应用多重探针熔解曲线法检测脑炎病毒核酸试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN114752704A

    公开(公告)日:2022-07-15

    申请号:CN202210264083.X

    申请日:2022-03-17

    Abstract: 本发明提供了应用多重探针熔解曲线法检测脑炎病毒核酸试剂盒及方法,包括荧光PCR反应液、酶混合液、阳性对照品、阴性对照品,所述荧光PCR反应液中含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、六种脑炎病毒对应的上游引物、六种脑炎病毒对应的下游引物、六种脑炎病毒对应的荧光探针,所述六种脑炎病毒分别为肠道病毒、单纯疱疹病毒I型、单纯疱疹病毒II型、人巨细胞病毒、EB病毒、水痘带状疱疹病毒;所述上游引物的序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:16所示;所述下游引物的序列如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17所示;所述荧光探针的序列如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18所示。

    应用多重探针熔解曲线法检测脑炎病毒核酸试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN114752704B

    公开(公告)日:2023-09-22

    申请号:CN202210264083.X

    申请日:2022-03-17

    Abstract: 本发明提供了应用多重探针熔解曲线法检测脑炎病毒核酸试剂盒及方法,包括荧光PCR反应液、酶混合液、阳性对照品、阴性对照品,所述荧光PCR反应液中含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、六种脑炎病毒对应的上游引物、六种脑炎病毒对应的下游引物、六种脑炎病毒对应的荧光探针,所述六种脑炎病毒分别为肠道病毒、单纯疱疹病毒I型、单纯疱疹病毒II型、人巨细胞病毒、EB病毒、水痘带状疱疹病毒;所述上游引物的序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:16所示;所述下游引物的序列如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17所示;所述荧光探针的序列如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18所示。

    线粒体耳聋A1555G突变的荧光定量PCR检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN107287303A

    公开(公告)日:2017-10-24

    申请号:CN201710507125.7

    申请日:2017-06-28

    Applicant: 浙江大学

    CPC classification number: C12Q1/6858 C12Q2531/113 C12Q2561/101 C12Q2545/113

    Abstract: 本发明提供一种线粒体耳聋常见突变A1555G的荧光定量PCR检测试剂盒,包含定量PCR反应液、第一阳性对照品、第二阳性对照品、阴性对照品、说明书和盒体,其中定量PCR反应液含有PCR缓冲液、MgCl2、dNTPs、耐热DNA聚合酶、上游扩增引物、下游扩增引物、第一荧光探针和第二荧光探针。本发明提供的试剂盒,针对mtDNA第1555位点的A>G单碱基突变设计两条MGB探针,通过荧光定量PCR对耳聋相关性的线粒体第1555位核苷酸进行检测,明确该位点是否发生A>G突变,具有简便、快速、准确等优点,可应用于线粒体A1555G突变相关性耳聋的临床诊断和防治,也为A1555G突变导致的线粒体耳聋的预防和治疗提供依据。

    线粒体耳聋T12201C突变的荧光定量PCR检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN107287302A

    公开(公告)日:2017-10-24

    申请号:CN201710507096.4

    申请日:2017-06-28

    Applicant: 浙江大学

    CPC classification number: C12Q1/6858 C12Q2531/113 C12Q2561/101 C12Q2545/113

    Abstract: 本发明提供一种线粒体耳聋常见突变T12201C的荧光定量PCR检测试剂盒,包含定量PCR反应液、第一阳性对照品、第二阳性对照品、阴性对照品、说明书和盒体,其中定量PCR反应液含有PCR缓冲液、MgCl2、dNTPs、耐热DNA聚合酶、上游扩增引物、下游扩增引物、第一荧光探针和第二荧光探针。本发明提供的试剂盒,对mtDNA第12201位点的T>C单碱基突变设计两条MGB探针,通过荧光定量PCR对耳聋相关性的线粒体第12201位核苷酸进行检测,明确该位点是否发生T>C突变,具有简便、快速、准确等优点,可应用于线粒体T12201C突变相关性耳聋的临床诊断和防治,也为T12201C突变导致的线粒体耳聋的预防和治疗提供依据。

    革兰阳性菌实时荧光定量PCR检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103789426A

    公开(公告)日:2014-05-14

    申请号:CN201410027285.8

    申请日:2014-01-21

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供一种革兰阳性菌的实时荧光定量PCR检测试剂盒,由革兰阳性菌DNA抽提液、定量PCR反应液、标准品、阳性对照品、阴性对照品、说明书和盒体组成,其中定量PCR反应液含有PCR缓冲液、MgCl2、dNTPs、耐热DNA聚合酶、上游扩增引物、下游扩增引物和革兰阳性菌荧光探针。本发明以革兰阳性菌16SrRNA基因为靶基因开发的实时荧光定量PCR试剂盒,能简便、快速、通用检测所有革兰阳性菌,并能对检测结果阳性的革兰阳性菌进行准确定量,提高了革兰阳性菌鉴定检测的通用性和敏感性,可为临床所有革兰阳性菌感染的早期诊断提供依据。

    人巨细胞病毒UL54基因的siRNA序列及应用

    公开(公告)号:CN101333526A

    公开(公告)日:2008-12-31

    申请号:CN200810063309.X

    申请日:2008-08-01

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供一种人巨细胞病毒UL54基因的siRNA的cDNA序列,其核苷酸序列是:5’-CTCGATGAAGTCAAGAAGT-3’。本发明根据siRNA设计原则,选择的siRNA其cDNA序列的GC含量为42.1%,对应UL54 mRNA中3058-3076核苷酸位点,构建针对HCMV UL54(DNA多聚酶)基因的siRNA真核表达载体,转化大肠杆菌后提取质粒,分别转染AD293细胞和MRC-5细胞,最终筛选到1个能有效抑制UL54基因表达的siRNA序列,可在制备治疗人巨细胞病毒感染的药物中的应用。

    细菌革兰双检实时荧光定量PCR检测试剂盒及用途

    公开(公告)号:CN101200765A

    公开(公告)日:2008-06-18

    申请号:CN200710157185.7

    申请日:2007-11-27

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供一种革兰双检实时荧光定量PCR检测试剂盒,由定量PCR反应液1、革兰阳性标准品2、革兰阴性标准品3、阳性对照品4、阴性对照品5、细菌DNA抽提裂解液6、盒体8组成。盒体8设有容器孔,分别放置PCR反应液管、标准品、对照品、细菌DNA抽提裂解液。本发明试剂盒设计合理,运用实时荧光定量PCR技术,采用细菌通用引物和革兰阴、阳性双特异荧光探针,通过实时荧光定量,不仅进行细菌革兰阴、阳性菌分型,而且对检测的阴、阳性菌进行实时准确定量,可在检测细菌革兰阴、阳性菌DNA中应用。

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