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公开(公告)号：CN114525352A
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202210293418.0
申请日：2022-03-24
Applicant: 郑州轻工业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12N15/11 , G01N33/543 , G01N33/52 , G01N33/58 , G01N33/68 , C12R1/01 , C12R1/42 , C12R1/19 , C12R1/445 , C12R1/63 , C12R1/385
Abstract: 本发明公开了一种多重PCR与胶体金试纸条联合高通量检测致病菌的方法：根据三种不同致病菌的特异性基因片段分别设计一对上、下游引物，且上游引物5'端修饰巯基，下游引物5'端分别修饰生物素、荧光素和地高辛；将三种致病菌样品用PBS洗涤并重悬于PBS中，煮沸8‑15min后冷却至室温，离心，分别取上清DNA并进行多重PCR扩增，获得PCR产物；PCR产物与胶体金结合，封闭后滴加至试纸条上，肉眼观察结果。本发明利用PCR扩增技术来提高检测食源性致病菌的灵敏度，具有高通量检测、灵敏度高、特异性强、耗时短等优点，适用于致病菌的检测。
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公开(公告)号：CN114525352B
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202210293418.0
申请日：2022-03-24
Applicant: 郑州轻工业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12N15/11 , G01N33/543 , G01N33/52 , G01N33/58 , G01N33/68 , C12R1/01 , C12R1/42 , C12R1/19 , C12R1/445 , C12R1/63 , C12R1/385
Abstract: 本发明公开了一种多重PCR与胶体金试纸条联合高通量检测致病菌的方法：根据三种不同致病菌的特异性基因片段分别设计一对上、下游引物，且上游引物5'端修饰巯基，下游引物5'端分别修饰生物素、荧光素和地高辛；将三种致病菌样品用PBS洗涤并重悬于PBS中，煮沸8‑15min后冷却至室温，离心，分别取上清DNA并进行多重PCR扩增，获得PCR产物；PCR产物与胶体金结合，封闭后滴加至试纸条上，肉眼观察结果。本发明利用PCR扩增技术来提高检测食源性致病菌的灵敏度，具有高通量检测、灵敏度高、特异性强、耗时短等优点，适用于致病菌的检测。
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公开(公告)号：CN113881790B
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202111214519.6
申请日：2021-10-19
Applicant: 郑州轻工业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q1/04 , G01N33/53 , G01N33/558 , G01N33/58 , C12R1/19 , C12R1/42 , C12R1/445 , C12R1/385 , C12R1/63 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种磁性Fe3O4@适配体的制备方法：制备Fe3O4粉末；将Fe3O4粉末用超纯水洗涤后重悬于超纯水中，加入适配体后于室温下震荡20‑30 min，磁分离弃掉上清液，再用超纯水洗涤后重悬于超纯水中，即得。本发明还提供了利用Fe3O4@适配体与荧光试纸条联合在检测食源性致病菌方面的应用。本发明利用PCR扩增技术及荧光信号来提高检测食源性致病菌的灵敏度，具有检测灵敏度高，特异性强，检测时间短等优点，适用于食品样品中致病菌的检测。
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公开(公告)号：CN113881790A
公开(公告)日：2022-01-04
申请号：CN202111214519.6
申请日：2021-10-19
Applicant: 郑州轻工业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q1/04 , G01N33/53 , G01N33/558 , G01N33/58 , C12R1/19 , C12R1/42 , C12R1/445 , C12R1/385 , C12R1/63 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种磁性Fe3O4@适配体的制备方法：制备Fe3O4粉末；将Fe3O4粉末用超纯水洗涤后重悬于超纯水中，加入适配体后于室温下震荡20‑30 min，磁分离弃掉上清液，再用超纯水洗涤后重悬于超纯水中，即得。本发明还提供了利用Fe3O4@适配体与荧光试纸条联合在检测食源性致病菌方面的应用。本发明利用PCR扩增技术及荧光信号来提高检测食源性致病菌的灵敏度，具有检测灵敏度高，特异性强，检测时间短等优点，适用于食品样品中致病菌的检测。
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