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公开(公告)号：CN112342215B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202011255641.3
申请日：2020-11-11
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/89 , C12N15/55 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列及其筛选方法，通过设计CRISPR序列，制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接，再通过体外转录方法制备sgRNA，将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵，以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列，特异性强且敲除效率高，敲除流程简单快捷，为后续解析斑点叉尾鮰mstna基因功能提供动物材料。
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公开(公告)号：CN113373244A
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202110796789.6
申请日：2021-07-14
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于SNP位点特异性引物延伸反应快速检测斑点叉尾鮰遗传性别的方法，该方法设计扩增斑点叉尾鮰性别连锁SNP位点的外围引物、特异性延伸引物(ASE)和DNA探针(ASE‑DP)，利用所述待测斑点叉尾鮰的DNA、引物和DNA探针进行延伸反应和核酸杂交，再根据快速核酸检测试纸条显色结果判断待测样本的遗传性别。本发明的准确率达100％，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN112342215A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN202011255641.3
申请日：2020-11-11
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/89 , C12N15/55 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列及其筛选方法，通过设计CRISPR序列，制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接，再通过体外转录方法制备sgRNA，将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵，以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列，特异性强且敲除效率高，敲除流程简单快捷，为后续解析斑点叉尾鮰mstna基因功能提供动物材料。
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公开(公告)号：CN112342214A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN202011253224.5
申请日：2020-11-11
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/70
Abstract: 本发明提供一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法，通过设计CRISPR序列，制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接，再通过体外转录方法制备sgRNA，将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵，以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列，特异性强且敲除效率高，敲除流程简单快捷，为后续解析斑点叉尾鮰zbtb38基因功能提供动物材料。
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公开(公告)号：CN117678538A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311678193.1
申请日：2023-12-08
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明提供一种斑点叉尾鮰耐盐碱新品系选育方法，以快速生长“江丰2号”斑点叉尾鮰选育系作为基础群体，分别在卵黄囊苗、10日龄、30日龄阶段进行胁迫选育，在苗种阶段淘汰了不耐盐碱个体，通过耐盐碱选育，快速聚合生长速度快、耐盐能力强性状，育成生长速度快、耐盐能力强的新品系，适合在具有一定盐度内陆水域和沿海滩涂水域中养殖生产。本发明与用成鱼阶段胁迫相比，提高了选育效率，大幅度降低了选育成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113475433A
公开(公告)日：2021-10-08
申请号：CN202110924437.4
申请日：2021-08-12
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明公开了一种斑点叉尾鮰伪雌鱼培育方法，其包括以下步骤，（1）斑点叉尾鮰卵黄囊苗完全消耗卵黄囊长成仔鱼时，开始投喂经雌性激素处理的丰年虫，投喂3天或投喂至仔鱼开口；（2）继续投喂经雌性激素处理的饲料至30日龄；（3）继续投喂常规饲料至60日龄以上，该方法创新的研究了受精卵孵化、伪雌鱼培育饵料的制作、鱼苗饲养与管理、性逆转评估、伪雌鱼筛选等培育环节，实现雄性遗传性别斑点叉尾鮰100%逆转成伪雌鱼，即遗传性别为雄性。
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公开(公告)号：CN117904119A
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202311649885.3
申请日：2023-12-05
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
Abstract: 本发明提供一种斑点叉尾鮰Zbtb38蛋白原核表达基因序列、多克隆抗体及其应用，基于原核表达密码子偏好性将斑点叉尾鮰zbtb38基因开放阅读框(ORF)前1239bp调整为适合原核表达的基因序列，将调整后的zbtb38基因序列插入到原核表达载体中得到重组表达载体，成功在原核系统中表达了斑点叉尾鮰zbtb38基因，获得了纯度较高的重组蛋白，通过免疫新西兰白兔获得了兔源多克隆抗体，并使用该抗体利用Western blot技术检测了Zbtb38蛋白在斑点叉尾鮰性腺组织中的表达水平，为进一步研究斑点叉尾鮰zbtb38基因的功能奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112342214B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202011253224.5
申请日：2020-11-11
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/70
Abstract: 本发明提供一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法，通过设计CRISPR序列，制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接，再通过体外转录方法制备sgRNA，将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵，以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列，特异性强且敲除效率高，敲除流程简单快捷，为后续解析斑点叉尾鮰zbtb38基因功能提供动物材料。
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公开(公告)号：CN112335581A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN202011161332.X
申请日：2020-10-27
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明公开了一种用于斑点叉尾鮰基因敲除和过表达研究的受精卵及其制备方法，该方法包括亲鱼培育、强化促熟培育、亲鱼选择、雌性亲鱼的催产、精子溶液制备、卵子收集、人工授精，通过该方法制备的受精卵经显微注射后，孵化率超过80％。本发明还提供了促进斑点叉尾鮰雌性亲鱼排卵的催产剂及其剂量，注射催产剂后可促进雌性亲鱼产卵并可实现人工取卵。根据本发明制备的斑点叉尾鮰受精卵可以保证其同步的发育，满足基因敲除、过表达等研究需要。
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公开(公告)号：CN113475433B
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202110924437.4
申请日：2021-08-12
Applicant: 江苏省淡水水产研究所
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明公开了一种斑点叉尾鮰伪雌鱼培育方法，其包括以下步骤，（1）斑点叉尾鮰卵黄囊苗完全消耗卵黄囊长成仔鱼时，开始投喂经雌性激素处理的丰年虫，投喂3天或投喂至仔鱼开口；2）继续投喂经雌性激素处理的饲料至30日龄；3）继续投喂常规饲料至60日龄以上，该方法创新的研究了受精卵孵化、伪雌鱼培育饵料的制作、鱼苗饲养与管理、性逆转评估、伪雌鱼筛选等培育环节，实现雄性遗传性别斑点叉尾鮰100%逆转成伪雌鱼，即遗传性别为雄性。
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