一种快速克隆芥菜型油菜种皮基因TT2CDS序列的方法

    公开(公告)号:CN108359672A

    公开(公告)日:2018-08-03

    申请号:CN201711360127.4

    申请日:2017-12-18

    Abstract: 本发明涉及一种取代从油菜种皮中提取TT2基因CDS序列的方法,因为叶片中TT2基因的mRNA表达较低CDS序列无法克隆,种皮取材不便。TTG1转录因子能促进TT2基因表达,通过过表达TTG1,提高TT2表达水平,可以方便TT2基因CDS的克隆。首先把油菜TTG1基因转化到发根农杆菌A4中,再用转化的侵染液侵染油菜外植体,再进行共培养,继代培养和扩增培养得到转基因的毛状根,取1g新鲜的转基因毛状根,进行RNA提取、反转录,再进行PCR反应,进行大肠杆菌转化,送公司测序。就能克隆出TT2基因,从而达到快速克隆控制油菜种皮颜色基因TT2CDS的目的。

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