公开(公告)号：CN114058641A

公开(公告)日：2022-02-18

申请号：CN202210046808.8

申请日：2022-01-17

Applicant: 苏州大学

Inventor： 叶颖 ,  李京生 ,  谢文燕 ,  张文胜

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N15/29 ,  C12N15/62 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及一种载体系统和应用及通过其降解目的蛋白的方法。载体系统包括含有目的基因sgRNA及Cas9的表达载体，含有目的基因和生长素诱导降解因子AID的融合表达载体，含有生长素受体—水稻F‑box转运抑制性响应蛋白1OsTIR1的表达载体，以及含有转座酶的表达载体；其中，含有目的基因sgRNA及Cas9的表达载体为分别含有目的基因sgRNA的表达载体和含有Cas9的表达载体，或同时含有目的基因sgRNA和Cas9的表达载体。用生长素处理稳定转染该载体系统的细胞，解决了传统AID系统敲入步骤繁琐、双等位基因插入效率低以及存在基础降解的问题。

公开(公告)号：CN114058641B

公开(公告)日：2022-04-01

申请号：CN202210046808.8

申请日：2022-01-17

Applicant: 苏州大学

Inventor： 叶颖 ,  李京生 ,  谢文燕 ,  张文胜

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N15/29 ,  C12N15/62 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及一种载体系统和应用及通过其降解目的蛋白的方法。载体系统包括含有目的基因sgRNA及Cas9的表达载体，含有目的基因和生长素诱导降解因子AID的融合表达载体，含有生长素受体—水稻F‑box转运抑制性响应蛋白1OsTIR1的表达载体，以及含有转座酶的表达载体；其中，含有目的基因sgRNA及Cas9的表达载体为分别含有目的基因sgRNA的表达载体和含有Cas9的表达载体，或同时含有目的基因sgRNA和Cas9的表达载体。用生长素处理稳定转染该载体系统的细胞，解决了传统AID系统敲入步骤繁琐、双等位基因插入效率低以及存在基础降解的问题。