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公开(公告)号：CN113755514A
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202111048805.X
申请日：2021-09-08
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌突变体的构建方法及外膜囊泡的制备方法。其包括大肠杆菌外膜囊泡高产突变体的构建和外膜囊泡的提取，所述突变体是通过CRISPR‑Cas9系统同时敲除大肠杆菌Tol‑pal内膜系统蛋白(如SEQ ID NO:1所示)和外膜磷脂积累相关蛋白(如SEQ ID NO:2所示)进行构建。所述外膜囊泡的提取包括：将菌株培养于LB液体培养基，将培养上清过滤除菌、超滤浓缩和超速离心，最终获得外膜囊泡。本发明中双基因的缺失发挥了协同作用，与现有单双基因突变株相比，不仅可显著提高外膜囊泡产量，较原始菌株提高了约180倍，而且所得外膜囊泡具有高纯度、粒径大小适当等特点，是一种低廉、高效的制备方法，解决了外膜囊泡产量不足的问题，展现了其良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN104178463B
公开(公告)日：2017-06-20
申请号：CN201310151132.X
申请日：2013-04-27
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种制备增强型单体细菌荧光素酶luxAB的方法，先获得目的基因；构建重组表达载体；获得含重组表达质粒的表达菌种；诱导靶蛋白的表达及蛋白的纯化；检测纯化的增强型单体细菌荧光素酶的活性。本发明利用融合型荧光素酶其独特的优势，将luxA和luxB基因异二聚体荧光素酶基因融合并经过易错PCR突变和化学随机突变，筛选得到9个荧光强度增强的突变体，然后经过shuffling技术，得到一个增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB，将其克隆到表达载体pET28a上，转化至BL21(DE3)菌株中表达，并用温和破碎法裂解细胞，纯化表达产物，得到增强型单体细菌荧光素酶，本发明的方法过程简单、生长周期短、成本低廉、易于纯化、酶活性损失小，性能稳定，具有重要的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN105754901A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610228039.8
申请日：2016-04-13
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一株具有促植物抗干旱作用的克雷伯氏菌及其应用，代号为LTGPAF?6F，该菌株于2016年1月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 2016053，分类命名为Klebsiella sp.LTGPAF?6F。本发明所述菌株LGPAF?6F具有产胞外多糖、吲哚乙酸，能自生固氮等促生抗逆性状。将该菌株制备成108～109CFU/mL的活菌制剂，接种到小麦幼苗根部，能显著增加小麦幼苗生物量，提高小麦幼苗对干旱胁迫的抵御能力。本发明所述克雷伯氏菌LTGPAF?6F可以作为生物菌剂，在旱区农业生产实践中进行应用，提高植物抗旱能力。
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公开(公告)号：CN105754900A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610228010.X
申请日：2016-04-13
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一株促作物抗干旱的欧文氏菌新种及其应用，该菌种从中国新疆荒漠地区采集的骆驼刺叶部组织分离获得，代号为LTYR?11Z，该菌种于2016年1月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 2016052，分类命名为骆驼刺欧文氏菌Erwinia alhag。本发明所述欧文氏菌新种Erwinia alhagi LTYR?11Z具有产生植物生长激素吲哚乙酸，分泌铁载体，溶解难溶性无机磷酸盐等植物促生作用，且对植物病原真菌小麦根腐菌具有一定的抑制作用。本发明所述的欧文氏菌新种制成的活菌制剂可作为接种剂在干旱生境的农业生产中进行应用，促进农作物生长，提高农作物抗旱能力。
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公开(公告)号：CN118222449A
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202410440774.X
申请日：2024-04-12
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明从小麦茎组织分离得到一种假单胞菌属SR9菌种，通过全基因组平均核苷酸相似度分析，证实菌种SR9为哈瓦斯假单胞菌，平板对峙实验证明了SR9菌种对假禾谷镰刀菌具有较强的拮抗效果，在对峙培养中，哈瓦斯假单胞菌SR9对假禾谷镰刀菌的生长抑制率达到69％以上，并通过类似的方法验证了SR9的广谱抑菌性可以拮抗多种植物病原菌，如脉孢霉菌、核盘菌和葡萄座腔菌。可将其应用于由假禾谷镰刀菌引起的小麦茎基腐病，由脉孢霉菌引起的玉米芯或棉籽壳的灰霉病，由核盘菌引起的壳果类作物的褐腐病，以及由葡萄座腔菌引起的苹果果实的轮纹烂果病，为植物真菌病害的生物防治提供了新方案和新思路。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117625430A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202310681790.3
申请日：2023-06-09
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种激活放线菌沉默次生代谢产物合成基因簇(BGC)表达的方法，涉及微生物次生代谢产物技术领域，其技术要点为：该方法采用微生物群体感应信号分子刺激放线菌沉默基因簇，使放线菌沉默BGCs被激活；所使用的群体感应信号分子包括但不限于Farnesol、Tyrosol、3‑oxo‑C12‑HSL和Tryptophol。本发明的方法为一种新型激活放线菌沉默基因簇表达的方法，即为一种快速、高效激活不同放线菌中沉默BGCs的策略，本发明的方法将为激活自然界中大量存在的沉默BGCs宝库，深入发掘新型放线菌天然产物提供有效途径，从而为医药、农业等多领域的研发贡献更多更好的新型先导化合物。
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公开(公告)号：CN111569047B
公开(公告)日：2023-02-10
申请号：CN202010412287.4
申请日：2020-05-15
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种蛋白型锰离子螯合剂、免疫抑制剂及应用，属于基因工程领域，包括假结核耶尔森氏菌转锰效应蛋白，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；在所述的蛋白上螯合Mn2+。转锰效应蛋白可特异并高效与锰离子结合，且在增强细菌的致病能力方面发挥了重要作用，具体体现在该效应蛋白编码基因缺失突变体菌株降低了假结核耶尔森氏菌对小鼠的致病能力，并且该效应蛋白编码基因缺失突变体菌株更能激活宿主细胞的天然免疫应答；本发明公开的转锰效应蛋白在制备特异性锰离子螯合剂以及免疫抑制剂方面均具有潜在应用前景，同时为增强细菌抗环境胁迫能力提供了新的途径。
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公开(公告)号：CN114703166A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210474152.X
申请日：2022-04-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , A61K38/47 , A61P31/10 , A01N63/50 , A01P3/00 , A23L3/3571 , A23B7/155 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种假结核耶尔森氏菌抗真菌蛋白、应用及分离纯化方法，所述蛋白的氨基酸序列由SEQ ID NO:1所示，或在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中经取代、缺失或插入一个或多个氨基酸序列获得具有同等活性的蛋白。本发明还提供了所述抗真菌效应蛋白的编码基因、表达载体或工程菌，本发明还提供了假结核耶尔森氏菌抗真菌蛋白的分离纯化方法。所述蛋白在抗真菌药剂中的应用以及所属蛋白的编码基因在转化植物中的应用。本发明涉及的YPK_D305抗真菌基因属于一个新型几丁质酶，该基因具有更高的抗真菌活性，靶向作用真菌范围也更广泛，为病原真菌防治提供策略和途径，具有较大的学术价值和潜在的应用前景。
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公开(公告)号：CN105754900B
公开(公告)日：2020-04-17
申请号：CN201610228010.X
申请日：2016-04-13
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一株促作物抗干旱的欧文氏菌新种及其应用，该菌种从中国新疆荒漠地区采集的骆驼刺叶部组织分离获得，代号为LTYR‑11Z，该菌种于2016年1月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 2016052，分类命名为骆驼刺欧文氏菌Erwinia alhag。本发明所述欧文氏菌新种Erwinia alhagi LTYR‑11Z具有产生植物生长激素吲哚乙酸，分泌铁载体，溶解难溶性无机磷酸盐等植物促生作用，且对植物病原真菌小麦根腐菌具有一定的抑制作用。本发明所述的欧文氏菌新种制成的活菌制剂可作为接种剂在干旱生境的农业生产中进行应用，促进农作物生长，提高农作物抗旱能力。
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公开(公告)号：CN104017753A
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201410193429.7
申请日：2014-05-09
Abstract: 本发明提供了一株可高效降解木质素的乙酸钙不动杆菌，其特征在于：乙酸钙不动杆菌AcinetobactercalcoaceticusLG-1，已在中国典型培养物保藏中心（CCTCC）登记保藏；保藏日期为2014年3月12日；编号为CCTCCM2014079。该菌对木质素具有高效降解作用，其可以在以木质素作为唯一碳源的木质素无机盐培养液中生长，且其生长曲线图显示该菌的生长效果明显高于作为阳性对照的红球菌和作为阴性对照的大肠杆菌，本菌株可应用于造纸，能源，环保等领域，利用其对碱性木质素的高效降解效率进而解决碱木质素在各行业中降解难度大的问题。
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