一种快速判断低积累镉芸薹属植物的基因及方法

    公开(公告)号:CN107130036B

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN201710401730.6

    申请日:2017-05-31

    Abstract: 本发明公开了一种检测抑镉基因表达上调来快速筛选低积累镉芸薹属植物的方法。以低积累镉的芥菜型油菜为材料,对镉处理和对照的材料的根和叶的转录组进行测序分析,选取表达量在根和叶中同时上调2.00倍以上mRNA序列,分析这些序列对应基因的功能,从中筛选能抑制镉等重金属吸收和转运的基因(简称“抑镉基因”)。利用定量PCR分析这些基因表达量变化与镉处理浓度的相关性,确定了5个抑镉基因在所有处理组的根和叶中表达量都上调2.00倍以上。利用这5个基因的引物检测芸薹属植物在MS培养基中、镉浓度为5‑25mg·kg‑1的诱导下的根和叶中基因表达的变化,如果这5个抑镉基因在根和叶中的表达量比对照都上调2.00倍以上,则可以认为该芸薹属植物属于低积累镉的植物。

    一种快速克隆芥菜型油菜种皮基因TT2CDS序列的方法

    公开(公告)号:CN108359672A

    公开(公告)日:2018-08-03

    申请号:CN201711360127.4

    申请日:2017-12-18

    Abstract: 本发明涉及一种取代从油菜种皮中提取TT2基因CDS序列的方法,因为叶片中TT2基因的mRNA表达较低CDS序列无法克隆,种皮取材不便。TTG1转录因子能促进TT2基因表达,通过过表达TTG1,提高TT2表达水平,可以方便TT2基因CDS的克隆。首先把油菜TTG1基因转化到发根农杆菌A4中,再用转化的侵染液侵染油菜外植体,再进行共培养,继代培养和扩增培养得到转基因的毛状根,取1g新鲜的转基因毛状根,进行RNA提取、反转录,再进行PCR反应,进行大肠杆菌转化,送公司测序。就能克隆出TT2基因,从而达到快速克隆控制油菜种皮颜色基因TT2CDS的目的。

    利用产ABA的菌抑制芸薹属植物吸收镉的方法

    公开(公告)号:CN107980266A

    公开(公告)日:2018-05-04

    申请号:CN201711299844.0

    申请日:2017-12-09

    Abstract: 本发明公布了一种利用产ABA(Abscisic acid,脱落酸)的菌来抑制芸薹属植物吸收镉的方法,从而达到安全生产利用中轻度镉污染土壤的目的。该方法是从拟种植芸薹属植物的土壤中选择产ABA的土著菌,然后配制产ABA菌的混合肥料,将混合肥料施于常规的种植沟或种植坑中,播种30-50天内,向土壤中补加一次上述含产ABA菌的混合肥料,利用该方法可以减少植株中镉的吸收量,本发明可以用于中轻度镉污染土壤上芸薹属植物的安全种植。

    油菜种子发育早期种皮颜色快速鉴定的方法

    公开(公告)号:CN105510319A

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201510887008.9

    申请日:2015-12-07

    CPC classification number: G01N21/78

    Abstract: 本发明涉及一种在油菜种子发育早期快速鉴定种皮颜色的方法,利用化学染色法,加入与类黄酮特异结合的染料对黄黑籽油菜种皮进行染色,取授粉8天后油菜种子的种皮,放入含有甲醇、丙酮、三氟乙酸正丁醇、铁铵矾的酸性溶液的透明容器中,在常温下放置15-20分钟,然后煮沸15-30分钟,在冰上冷却20-25分钟。盛有黑籽种皮的容器中的溶液变为紫红色,而盛黄籽种皮的容器中的溶液没有紫红色产生,从而达到鉴定油菜种皮颜色的目的。

    一种以菜籽饼和银杏叶为原料的天然植物防腐剂、制备方法及用途

    公开(公告)号:CN103610209A

    公开(公告)日:2014-03-05

    申请号:CN201310565256.2

    申请日:2013-11-13

    CPC classification number: A23L3/3463

    Abstract: 本发明涉及以一种菜籽饼和银杏叶为原料的天然植物防腐剂及其制备方法。该天然植物防腐剂是菜籽饼和银杏叶的提取物,将菜籽饼和银杏叶烘干,按质量比为70-80份菜籽饼和20-30份银杏叶混匀,粉碎,过筛,然后放入提取容器中,采用超声波和微波双辅助法进行,提取条件为:以pH值为1.0-2.0、浓度为65-75%的乙醇为提取溶剂,固液比1:10-15,超声功率400-600W,40-50℃超声30-60min,再用400-600W微波功率下辐射30-60s。过滤浓缩后获得提取物。该提取物可以抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和霉菌等的生长和繁殖。本发明的防腐剂全部来自于天然植物,无毒副作用,且抑菌谱广,能够广泛作为食品和饲料领域的防腐剂。

    采用芥菜型油菜基因BAN和DFR共转化提高大肠杆菌中原花色素含量的方法

    公开(公告)号:CN102827849B

    公开(公告)日:2013-10-16

    申请号:CN201210295306.5

    申请日:2012-08-20

    Abstract: 本发明公开了一种采用芥菜型油菜基因BAN和DFR共转化提高大肠杆菌中原花色素含量的方法。本发明从芥菜型油菜紫叶芥种皮的cDNA中克隆花色素还原酶BAN基因和4-二氢黄酮醇还原酶DFR基因,构建含BAN和DFR基因的原核表达载体pET-BAN-DFR,将BAN和DFR基因同时导入DH5α大肠杆菌。转化菌株在LB液体培养基中,25-37℃,150-250rpm(转/分钟)培养6-14小时候后,再在含黑色大豆种皮提取物(0.5-1.0g/L)的LB液体培养基中,25-37℃,150-250rpm震荡培养36-54小时后,离心收集菌体,采用DMACA-HCl法测定大肠杆菌所含的原花色素的量。本发明获得的转基因大肠杆菌中原花色素的含量显著提高,最高达到非转化对照菌株的19.8倍。

    采用芥菜型油菜基因BAN和DFR共转化提高大肠杆菌中原花色素含量的方法

    公开(公告)号:CN102827849A

    公开(公告)日:2012-12-19

    申请号:CN201210295306.5

    申请日:2012-08-20

    Abstract: 本发明公开了一种采用芥菜型油菜基因BAN和DFR共转化提高大肠杆菌中原花色素含量的方法。本发明从芥菜型油菜紫叶芥种皮的cDNA中克隆花色素还原酶BAN基因和4-二氢黄酮醇还原酶DFR基因,构建含BAN和DFR基因的原核表达载体pET-BAN-DFR,将BAN和DFR基因同时导入DH5α大肠杆菌。转化菌株在LB液体培养基中,25-37℃,150-250rpm(转/分钟)培养6-14小时候后,再在含黑色大豆种皮提取物(0.5-1.0g/L)的LB液体培养基中,25-37℃,150-250rpm震荡培养36-54小时后,离心收集菌体,采用DMACA-HCl法测定大肠杆菌所含的原花色素的量。本发明获得的转基因大肠杆菌中原花色素的含量显著提高,最高达到非转化对照菌株的19.8倍。

    葡萄酒中原花色素的快速鉴定方法

    公开(公告)号:CN102305789A

    公开(公告)日:2012-01-04

    申请号:CN201110135402.9

    申请日:2011-05-24

    Inventor: 严明理 刘丽莉

    Abstract: 本发明涉及一种葡萄来源的葡萄酒中原花色素的快速鉴定方法,利用化学染色法,加入与原花色素特异结合的染料对葡萄酒进行染色,0.1-0.5%DMACA(p-dimethylaminocinnamaldehyde)的酸性-醇类溶液可以使含有原花色素的葡萄酒样品变为蓝色,而不含原花色素的样品则不产生蓝色,所以能简便、直观区分葡萄酒中原花色素的有无和含量的高低,可应用于检测葡萄酒的真假和葡萄酒中原花色素的含量。本发明方法使用试剂价格低廉,操作简单,效果明显,见效快。也能用于饮料中原花色素的检测。

    一种植物在锰尾矿渣上定居的方法

    公开(公告)号:CN102037845A

    公开(公告)日:2011-05-04

    申请号:CN201010526209.3

    申请日:2010-11-01

    Abstract: 本发明公布了一种植物在锰尾矿渣上定居的方法,从而达到植物修复改良锰尾矿渣污染土壤的的目的。将混合肥料A和混合肥料B按质量比例40-50:1-3施于在锰尾矿渣区打造的植物种植坑中。在种植坑中搭配栽种芥菜和野葛或者芥菜和博落回。利用该方法可在较短时间内使植物在锰尾矿渣上定居,并形成较密的植被,显著降低锰尾矿渣地pH值并增加其有机质和氮的含量。该方法具有操作简单、费用低、阻控锰尾矿的锰和其他有害金属移迁扩散效率好并能美化环境等优点。本技术可用于矿山退化生态系统植被重建和盐碱地区绿化等方面。

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