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公开(公告)号：CN113373119A
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202110628837.0
申请日：2021-06-02
Applicant: 江西农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/55 , C12N15/113 , C12N15/34 , A61K39/295 , A61K39/12 , A61K39/245 , A61P31/20 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达非洲猪瘟病毒三基因缺失重组伪狂犬病毒毒株、构建方法及其应用，属于生物医药技术领域，本发明利用CRISPR/Cas9技术快速编辑PRV病毒株基因组，将PRV三个非必需毒力基因TK、gI和gE基因删除，再利用同源重组修复，在TK和gI/gE基因的位置分别定点插入ASFV的CD2v和p72，或，p54和p30的蛋白表达盒。本发明无需利用和去除筛选标记，同时对三个基因进行编辑并插入两个外源基因，方法简洁、快速、高效，所构建的重组毒株，为预防PRV和ASFV的感染提供了一种疫苗候选毒株，所建立的方法为新型疫苗的研发提供了新的方法及思路。
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公开(公告)号：CN117106736B
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202311385914.X
申请日：2023-10-25
Applicant: 江西农业大学
Abstract: 本发明公开了利用CBE构建三基因缺失PRV毒株的方法和应用，涉及生物技术领域，选择PRV病毒中gE、TK、gI三基因作为靶标位点，设计sgRNA序列，根据sgRNA上下游序列分别合成单链寡核苷酸，然后退火获得带粘性末端的双链DNA片段，将载体经限制性内切酶酶切后回收片段，再与带粘性末端的双链DNA片段连接，获得连接产物；将连接产物转化至感受态细胞中，涂板筛选培养，挑阳性菌扩大培养，对阳性菌液抽提质粒；将质粒转染，对通过转染获得的病毒进行蚀斑纯化，每一轮均通过PCR扩增与测序的方法进行验证；纯化得到单克隆毒株；本发明方法效率高，对病毒基因的改变小，不引起病毒基因组出现大的结构变异，成本低。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117126818B
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202311385572.1
申请日：2023-10-25
Applicant: 江西农业大学
Abstract: 少。本发明公开了利用ABE构建gE基因缺失PRV毒株的方法和应用，涉及生物技术领域，选择PRV病毒中gE基因的起始密码子作为靶标位点，设计sgRNA序列，根据sgRNA序列分别合成单链寡核苷酸，将单链寡核苷酸退火获得带粘性末端的双链DNA片段，将载体经限制性内切酶酶切后回收片段，再与带粘性末端的双链DNA片段连接，获得连接产物，再转化至感受态细胞中，涂板筛选培养，挑阳性菌扩大培养，对阳性菌液抽提质粒；将质粒转染，转染24h后，吸取病毒液，离心收集上清
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公开(公告)号：CN117126818A
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202311385572.1
申请日：2023-10-25
Applicant: 江西农业大学
Abstract: 本发明公开了利用ABE构建gE基因缺失PRV毒株的方法和应用，涉及生物技术领域，选择PRV病毒中gE基因的起始密码子作为靶标位点，设计sgRNA序列，根据sgRNA序列分别合成单链寡核苷酸，将单链寡核苷酸退火获得带粘性末端的双链DNA片段，将载体经限制性内切酶酶切后回收片段，再与带粘性末端的双链DNA片段连接，获得连接产物，再转化至感受态细胞中，涂板筛选培养，挑阳性菌扩大培养，对阳性菌液抽提质粒；将质粒转染，转染24h后，吸取病毒液，离心收集上清液。本发明的PRV毒株不存在结构变异，仅是修改少量ATG的中A或T的碱基，就能够实现gE表达的终止，而且该序列潜在的调控作用受到的影响最少。
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公开(公告)号：CN117106736A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202311385914.X
申请日：2023-10-25
Applicant: 江西农业大学
Abstract: 本发明公开了利用CBE构建三基因缺失PRV毒株的方法和应用，涉及生物技术领域，选择PRV病毒中gE、TK、gI三基因作为靶标位点，设计sgRNA序列，根据sgRNA上下游序列分别合成单链寡核苷酸，然后退火获得带粘性末端的双链DNA片段，将载体经限制性内切酶酶切后回收片段，再与带粘性末端的双链DNA片段连接，获得连接产物；将连接产物转化至感受态细胞中，涂板筛选培养，挑阳性菌扩大培养，对阳性菌液抽提质粒；将质粒转染，对通过转染获得的病毒进行蚀斑纯化，每一轮均通过PCR扩增与测序的方法进行验证；纯化得到单克隆毒株；本发明方法效率高，对病毒基因的改变小，不引起病毒基因组出现大的结构变异，成本低。
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公开(公告)号：CN213736230U
公开(公告)日：2021-07-20
申请号：CN202021344368.7
申请日：2020-07-10
Applicant: 江西农业大学
Abstract: 本实用新型具体涉及一种兽医用血液采样保温装置，包括保温箱体，所述保温箱体顶端一侧端通过设有的合页活动连接有保温箱盖所述保温箱体内部所设的保温腔内部对应所设滑槽水平设有采血试管固定顶架，本实用新型使用时通过保温箱盖上设置压紧缓冲弹簧、缓冲压板、定位柱、采血试管橡胶压板之间配合使用，能够防止对采血试管中的样本在搬运过程中出现晃动导致采血试管撞击破损的现象出现，通过采血试管固定顶架与滑杆、缓冲弹簧之间的配合使用，能够实现将保温箱盖打开时缓冲弹簧的弹力带动采血试管固定顶架向上回弹，把采血试管样本升至保温箱体上端，便于检验人员拿取采血试管样本对其进行化验，提高检验的工作效率。
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公开(公告)号：CN213642298U
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN202020318682.1
申请日：2020-03-16
Applicant: 江西农业大学
Abstract: 本实用新型公开了一种兽医用动物养殖场所消毒装置，包括底板，其特征是：所述底板上侧一端固定连接把手下端，所述底板上侧固定连接箱体下侧，所述底板上侧一角固定连接液泵下侧，所述底板上侧另一端固定连接矩形框下端，所述液泵入液端固定连通所述箱体一侧下部，所述箱体上侧一端设有入水口，本实用新型涉及消毒装置领域，具体地讲，涉及一种兽医用动物养殖场所消毒装置。本装置可以实现通过矩形板调节水管的高度，可根据养殖场的地形调节水管至适宜高度。
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