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公开(公告)号：CN101709268B
公开(公告)日：2012-12-12
申请号：CN200910227839.8
申请日：2009-12-23
Applicant: 河北科技大学
Abstract: 本发明涉及一种用于生物工程、生物技术领域以实现对菌种高通量筛选的菌株培养方法，尤其是一种丝状菌高通量筛选的悬浮培养方法。该方法包括丝状菌选取、获得菌落、设置多孔板培养环境及悬浮培养等步骤，通过使菌落悬浮在液体培养基表面进行静止培养的简单方式，解决微型化培养的供氧难题，实现了丝状菌的高通量培养，配合相应的高通量检测技术，实现了高通量筛选，并且还使菌株的培养过程和孢子形成过程合二为一，进一步缩短菌种选育的流程，达到了高产菌株高通量筛选的目的。其操作简单，效率较高。
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公开(公告)号：CN101709268A
公开(公告)日：2010-05-19
申请号：CN200910227839.8
申请日：2009-12-23
Applicant: 河北科技大学
Abstract: 本发明涉及一种用于生物工程、生物技术领域以实现对菌种高通量筛选的菌株培养方法，尤其是一种丝状菌高通量筛选的悬浮培养方法。该方法包括丝状菌选取、获得菌落、设置多孔板培养环境及悬浮培养等步骤，通过使菌落悬浮在液体培养基表面进行静止培养的简单方式，解决微型化培养的供氧难题，实现了丝状菌的高通量培养，配合相应的高通量检测技术，实现了高通量筛选，并且还使菌株的培养过程和孢子形成过程合二为一，进一步缩短菌种选育的流程，达到了高产菌株高通量筛选的目的。其操作简单，效率较高。
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公开(公告)号：CN103146694B
公开(公告)日：2015-11-25
申请号：CN201310063233.1
申请日：2013-02-28
Applicant: 河北科技大学
Abstract: 本发明公开了在大肠杆菌构建5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的基因及其构建方法，通过分析5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的限速步骤、中间体供给及产物分泌等问题，克隆Rhodobacter sphaeroides来源的ALA合成酶基因（hemA）、Propionibacterium shermanil来源的辅酶A转移酶基因（Cat）以及Escherichia coli来源的ALA分泌基因（YBi），借助pETDuet-1共表达载体，共表达了合成5-氨基乙酰丙酸的hemA、生成5-氨基乙酰丙酸合成的中间体琥珀酸COA的Cat和促进5-氨基乙酰丙酸的分泌的Ybi，三个基因的共表达加强了5-氨基乙酰丙酸的生物合成，通过本发明所制备的具有C4生物途径的基因，提高了Escherichia coli的5-氨基乙酰丙酸产量，分泌到细胞外的ALA达到1124 mg/L。
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公开(公告)号：CN118703472A
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202410709806.1
申请日：2024-06-03
Applicant: 河北科技大学
Abstract: 本发明属于分子生物技术领域，具体公开了一种Ago蛋白在真核细胞靶向基因编辑中的应用及靶向基因编辑方法。本发明通过挖掘Ago蛋白，发现了7种新的来自原核生物的pAgo蛋白和4种来自真核生物的eAgo蛋白可实现对真核细胞靶向基因编辑。同时基于上述Ago蛋白，提供了一种既不依赖于蛋白质结构域编程、又不依赖于向导元件编程的可在真核细胞多个靶向基因区域进行基因编辑的方法。与现有技术相比，本发明提供的真核细胞靶向基因编辑方法更便利、更高效、更加多样化、精准度更高、潜在应用前景更广泛。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103146694A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310063233.1
申请日：2013-02-28
Applicant: 河北科技大学
Abstract: 本发明公开了在大肠杆菌构建5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的基因及其构建方法，通过分析5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的限速步骤、中间体供给及产物分泌等问题，克隆Rhodobactersphaeroides来源的ALA合成酶基因（hemA）、Propionibacteriumshermanil来源的辅酶A转移酶基因（Cat）以及Escherichiacoli来源的ALA分泌基因（YBi），借助pETDuet-1共表达载体，共表达了合成5-氨基乙酰丙酸的hemA、生成5-氨基乙酰丙酸合成的中间体琥珀酸COA的Cat和促进5-氨基乙酰丙酸的分泌的Ybi，三个基因的共表达加强了5-氨基乙酰丙酸的生物合成，通过本发明所制备的具有C4生物途径的基因，提高了Escherichiacoli的5-氨基乙酰丙酸产量，分泌到细胞外的ALA达到1124mg/L。
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公开(公告)号：CN118599916A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410800865.X
申请日：2024-06-20
Applicant: 河北科技大学
Abstract: 本发明属于分子生物技术领域，具体公开了一种自体基因表达质粒在真核细胞靶向基因编辑中的应用及靶向基因编辑方法。本发明通过向宿主细胞中导入自体基因表达质粒，激发宿主细胞的高效DNA重组，提供一种真核细胞靶向基因编辑技术。同时基于自体基因表达质粒，结合同源重组片段，提供了一种既不依赖于蛋白质结构域编程、又不依赖于向导元件编程的可在真核细胞多个靶向基因区域进行基因编辑的方法。与现有技术相比，本发明提供的真核细胞靶向基因编辑方法更便利、更高效、更加多样化、精准度更高、潜在应用前景更广泛。
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公开(公告)号：CN113136382B
公开(公告)日：2023-01-31
申请号：CN202010060152.6
申请日：2020-01-19
Applicant: 河北科技大学
Abstract: 本发明提供了一种基于CRISPRi调控的利用谷氨酸棒状杆菌合成乙醛酸的方法，该方法包括通过dCas9表达盒基因置换谷氨酸棒状杆菌的乙醛脱氢酶编码基因，通过异柠檬酸脱氢酶编码基因与苹果酸合成酶编码基因的sgRNA转录单元置换谷氨酸棒状杆菌的乳酸脱氢酶编码基因，并过表达谷氨酸棒状杆菌的异柠檬酸裂合酶编码基因，得到谷氨酸棒状杆菌工程菌株，且培养所述工程菌株发酵合成乙醛酸。本发明以谷氨酸棒状杆菌为出发菌株，敲除了其支流代谢关键酶乳酸脱氢酶编码基因和乙醛脱氢酶编码基因，建立了CRISPRi调控体系，利用异柠檬酸脱氢酶编码基因和苹果酸合成酶编码基因表达水平下调，同时过表达异柠檬酸裂合酶编码基因，建立了利用谷氨酸棒杆菌生物合成乙醛酸的方法。
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公开(公告)号：CN113136382A
公开(公告)日：2021-07-20
申请号：CN202010060152.6
申请日：2020-01-19
Applicant: 河北科技大学
Abstract: 本发明提供了一种基于CRISPRi调控的利用谷氨酸棒状杆菌合成乙醛酸的方法，该方法包括通过dCas9表达盒基因置换谷氨酸棒状杆菌的乙醛脱氢酶编码基因，通过异柠檬酸脱氢酶编码基因与苹果酸合成酶编码基因的sgRNA转录单元置换谷氨酸棒状杆菌的乳酸脱氢酶编码基因，并过表达谷氨酸棒状杆菌的异柠檬酸裂合酶编码基因，得到谷氨酸棒状杆菌工程菌株，且培养所述工程菌株发酵合成乙醛酸。本发明以谷氨酸棒状杆菌为出发菌株，敲除了其支流代谢关键酶乳酸脱氢酶编码基因和乙醛脱氢酶编码基因，建立了CRISPRi调控体系，利用异柠檬酸脱氢酶编码基因和苹果酸合成酶编码基因表达水平下调，同时过表达异柠檬酸裂合酶编码基因，建立了利用谷氨酸棒杆菌生物合成乙醛酸的方法。
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公开(公告)号：CN101781633A
公开(公告)日：2010-07-21
申请号：CN200910227840.0
申请日：2009-12-23
Applicant: 河北科技大学
Abstract: 本发明涉及一种菌种，同时涉及一种利用该菌种制备β-糖苷酶TtβGLY的方法，以及利用β-糖苷酶TtβGLY制备一种含低聚糖的低乳糖乳的制备方法。大肠埃希氏菌(Escherichia coli)TTBGLYWT CGMCCNo.3078，该制备底乳糖乳的方法方法包括常规的低乳糖乳的制备方法，即将生鲜乳加入酶进行水解，超高温杀菌后，灌装得成品，所述的酶为β-糖苷酶TtβGLY该酶是由基因工程株大肠埃希氏菌TTBGLYWT经发酵、提取制得。采用上述技术方案，能够在降低牛奶中乳糖含量的同时，合成大量的低聚半乳糖，其中，乳糖的水解率最高可达95.24％，低聚半乳糖占牛乳中糖分最高可达37.13％。
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