公开(公告)号：CN106434750B

公开(公告)日：2019-06-07

申请号：CN201610850055.0

申请日：2016-09-26

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 王爱兵 ,  刘谭彬 ,  王乃东 ,  杨毅 ,  湛洋 ,  胡意 ,  杨凌宸 ,  刘伟 ,  雷红宇 ,  雷昕

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了靶向打靶载体及靶向整合外源基因至MYH9Intron2位点构建小鼠胚胎干细胞株的方法和应用。所述靶向打靶载体序列如SEQ ID NO.7所示，命名为mpNTKV‑LoxP MAI2L‑MAI2R载体。本发明提供了一个新的能实现高效、安全、靶向整合的位点序列，基于该位点构建的靶向插入外源基因的打靶载体，不仅可实现高效打靶，而且能够保证外源基因在小鼠胚胎干细胞中稳定表达而内源基因表达不受影响，从而为构建转基因细胞系以及小鼠搭建了一个好的平台。

公开(公告)号：CN106434750A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610850055.0

申请日：2016-09-26

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 王爱兵 ,  刘谭彬 ,  王乃东 ,  杨毅 ,  湛洋 ,  胡意 ,  杨凌宸 ,  刘伟 ,  雷红宇 ,  雷昕

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/66

CPC classification number: C12N15/8509 ,  C12N2800/107 ,  C12N2800/30

Abstract: 本发明公开了靶向打靶载体及靶向整合外源基因至MYH9Intron2位点构建小鼠胚胎干细胞株的方法和应用。所述靶向打靶载体序列如SEQ ID NO.7所示，命名为mpNTKV-LoxP MAI2L-MAI2R载体。本发明提供了一个新的能实现高效、安全、靶向整合的位点序列，基于该位点构建的靶向插入外源基因的打靶载体，不仅可实现高效打靶，而且能够保证外源基因在小鼠胚胎干细胞中稳定表达而内源基因表达不受影响，从而为构建转基因细胞系以及小鼠搭建了一个好的平台。