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公开(公告)号：CN104651409A
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201510085682.5
申请日：2015-02-17
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种类转录激活子效应蛋白介导的高效转基因方法。采用分子生物学技术构建包含类转录激活子效应蛋白DNA序列和piggyBac转座酶DNA序列的辅助质粒，在体外转录成mRNA；采用显微注射法将该辅助质粒的mRNA与含有外源基因的piggyBac转座子质粒的DNA一起导入到动物的受精卵中，获得外源基因能够稳定遗传和表达的转基因动物；根据标志基因或基因的表达特征筛选出转基因阳性个体；本发明方法可以使piggyBac转座子在TALE-PBase融合蛋白的作用下高效的插入宿主生物的基因组中，可显著地提高piggyBac转座子介导的转基因效率，为获得转基因动物以及插入诱变等研究提供帮助。
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公开(公告)号：CN104651409B
公开(公告)日：2018-04-20
申请号：CN201510085682.5
申请日：2015-02-17
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种类转录激活子效应蛋白介导的高效转基因方法。采用分子生物学技术构建包含类转录激活子效应蛋白DNA序列和piggyBac转座酶DNA序列的辅助质粒，在体外转录成mRNA；采用显微注射法将该辅助质粒的mRNA与含有外源基因的piggyBac转座子质粒的DNA一起导入到动物的受精卵中，获得外源基因能够稳定遗传和表达的转基因动物；根据标志基因或基因的表达特征筛选出转基因阳性个体；本发明方法可以使piggyBac转座子在TALE‑PBase融合蛋白的作用下高效的插入宿主生物的基因组中，可显著地提高piggyBac转座子介导的转基因效率，为获得转基因动物以及插入诱变等研究提供帮助。
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公开(公告)号：CN104593413A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201410853601.7
申请日：2014-12-31
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/14 , A01K67/04 , C07K14/765
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕后部丝腺合成分泌人血清白蛋白的方法。先构建家蚕合成分泌人血清白蛋白的载体pBHSA质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，用piggyBac转座子使红色荧光蛋白基因和人血清白蛋白基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，制成转基因家蚕，自交使人血清白蛋白基因纯合，育成分泌人血清白蛋白的转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕后部丝腺细胞特异地合成分泌人血清白蛋白，改善人血清白蛋白生产工艺，简化提纯方法，降低生产成本，为提高人血清白蛋白的生产效率、降低生产成本奠定基础，保证人血清白蛋白制品的生物安全性。
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公开(公告)号：CN104846011A
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201510119160.2
申请日：2015-03-18
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕后部丝腺合成分泌蜂王浆主蛋白1的方法。先构建家蚕合成分泌蜂王浆主蛋白1的载体pBMRJP1质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，利用piggyBac转座子的转座特性使红色荧光蛋白基因和蜂王浆主蛋白1基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，制成转基因家蚕，自交使蜂王浆蛋白1基因纯合，育成分泌蜂王浆主蛋白1的转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕后部丝腺细胞特异地合成分泌蜂王浆主蛋白1，蜂王浆主蛋白1制品具有生物活性，开发了一种新型的蜂王浆主蛋白1生产工艺，简化提纯方法，降低生产成本，为大量生产蜂王浆主蛋白1奠定了基础。
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