公开(公告)号：CN101148662B

公开(公告)日：2011-10-05

申请号：CN200710092672.X

申请日：2007-09-06

Applicant: 重庆大学

Inventor： 胡宗利 ,  陈绪清 ,  陈国平 ,  潘宇 ,  杨妤欣 ,  胡廷章

IPC: C12N15/09 ,  C12N15/62 ,  C12N1/19 ,  C12P21/02 ,  C07K19/00

Abstract: 本发明公开了一种异源表达和纯化人艾滋病病毒辅助受体CCR5的方法，该方法主要包括步骤：构建诱导型GST-CCR5融合蛋白表达载体并转化粟酒酵母；鉴定粟酒酵母转化子；GST-CCR5融合蛋白在粟酒酵母中的诱导表达；确认CCR5基因在粟酒酵母中得到表达；分离和纯化GST-CCR5融合蛋白；检测分离纯化的GST-CCR5融合蛋白；鉴定分离纯化的GST-CCR5融合蛋白；从GST-CCR5融合蛋白中的分离和纯化人类CCR5蛋白。本发明的方法可以应用于在粟酒酵母中表达高等动植物的膜蛋白，并且获得的蛋白质具有翻译后的修饰作用和生物活性。表达的膜蛋白对于研究其晶体结构和高通量药物筛选有应用价值。

公开(公告)号：CN101285066A

公开(公告)日：2008-10-15

申请号：CN200810069723.1

申请日：2008-05-22

Applicant: 重庆大学

Inventor： 胡宗利 ,  杨妤欣 ,  陈国平 ,  陈绪清 ,  王翊 ,  刘志昭

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/81 ,  C07K14/47 ,  C07K19/00 ,  C07K1/14 ,  C07K1/22

Abstract: 本发明公开了一种异源表达和纯化人细胞膜上葡萄糖转运蛋白家族成员GLUT1、GLUT2、GLUT3的方法，其步骤为：构建诱导型融合蛋白表达载体GST－GLUT1、GST－GLUT2、GST－GLUT3并转化裂殖酵母；鉴定裂殖酵母转化子；GST－GLUT1、GST－GLUT2、GST－GLUT3三种融合蛋白在裂殖酵母中的诱导表达；确认GLUT1、GLUT2、GLUT3基因在裂殖酵母中得到表达；分离和纯化上述三种融合蛋白；检测和鉴定分离纯化的上述三种融合蛋白；从上述三种融合蛋白中的分别分离和纯化人类GLUT1、GLUT2、GLUT3蛋白。本发明的方法可以应用于在裂殖酵母中表达高等动植物的膜蛋白，并且获得的蛋白质具有翻译后的修饰作用和生物活性。

公开(公告)号：CN101148662A

公开(公告)日：2008-03-26

申请号：CN200710092672.X

申请日：2007-09-06

Applicant: 重庆大学

Inventor： 胡宗利 ,  陈绪清 ,  陈国平 ,  潘宇 ,  杨妤欣 ,  胡廷章

IPC: C12N15/09 ,  C12N15/62 ,  C12N1/19 ,  C12P21/02 ,  C07K19/00

Abstract: 本发明公开了一种异源表达和纯化人艾滋病病毒辅助受体CCR5的方法，该方法主要包括步骤：构建诱导型GST－CCR5融合蛋白表达载体并转化粟酒酵母；鉴定粟酒酵母转化子；GST－CCR5融合蛋白在粟酒酵母中的诱导表达；确认CCR5基因在粟酒酵母中得到表达；分离和纯化GST－CCR5融合蛋白；检测分离纯化的GST－CCR5融合蛋白；鉴定分离纯化的GST－CCR5融合蛋白；从GST－CCR5融合蛋白中的分离和纯化人类CCR5蛋白。本发明的方法可以应用于在粟酒酵母中表达高等动植物的膜蛋白，并且获得的蛋白质具有翻译后的修饰作用和生物活性。表达的膜蛋白对于研究其晶体结构和高通量药物筛选有应用价值。