公开(公告)号：CN118325875A

公开(公告)日：2024-07-12

申请号：CN202410622429.8

申请日：2024-05-20

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 夏菠 ,  庞立 ,  易有金 ,  陈晓

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12P19/26 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明提供一种真菌源几丁质酶PoChi的异源表达方法，包括如下步骤：1.1目的基因的密码子优化及合成，得到重组质粒pGBTNH2‑PoChi；1.2表达质粒的转化；1.3阳性转化子的诱导表达；1.4几丁质酶PoChi的纯化。本发明属于酶工程技术领域，实现了草酸青霉来源的几丁质酶在原核表达系统中的高效异源表达和纯化，并提供了该异源表达方法得到的真菌源几丁质酶PoChi在制备几丁质降解产物中的应用，具有对几丁质的酶解效率高等优点。

公开(公告)号：CN118726331A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202411083810.8

申请日：2024-08-08

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 夏菠 ,  庞立 ,  陈晓

IPC: C12N9/96 ,  C12N9/42 ,  C12P19/26 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明提供一种利用低共熔溶剂提高几丁质酶催化活性的方法，包括如下步骤：将低共熔溶剂加入含几丁质酶和底物的酶促反应体系中；所述低共熔溶剂在所述反应体系中的体积百分含量为2.5％‑10％；所述低共熔溶剂选自ChCl‑THU、ChCl‑U和Bet‑G中的一种或多种。本发明属于酶工程技术领域，通过将特定低共熔溶剂以一定的浓度加入含几丁质酶和底物的酶促反应体系中，该低共熔溶剂与几丁质酶有良好的生物相容性，并能够提高几丁质酶的稳定性和催化活性。

公开(公告)号：CN118620870A

公开(公告)日：2024-09-10

申请号：CN202410816125.5

申请日：2024-06-24

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 夏菠 ,  庞立 ,  蒋立文 ,  陈晓

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明提供一种嵌合几丁质酶，其为嵌合几丁质酶PoChi‑FnIII‑ChBD，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；或为嵌合几丁质酶PoChi‑ChBD，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；或为嵌合几丁质酶ChBD‑PoChi，氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明属于酶工程技术领域，率先将细菌源几丁质酶的ChBDChiA1和/或FnⅢ结构域与PoChi进行融合得到嵌合几丁质酶ChBD‑PoChi、PoChi‑ChBD和PoChi‑FnIII‑ChBD，增强了对不溶性几丁质底物的结合亲和力，显著提高了对不溶性几丁质的水解活性。

公开(公告)号：CN118497173A

公开(公告)日：2024-08-16

申请号：CN202410735891.9

申请日：2024-06-07

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 夏菠 ,  蒋立文 ,  庞立 ,  陈晓

IPC: C12N9/42 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明提供一种利用曲拉通提高几丁质酶水解活性的方法，包括如下步骤：将曲拉通加入含几丁质酶和底物的酶促反应体系中；所述曲拉通在所述反应体系中的体积百分含量为1％‑5％；所述反应体系的温度为30‑45℃，pH为4.2‑4.8。本发明属于酶工程技术领域，本发明提供的方法通过添加一定浓度的曲拉通X‑100能够显著提高几丁质酶的活性，尤其地，曲拉通X‑100终浓度为2.5％时，促进效果最为显著。