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公开(公告)号:CN114058641A
公开(公告)日:2022-02-18
申请号:CN202210046808.8
申请日:2022-01-17
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明涉及一种载体系统和应用及通过其降解目的蛋白的方法。载体系统包括含有目的基因sgRNA及Cas9的表达载体,含有目的基因和生长素诱导降解因子AID的融合表达载体,含有生长素受体—水稻F‑box转运抑制性响应蛋白1OsTIR1的表达载体,以及含有转座酶的表达载体;其中,含有目的基因sgRNA及Cas9的表达载体为分别含有目的基因sgRNA的表达载体和含有Cas9的表达载体,或同时含有目的基因sgRNA和Cas9的表达载体。用生长素处理稳定转染该载体系统的细胞,解决了传统AID系统敲入步骤繁琐、双等位基因插入效率低以及存在基础降解的问题。
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公开(公告)号:CN102757912A
公开(公告)日:2012-10-31
申请号:CN201210206250.1
申请日:2012-06-21
Applicant: 苏州大学
Abstract: 鼠伤寒沙门菌X3337lux及其在活体成像中的应用,该菌株已在国家知识产权局指定的保藏单位保藏,保藏日期为2012年3月13日,保藏单位名称:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号:CGMCC No.5894。鼠伤寒沙门菌Χ3337是毒力质粒消除后的菌株,可作为对照用于研究鼠伤寒沙门菌毒力质粒的功能。X3337lux是在其基础上构建的具有稳定生物发光性能的鼠伤寒沙门菌菌株。弥补了生物荧光的细菌检测需激发光源且在体内特异性低,背景高,难定量等缺陷。可广泛应用于体外细胞感染模型和体内实验动物模型的建立。为鼠伤寒沙门菌致病机制的深入研究,药物研究和筛选及相关疾病防治策略的研究等提供便利的工具。
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公开(公告)号:CN102757911A
公开(公告)日:2012-10-31
申请号:CN201210206246.5
申请日:2012-06-21
Applicant: 苏州大学
Abstract: 鼠伤寒沙门菌X3306lux及其在活体成像中的应用,该菌株已在国家知识产权局指定的保藏单位保藏,保藏日期为2012年3月13日,保藏单位名称:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号:CGMCCNo.5895。鼠伤寒沙门菌X3306是携带毒力质粒pStSR100的强毒株,可作为标准毒株,应用于鼠伤寒沙门菌致病机制的研究。X3306lux是在X3306基础上构建的具有稳定生物发光性能的菌株。经位点特异性重组,将管家基因E.colifrr启动子和Lux操纵子插入X3306染色体中稳定表达(同时插入位点不破坏基因组基因功能,对细菌无不利影响)。Lux操纵子在其上游连接的管家基因E.colifrr启动子的调控下,组成性表达荧光素酶和底物,无需外加筛选压力和底物维持细菌发光。
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公开(公告)号:CN114058641B
公开(公告)日:2022-04-01
申请号:CN202210046808.8
申请日:2022-01-17
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明涉及一种载体系统和应用及通过其降解目的蛋白的方法。载体系统包括含有目的基因sgRNA及Cas9的表达载体,含有目的基因和生长素诱导降解因子AID的融合表达载体,含有生长素受体—水稻F‑box转运抑制性响应蛋白1OsTIR1的表达载体,以及含有转座酶的表达载体;其中,含有目的基因sgRNA及Cas9的表达载体为分别含有目的基因sgRNA的表达载体和含有Cas9的表达载体,或同时含有目的基因sgRNA和Cas9的表达载体。用生长素处理稳定转染该载体系统的细胞,解决了传统AID系统敲入步骤繁琐、双等位基因插入效率低以及存在基础降解的问题。
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公开(公告)号:CN111944762A
公开(公告)日:2020-11-17
申请号:CN202010864444.5
申请日:2020-08-25
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N5/10 , C12N5/0786 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR-Cas9构建基因编辑巨噬细胞的方法及构建的基因编辑巨噬细胞,属于基因工程技术领域。本发明采用将Cas9质粒与sgRNA分两步电转的方法,一方面通过减少外源基因数量提高转染效率,另一方面构建成功的稳定表达Cas9的巨噬细胞可作为工具细胞进行其他基因的编辑,为后续巨噬细胞的基因编辑奠定基础。此外,本发明的sgRNA是在内含子上进行设计,可将整个外显子切除致使几百甚至上千个碱基丢失,用PCR扩增快速初筛,3h左右即可获得结果,在难以转染的巨噬细胞中大大提高了筛查效率。
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公开(公告)号:CN102757910A
公开(公告)日:2012-10-31
申请号:CN201210206197.5
申请日:2012-06-21
Applicant: 苏州大学
Abstract: 鼠伤寒沙门菌UF110lux及其在活体成像中的应用,该菌株已在国家知识产权局指定的保藏单位保藏,保藏日期为2012年3月13日,保藏单位名称:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号:CGMCCNo.5893。鼠伤寒沙门菌UF110是将毒力质粒上spv基因敲除的菌株,可作为对照用于研究鼠伤寒沙门菌毒力基因spv的功能。UF110lux是在其基础上构建的具有稳定生物发光性能的菌株。弥补了传统荧光标记的不足,结合利用活体成像仪器可实时动态地续监测鼠伤寒沙门菌在小鼠活体内的入侵、增殖及扩散情况。为鼠伤寒沙门菌致病机制的深入研究提供便利的工具。
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公开(公告)号:CN116622622A
公开(公告)日:2023-08-22
申请号:CN202310887969.4
申请日:2023-07-19
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N5/073 , C12N5/10 , C12N15/113 , C12N15/55
Abstract: 本发明公开了一种诱导胚胎干细胞定向分化为胚外内胚层干细胞的方法,属于生物技术领域。本发明首先确定了Gata6的内源调控序列,而后利用CRISPR激活技术激活内源性Gata6基因的表达,避免了在细胞中注入基因遗传物质,改变细胞的基因和遗传信息,提高了特异性和安全性。经验证,本发明方法可高效地将ES细胞定向分化为XEN细胞,操作简单,节约了时间、操作和经济成本。
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公开(公告)号:CN103352012A
公开(公告)日:2013-10-16
申请号:CN201310213265.5
申请日:2013-05-31
Applicant: 苏州大学
Abstract: 鼠伤寒沙门氏菌X3337/pRST98lux及其在活体成像中的应用,该菌株已在国家知识产权局指定的保藏单位保藏,保藏日期为2013年2月5日,保藏单位名称:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号:CGMCC No.7252。Lux操纵子组成性表达荧光素酶和底物,无需外加筛选压力和底物维持细菌发光,该接合突变株为构建细胞模型和动物模型,深入研究伤寒沙门菌毒力质粒的致病机制、相关药物研究和筛选及感染性疾病防治等提供了便利的工具。
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