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公开(公告)号：CN105907784B
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201610292120.2
申请日：2016-05-04
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种用于表达T4连接酶的家蚕后部丝腺生物反应器双启动子通用型质粒及其应用与方法。质粒以piggyBac转座子为基础并带有Amp抗性基因，包含有作为外源基因的T4连接酶基因和作为标记基因的绿色荧光EGFP基因的功能表达框，质粒用分子生物学方法构建，且DDDDK与丝素轻链基因polyA之间含有ApaI和NheI专一性的两个酶切位点，采用ApaI和NheI双酶切通用型质粒，与T4连接酶基因连接后，与辅助质粒共同注射到家蚕受精卵内，利用转座子特性使绿色荧光蛋白基因和T4连接酶基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，获得转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕丝腺细胞特异地合成分泌T4连接酶蛋白。
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公开(公告)号：CN105400817A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510698879.6
申请日：2015-10-23
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/866 , C07K14/435 , A01K67/04
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕同时合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1和蛋白2的方法。具体是将能够合成、分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1和蛋白2的转基因家蚕品种杂交，育成杂交品种；另一方面进一步通过同蛾区阳性个体自交留种，选择出2个牵引丝蛋白基因都纯合的品种。本发明借助家蚕丝腺细胞特异地合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1和蛋白2转基因家蚕，利用杂交育种技术育成能够同时合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1和蛋白2的杂交品种和纯系品种，用于蜘蛛丝的开发利用，同时也可以用于提高蚕丝的机械性能。
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公开(公告)号：CN105331632A
公开(公告)日：2016-02-17
申请号：CN201510747098.1
申请日：2015-11-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕后部丝腺合成分泌钙离子结合蛋白的方法。先构建家蚕合成分泌钙离子结合蛋白的载体pBCABP-EGFP质粒，再利用显微注射将质粒与能够提供piggyBac转座酶的TALE-PBase融合蛋白mRNA导入到家蚕受精卵内，用piggyBac转座子使绿色荧光蛋白基因和钙离子结合蛋白基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，制成转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用家蚕后部丝腺细胞特异的合成分泌钙离子结合蛋白，开发了一种新型的生产具有钙离子结合活性蚕丝的生产工艺，降低生产成本，并保证钙离子结合蛋白的活性。
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公开(公告)号：CN104846011A
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201510119160.2
申请日：2015-03-18
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕后部丝腺合成分泌蜂王浆主蛋白1的方法。先构建家蚕合成分泌蜂王浆主蛋白1的载体pBMRJP1质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，利用piggyBac转座子的转座特性使红色荧光蛋白基因和蜂王浆主蛋白1基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，制成转基因家蚕，自交使蜂王浆蛋白1基因纯合，育成分泌蜂王浆主蛋白1的转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕后部丝腺细胞特异地合成分泌蜂王浆主蛋白1，蜂王浆主蛋白1制品具有生物活性，开发了一种新型的蜂王浆主蛋白1生产工艺，简化提纯方法，降低生产成本，为大量生产蜂王浆主蛋白1奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102226202B
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：CN201110123584.8
申请日：2011-05-13
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种家蚕中部丝腺细胞合成分泌溶菌酶的方法。是先构建家蚕合成分泌溶菌酶的载体pBSer1hLYZ-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将这种质粒与能够提供转座酶的辅助质粒一起导入到家蚕受精卵内，依靠piggyBac转座子的转座特性，使绿色荧光蛋白基因和溶菌酶基因导入到家蚕基因组内，并得到稳定遗传和表达，从而创制成一种能够在家蚕中部丝腺细胞特异性合成分泌溶菌酶的转基因家蚕，并进一步将这种转基因家蚕与丝胶蚕杂交，将杂交后代再与丝胶蚕回交3-5代，最后再自交使溶菌酶基因纯合，育成分泌溶菌酶的转基因家蚕新品种，为提高溶菌酶的生产效率、降低生产成本奠定基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100376691C
公开(公告)日：2008-03-26
申请号：CN200610052821.5
申请日：2006-08-07
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种转基因昆虫荧光基因表达相对量无损伤测定方法。是通过荧光体视显微镜观察转基因昆虫个体，用数码相机或数码CCD摄影设备摄取图像，利用图像处理软件，将所得图像进行预处理，再将所摄取的RGB彩色图像转化为相应颜色分量的灰度图像，确定二值化分割图像的阈值和用于消除图像二值化后斑点的中值滤波的邻域大小，用matlab应用数学软件计算所得昆虫形体部分荧光值的平均值，作为转基因昆虫荧光基因表达量的相对数值。它可在不损伤昆虫、不需分子生物学或生化测试的情况下，通过荧光观察和数码照像，可获得转基因昆虫荧光基因表达相对量，达到定量地估量转基因效率、估量外源基因与标志基因结合构成的融合蛋白表达量的目的。
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公开(公告)号：CN1304995A
公开(公告)日：2001-07-25
申请号：CN01103275.8
申请日：2001-01-19
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开的是用家蚕(Bombyx mori L.)培育生产冬虫夏草的方法,利用我国丰富的家蚕资源,对冬虫夏草菌作理化生物学处理后,接种于家蚕体,再模拟天然环境,使冬虫夏草菌侵染寄生家蚕体并最后长出子座,培育出相似于天然的冬虫夏草。本发明培育生产冬虫夏草容易、成本低,不仅有利于合理保护和利用冬虫夏草这一我国稀有珍贵资源,满足国内外市场需求,而且能创造出巨大的社会效益和经济效益。
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公开(公告)号：CN113943360B
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202111202154.5
申请日：2021-10-15
Applicant: 浙江大学
Inventor： 钟伯雄
IPC: C07K14/435 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/65 , A01K67/033
Abstract: 本发明公开了一种提高蚕丝力学机械性能的水生生物蛋白分子及其应用方法。本方法采用单个或者多个藤壶黏性蛋白基因构建外源基因载体，利用分子生物学技术将藤壶黏性蛋白序列整合到家蚕基因组内，最终获得能够稳定遗传的复合丝性能优异的新型家蚕品种，利用新型家蚕品种生产复合丝。本发明发现了一种水生生物蛋白分子在提高蚕丝性能方面的用途，开发了新型的高性能复合丝。
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公开(公告)号：CN111500591B
公开(公告)日：2023-01-06
申请号：CN202010392626.7
申请日：2020-05-11
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种蜘蛛聚状腺丝蛋白基因序列的应用及其改良家蚕丝性能的方法。蜘蛛聚状腺丝蛋白基因为由络新妇蛛聚状腺丝1倍碱基重复单元以1‑8倍连续重复构成的基因序列，具有改良家蚕丝性能等应用；先构建家蚕合成分泌聚状腺丝蛋白的载体pBac‑ASG质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，用转座子使荧光蛋白基因和聚状腺丝蛋白基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，育成分泌蜘蛛聚状腺丝蛋白的转基因家蚕；本发明发现了一种蜘蛛聚状腺丝蛋白基因的用途，并开发了一种新型家蚕蜘蛛仿生丝的改良家蚕丝性能的生产方法，降低生产成本，显著提高了蚕丝的机械性能。
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公开(公告)号：CN111518831A
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN202010392618.2
申请日：2020-05-11
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种蜘蛛葡萄状腺丝蛋白基因序列的应用及其改良家蚕丝性能的方法。蜘蛛葡萄状腺丝蛋白基因为黑寡妇蜘蛛葡萄状腺丝或者园蛛葡萄状腺丝1倍碱基重复单元以1‑8倍连续重复构成的基因序列，具有改良家蚕丝性能等应用；先构建家蚕合成分泌葡萄状腺丝蛋白的载体pBac‑ACSP质粒，将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，用转座子使荧光蛋白基因和葡萄状腺丝蛋白基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，育成分泌蜘蛛葡萄状腺丝蛋白的转基因家蚕。本发明发现了一种蜘蛛葡萄状腺丝蛋白基因的用途，并开发了一种新型家蚕蜘蛛仿生丝的改良家蚕丝性能的生产方法，降低生产成本，显著提高了蚕丝的机械性能。
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