公开(公告)号：CN101857902A

公开(公告)日：2010-10-13

申请号：CN201010204131.3

申请日：2010-06-21

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 赵旺生 ,  罗军 ,  王伟 ,  滕炎玲 ,  孙雨婷

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种脂蛋白脂酶基因有效shRNA的筛选方法，其包括以下步骤：A1：编码目的shRNA的单链DNA寡核苷酸片段的设计、合成；A2：pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA载体的构建；A3：pDsRed1-C1-LPL载体的构建；A4：shRNA有效序列的筛选；由于采用红光和绿光两种不同荧光分别标记干扰载体及靶基因，使得干扰序列筛选过程省时高效，结果更直观可靠，而且可以同时筛选多条序列。

公开(公告)号：CN102286516A

公开(公告)日：2011-12-21

申请号：CN201110207230.1

申请日：2011-07-25

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 林先滋 ,  罗军 ,  赵旺生 ,  余康 ,  朱江江 ,  张犁苹

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/861

Abstract: 本发明公开了一种山羊miR-103的腺病毒载体的构建方法及其应用，其特征在于包括如下步骤：合成上、下游引物，以山羊miR-103DNA模板进行PCR扩增，其中所述上游引物为5’-CGC GATCGGTACCAACAGAACATTTTGAG，下游引物5’-CACGTGGGCTAAGCTTG CATATACAC CTACTACAT；将pri-miR-103扩增产物与pAdTrack-CMV穿梭质粒同时进行Kpn I/HindⅢ双酶切；加入连接酶进行连接反应。该方法增加了miR-103表达的稳定性，再同源重组时能够降低了假阳性的比例，提高了重组效率。

公开(公告)号：CN102021190A

公开(公告)日：2011-04-20

申请号：CN201010535004.1

申请日：2010-11-09

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 罗军 ,  赵旺生 ,  王伟 ,  滕炎玲

IPC: C12N15/55

Abstract: 本发明公开了一种甘油三酯水解酶基因有效shRNA的筛选方法，其包括以下步骤：A1：编码目的shRNA的单链DNA寡核苷酸片段的设计、合成；A2：pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA载体的构建；A3：pDsRed1-C1-ATGL载体的构建；A4：shRNA有效序列的筛选；由于采用红光和绿光两种不同荧光分别标记干扰载体及靶基因，使得干扰序列筛选过程省时高效，结果更直观可靠，而且可以同时筛选多条序列。

公开(公告)号：CN101870987A

公开(公告)日：2010-10-27

申请号：CN201010208681.2

申请日：2010-06-25

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 赵旺生 ,  罗军 ,  朱越 ,  滕炎玲 ,  林先滋 ,  李君

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种山羊SCD基因重组腺病毒载体的构建方法，包括以下步骤：A1，构建腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-SCD；A2，重组腺病毒载体Ad-SCD的构建，通过对SCD基因过表达，将可能引起乳腺或其它组织合成脂肪酸含量及组成的改变，进而提高山羊乳及其产品的营养价值。由于采用细菌重组的方法不仅可以最大程度上避免野生型腺病毒的产生，而且重组成功率较高。另外，本方法不需要进行多轮费时的病毒空斑化筛选，大大缩短了实验周期，提高了成功率。

公开(公告)号：CN101812428A

公开(公告)日：2010-08-25

申请号：CN201010155429.X

申请日：2010-04-26

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王桢 ,  罗军 ,  王伟 ,  赵旺生 ,  林先滋 ,  滕炎玲

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种乳腺上皮细胞的组织块种植方法，其特征在于，包括如下步骤：1)预处理：以血清铺满培养皿，静置；2)种植：在所述培养皿中种植乳腺组织块，收集乳腺上皮细胞和成纤维细胞；3)纯化：除去成纤维细胞，得到乳腺上皮细胞。上述方法省去传统方法中制备胶原的繁琐步骤，获得较高组织块贴壁率，最终得到形态良好、数量较多的乳腺上皮细胞。