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公开(公告)号：CN112342214B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202011253224.5
申请日：2020-11-11
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/70
Abstract: 本发明提供一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法，通过设计CRISPR序列，制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接，再通过体外转录方法制备sgRNA，将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵，以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列，特异性强且敲除效率高，敲除流程简单快捷，为后续解析斑点叉尾鮰zbtb38基因功能提供动物材料。
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公开(公告)号：CN112335581A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN202011161332.X
申请日：2020-10-27
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明公开了一种用于斑点叉尾鮰基因敲除和过表达研究的受精卵及其制备方法，该方法包括亲鱼培育、强化促熟培育、亲鱼选择、雌性亲鱼的催产、精子溶液制备、卵子收集、人工授精，通过该方法制备的受精卵经显微注射后，孵化率超过80％。本发明还提供了促进斑点叉尾鮰雌性亲鱼排卵的催产剂及其剂量，注射催产剂后可促进雌性亲鱼产卵并可实现人工取卵。根据本发明制备的斑点叉尾鮰受精卵可以保证其同步的发育，满足基因敲除、过表达等研究需要。
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公开(公告)号：CN109161603A
公开(公告)日：2019-01-08
申请号：CN201811283757.0
申请日：2018-10-31
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了斑点叉尾鮰性别连锁的微卫星标记引物及遗传性别鉴定方法。本发明根据获得的斑点叉尾鮰性别连锁的微卫星标记引物及雄性特异等位基因序列，创建了斑点叉尾鮰遗传性别的PCR鉴定方法。本发明首次筛选到斑点叉尾鮰性别连锁的微卫星标记及雄性特异等位基因，建立了斑点叉尾鮰遗传性别鉴定的PCR技术。本发明具有高效、准确和稳定的特点，在斑点叉尾鮰性别控制和单性苗种生产中具有重要应用价值，同时在克隆斑点叉尾鮰性别决定基因及性别分化机制研究中也具有重要应用前景。
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公开(公告)号：CN108739537A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810575548.7
申请日：2018-06-06
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/10
CPC classification number: A01K61/10
Abstract: 本发明公开了一种粉白体色斑点叉尾鮰家系制种方法，步骤包括：1)利用设计的特异性引物PCR扩增筛选所收集的核心育种群体亲本，根据电泳图谱获得仍是灰黑体色的隐性突变亲本；2)将筛选出的性腺成熟的雌、雄灰黑体色的隐性突变亲本配对繁殖构建F1代家系个体，得到的F1代个体出现体色分离，粉白体色个体约占25％；3)将得到的F1代粉白体色个体按照家系分开独立饲养在池塘中，培育4年至性腺成熟；4)从F1代家系挑选生长最快的粉白个体双列杂交，构建F2代全同胞家系，所获得的F2代个体全部为粉白体色。本发明所述方法为开展粉白体色斑点叉尾鮰家系选育奠定了基础，为粉白体色斑点叉尾鮰的品种选育提供了很好的材料。
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公开(公告)号：CN111304338B
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202010177166.6
申请日：2020-03-13
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于鱼类遗传育种技术领域，涉及SNP分子标记技术领域。本发明公开了一种与斑点叉尾鮰性别连锁的SNP分子标记及遗传性别鉴定方法，包括斑点叉尾鮰性别连锁的SNP标记的筛选、验证、雄性特异DNA序列的克隆、序列分析、特异引物设计以及遗传性别鉴定的PCR方法；根据获得的斑点叉尾鮰性别连锁的SNP标记引物及雄性特异DNA序列，创建了斑点叉尾鮰遗传性别的PCR鉴定方法。本发明首次筛选到斑点叉尾鮰性别连锁的SNP标记及雄性特异序列，建立了基于PCR和Sanger测序技术的斑点叉尾鮰遗传性别鉴定方法。本发明具有高效、准确和稳定的特点，在斑点叉尾鮰单性苗种培育等方面具有重要应用价值，同时在定位性别决定基因及性别决定机制研究中也具有重要应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108739537B
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN201810575548.7
申请日：2018-06-06
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明公开了一种粉白体色斑点叉尾鮰家系制种方法，步骤包括：1)利用设计的特异性引物PCR扩增筛选所收集的核心育种群体亲本，根据电泳图谱获得仍是灰黑体色的隐性突变亲本；2)将筛选出的性腺成熟的雌、雄灰黑体色的隐性突变亲本配对繁殖构建F1代家系个体，得到的F1代个体出现体色分离，粉白体色个体约占25％；3)将得到的F1代粉白体色个体按照家系分开独立饲养在池塘中，培育4年至性腺成熟；4)从F1代家系挑选生长最快的粉白个体双列杂交，构建F2代全同胞家系，所获得的F2代个体全部为粉白体色。本发明所述方法为开展粉白体色斑点叉尾鮰家系选育奠定了基础，为粉白体色斑点叉尾鮰的品种选育提供了很好的材料。
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公开(公告)号：CN105969882A
公开(公告)日：2016-09-28
申请号：CN201610466570.9
申请日：2016-06-23
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
Abstract: 本发明专利属于水产动物分子标记辅助育种领域，具体涉及一种与斑点叉尾鮰快速生长相关的单倍型SNP分子标记及其检测方法和应用。所述的SNP分子标记从斑点叉尾鮰PRL基因克隆得到，该分子标记的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。本发明还公布了上述分子标记在斑点叉尾鮰生长性状分子检测中的应用。筛选基因型分别为AA、CC、TT、CC、AA的个体，即单倍型组合为H3/H3(ACTCA/ACTCA)的个体作为选育亲本。本发明的方法，操作简单、检测速度快，大大降低了斑点叉尾鮰亲本筛选的盲目性，可以快速获得生长速度快且遗传稳定的斑点叉尾鮰亲本。
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公开(公告)号：CN104419758B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201310398110.3
申请日：2013-09-05
Applicant: 江苏省淡水水产研究所 , 中国水产科学研究院黄海水产研究所
Abstract: 本项发明属于遗传学领域，涉及一种斑点叉尾鮰与长鳍叉尾鮰的分子遗传鉴别方法。一种斑点叉尾鮰与长鳍叉尾鮰的分子遗传鉴别方法，包含以下步骤：分别提取待鉴定的斑点叉尾鮰与长鳍叉尾鮰基因组DNA；PCR扩增斑点叉尾鮰与长鳍叉尾鮰的生长抑制素基因；进行测序并比对；MSTN基因从第83位点开始的AGC微卫星重复六次的为斑点叉尾鮰，若该微卫星重复七次的为长鳍叉尾鮰。该方法可以快速、简便、准确、有效地鉴别斑点叉尾鮰和长鳍叉尾鮰，结果稳定性好，重复率高，填补了目前国内分子生物学标准鉴别斑点叉尾鮰和长鳍叉尾鮰的空白。
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公开(公告)号：CN103430891A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310400035.X
申请日：2013-09-05
Applicant: 江苏省淡水水产研究所 , 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC: A01K61/00
CPC classification number: Y02A40/81
Abstract: 一种斑点叉尾鮰良种繁育方法，它包括亲鱼选择与培育、鱼苗繁殖、鱼卵孵化和出苗四个步骤，其特征是所述的亲鱼选择与培育步骤为：（一）母亲本制备：以2001年从美国密西西比引入我国养殖美国原始群体建立自交家系10个以上，筛选率为10~20%；（二）父亲本制备：以2003年从阿肯色引入我国养殖美国原始群体建立自交家系10个以上，筛选率为10~20%；（三）良种生产亲鱼选择：选择母亲本和父亲本中的4~10龄个体，按照1~2：1比例搭配放养于亲本培育池进行亲本培育；（四）亲本培育和（五）产卵巢设置。本发明能明显提高商品鱼的个体重量。
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公开(公告)号：CN101480171A
公开(公告)日：2009-07-15
申请号：CN200910024581.1
申请日：2009-02-20
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/00
CPC classification number: Y02A40/81
Abstract: 一种斑点叉尾鮰定向交配繁殖方法，其特征是它包括的主要步骤一是将其置于昏暗的交配器中并控制光照度及噪声，二是将所产的卵置于单独的孵化槽中进行孵化，即可得到理想的斑点叉尾鮰鱼苗。本发明有利于提高后代品质，防止近亲繁殖退化现象的发生。
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