105886474B

公开(公告)日：2019-09-17

申请号：CN201610244264.0

申请日：2016-04-19

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 马波 ,  曹春秋 ,  张雪莲 ,  王君伟 ,  张文龙 ,  高明春 ,  张文晶 ,  崔嘉琦

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/28 ,  G01N33/577 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了抗鹅CD8α链胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞中的应用。本发明以携带鹅CD8α链胞外区基因的原核表达载体为模板，设计1对特异性引物扩增得到鹅CD8α链胞外区238‑480bp基因，构建重组原核表达载体，采用大肠杆菌表达鹅CD8α链胞外区80‑160aa，得到重组蛋白rGopET‑30a‑CD8αex。以重组蛋白rGopET‑30a‑CD8αex为免疫原，免疫小鼠，经筛选获得1株稳定分泌抗鹅CD8α链胞外区80‑160aa单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为9E4，保藏号是：CGMCCNO.11194。研究表明，该单克隆抗体能与纯化的重组鹅CD8α链胞外区80‑160aa蛋白反应，同时也能够与分离的鹅、鸭以及鸡的外周血淋巴细胞发生特异性反应。因此，本发明的提出为检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞提供了一种新的、有效的技术手段。

公开(公告)号：CN108841793A

公开(公告)日：2018-11-20

申请号：CN201810586835.8

申请日：2018-06-08

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 马波 ,  郝春雪 ,  崔嘉琦 ,  张文晶 ,  刘悦 ,  王君伟

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/40 ,  G01N33/577 ,  G01N33/573 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了抗鸭Mx-A单克隆抗体及其在检测鸭Mx蛋白中的应用。本发明以含有鸭Mx基因的重组质粒为模板，设计1对特异性引物扩增得到编码鸭Mx N端1-100aa的基因片段Mx-A。构建其重组原核表达载体pET-30a-Mx-A和pET-32a-Mx-A，采用大肠杆菌原核表达技术表达鸭Mx-A，得到重组蛋白rDupET-30a-Mx-A和rDupET-32a-Mx-A。以重组蛋白rDupET-30a-Mx-A为免疫原，免疫小鼠，经筛选获得1株稳定分泌抗鸭Mx-A的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为4B6，保藏号是：CGMCC NO.15287。研究表明，该单克隆抗体能与原核表达的重组鸭Mx-A蛋白反应，同时也能够与转染真核表达载体pcDNA3.1-Mx的鸡胚成纤维细胞表达的鸭Mx蛋白及感染DHAV-3后鸭胚不同组织表达的鸭Mx蛋白发生特异性反应。因此，本发明的提出为检测鸭Mx蛋白提供了一种新的、有效的技术手段。

公开(公告)号：CN105886474A

公开(公告)日：2016-08-24

申请号：CN201610244264.0

申请日：2016-04-19

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 马波 ,  曹春秋 ,  张雪莲 ,  王君伟 ,  张文龙 ,  高明春 ,  张文晶 ,  崔嘉琦

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/28 ,  G01N33/577 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了抗鹅CD8α链胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞中的应用。本发明以携带鹅CD8α链胞外区基因的原核表达载体为模板，设计1对特异性引物扩增得到鹅CD8α链胞外区238?480bp基因，构建重组原核表达载体，采用大肠杆菌表达鹅CD8α链胞外区80?160aa，得到重组蛋白rGopET?30a?CD8αex。以重组蛋白rGopET?30a?CD8αex为免疫原，免疫小鼠，经筛选获得1株稳定分泌抗鹅CD8α链胞外区80?160aa单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为9E4，保藏号是：CGMCCNO.11194。研究表明，该单克隆抗体能与纯化的重组鹅CD8α链胞外区80?160aa蛋白反应，同时也能够与分离的鹅、鸭以及鸡的外周血淋巴细胞发生特异性反应。因此，本发明的提出为检测禽类外周血中CD8+T淋巴细胞提供了一种新的、有效的技术手段。