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公开(公告)号：CN104404072B
公开(公告)日：2018-04-27
申请号：CN201410678673.2
申请日：2014-11-24
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种用标记基因预测外源基因表达量及筛选转基因生物的方法。采用分子生物学技术构建包含有标记基因和外源基因两个相邻且转录方向相同的表达框的转基因表达质粒；采用显微注射法将转基因质粒与辅助质粒一起导入到生物的基因组内，培育成外源基因能够稳定遗传和表达的转基因生物；根据转基因生物中标记基因表达量的信息预测外源基因表达量，并筛选获得该外源基因表达量对应的生物个体或品种。本发明可简单、快捷、省力地从大量的转基因生物中筛选出高效表达外源基因的转基因生物个体或品种，为建立高效的生物反应器提供了理想的筛选手段。
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公开(公告)号：CN105463022A
公开(公告)日：2016-04-06
申请号：CN201510697644.5
申请日：2015-10-23
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/866 , C07K14/435 , A01K67/04
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕丝腺生物反应器合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2的方法。先构建家蚕合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2的载体pBac[3xP3-DsRed]-MaSp2质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，利用piggyBac转座子的转座特性使红色荧光蛋白基因和黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，制成转基因家蚕，蚕蛾自交使黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2基因纯合，育成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2的转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕丝腺细胞特异地合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2，用于蜘蛛丝的开发利用，同时也可以用于提高蚕丝的机械性能。
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公开(公告)号：CN105400815A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510698099.1
申请日：2015-10-23
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕丝腺生物反应器合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1的方法。先构建家蚕合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1的载体pBac[3xP3-DsRed]-MaSp1质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，利用piggyBac转座子的转座特性使红色荧光蛋白基因和黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，制成转基因家蚕，蚕蛾自交使黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1基因纯合，育成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1的转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕丝腺细胞特异地合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1，用于蜘蛛丝的开发利用，同时也可以用于提高蚕丝的机械性能。
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公开(公告)号：CN104593413A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201410853601.7
申请日：2014-12-31
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/14 , A01K67/04 , C07K14/765
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕后部丝腺合成分泌人血清白蛋白的方法。先构建家蚕合成分泌人血清白蛋白的载体pBHSA质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，用piggyBac转座子使红色荧光蛋白基因和人血清白蛋白基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，制成转基因家蚕，自交使人血清白蛋白基因纯合，育成分泌人血清白蛋白的转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕后部丝腺细胞特异地合成分泌人血清白蛋白，改善人血清白蛋白生产工艺，简化提纯方法，降低生产成本，为提高人血清白蛋白的生产效率、降低生产成本奠定基础，保证人血清白蛋白制品的生物安全性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104651409B
公开(公告)日：2018-04-20
申请号：CN201510085682.5
申请日：2015-02-17
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种类转录激活子效应蛋白介导的高效转基因方法。采用分子生物学技术构建包含类转录激活子效应蛋白DNA序列和piggyBac转座酶DNA序列的辅助质粒，在体外转录成mRNA；采用显微注射法将该辅助质粒的mRNA与含有外源基因的piggyBac转座子质粒的DNA一起导入到动物的受精卵中，获得外源基因能够稳定遗传和表达的转基因动物；根据标志基因或基因的表达特征筛选出转基因阳性个体；本发明方法可以使piggyBac转座子在TALE‑PBase融合蛋白的作用下高效的插入宿主生物的基因组中，可显著地提高piggyBac转座子介导的转基因效率，为获得转基因动物以及插入诱变等研究提供帮助。
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公开(公告)号：CN104404072A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410678673.2
申请日：2014-11-24
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种用标记基因预测外源基因表达量及筛选转基因生物的方法。采用分子生物学技术构建包含有标记基因和外源基因两个相邻且转录方向相同的表达框的转基因表达质粒；采用显微注射法将转基因质粒与辅助质粒一起导入到生物的基因组内，培育成外源基因能够稳定遗传和表达的转基因生物；根据转基因生物中标记基因表达量的信息预测外源基因表达量，并筛选获得该外源基因表达量对应的生物个体或品种。本发明可简单、快捷、省力地从大量的转基因生物中筛选出高效表达外源基因的转基因生物个体或品种，为建立高效的生物反应器提供了理想的筛选手段。
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公开(公告)号：CN104651409A
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201510085682.5
申请日：2015-02-17
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种类转录激活子效应蛋白介导的高效转基因方法。采用分子生物学技术构建包含类转录激活子效应蛋白DNA序列和piggyBac转座酶DNA序列的辅助质粒，在体外转录成mRNA；采用显微注射法将该辅助质粒的mRNA与含有外源基因的piggyBac转座子质粒的DNA一起导入到动物的受精卵中，获得外源基因能够稳定遗传和表达的转基因动物；根据标志基因或基因的表达特征筛选出转基因阳性个体；本发明方法可以使piggyBac转座子在TALE-PBase融合蛋白的作用下高效的插入宿主生物的基因组中，可显著地提高piggyBac转座子介导的转基因效率，为获得转基因动物以及插入诱变等研究提供帮助。
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公开(公告)号：CN105400817A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510698879.6
申请日：2015-10-23
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/866 , C07K14/435 , A01K67/04
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕同时合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1和蛋白2的方法。具体是将能够合成、分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1和蛋白2的转基因家蚕品种杂交，育成杂交品种；另一方面进一步通过同蛾区阳性个体自交留种，选择出2个牵引丝蛋白基因都纯合的品种。本发明借助家蚕丝腺细胞特异地合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1和蛋白2转基因家蚕，利用杂交育种技术育成能够同时合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1和蛋白2的杂交品种和纯系品种，用于蜘蛛丝的开发利用，同时也可以用于提高蚕丝的机械性能。
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公开(公告)号：CN104846011A
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201510119160.2
申请日：2015-03-18
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕后部丝腺合成分泌蜂王浆主蛋白1的方法。先构建家蚕合成分泌蜂王浆主蛋白1的载体pBMRJP1质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，利用piggyBac转座子的转座特性使红色荧光蛋白基因和蜂王浆主蛋白1基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，制成转基因家蚕，自交使蜂王浆蛋白1基因纯合，育成分泌蜂王浆主蛋白1的转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕后部丝腺细胞特异地合成分泌蜂王浆主蛋白1，蜂王浆主蛋白1制品具有生物活性，开发了一种新型的蜂王浆主蛋白1生产工艺，简化提纯方法，降低生产成本，为大量生产蜂王浆主蛋白1奠定了基础。
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