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发明公开
一种稳定表达山羊miR-103的腺病毒载体的构建方法及其应用无效

公开(公告)号：CN102286516A

公开(公告)日：2011-12-21

申请号：CN201110207230.1

申请日：2011-07-25

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 林先滋 , 罗军 , 赵旺生 , 余康 , 朱江江 , 张犁苹

IPC: C12N15/66 , C12N15/861

Abstract: 本发明公开了一种山羊miR-103的腺病毒载体的构建方法及其应用，其特征在于包括如下步骤：合成上、下游引物，以山羊miR-103DNA模板进行PCR扩增，其中所述上游引物为5’-CGC GATCGGTACCAACAGAACATTTTGAG，下游引物5’-CACGTGGGCTAAGCTTG CATATACAC CTACTACAT；将pri-miR-103扩增产物与pAdTrack-CMV穿梭质粒同时进行Kpn I/HindⅢ双酶切；加入连接酶进行连接反应。该方法增加了miR-103表达的稳定性，再同源重组时能够降低了假阳性的比例，提高了重组效率。

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