公开(公告)号：CN118291560A

公开(公告)日：2024-07-05

申请号：CN202410467373.3

申请日：2024-04-10

Applicant: 江苏德源药业股份有限公司 ,  江苏海洋大学

Inventor： 王建涛 ,  张坤晓 ,  杨汉跃 ,  谢宝柱 ,  闫显光 ,  李梦磊 ,  孙恒 ,  王思琦 ,  丁成会 ,  戴晓慧 ,  耿楠 ,  孙玉倩 ,  张文文 ,  季鸿宇

IPC: C12P13/00 ,  C12P41/00 ,  C12N15/70 ,  C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种沙库巴曲中间体(2R，4S)‑5‑([1,1'‑联苯]‑4‑基)‑4‑((叔丁氧羰基)氨基)‑2‑甲基戊酸乙酯的合成方法。包括以下步骤：以(R，E)‑5‑([1,1'‑联苯]‑4‑基)‑4‑((叔丁氧羰基)氨基)‑2‑甲基‑2‑戊烯酸乙酯为底物，加入烯醇还原酶、NADP辅酶、葡萄糖和葡萄糖脱氢酶；所述烯醇还原酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.11或SEQ ID NO.16所示，所述沙库巴曲中间体为(2R，4S)‑5‑([1,1'‑联苯]‑4‑基)‑4‑((叔丁氧羰基)氨基)‑2‑甲基戊酸乙酯。本发明的方法利用烯醇还原酶，结合葡萄糖脱氢酶再生NADPH辅酶，合成沙库巴曲中间体，合成工艺路线简单、绿色环保、成本低廉、转化效率高、产率高，适用性更广。

公开(公告)号：CN118109528A

公开(公告)日：2024-05-31

申请号：CN202410467379.0

申请日：2024-04-10

Applicant: 江苏海洋大学 ,  江苏德源药业股份有限公司

Inventor： 张坤晓 ,  杨汉跃 ,  李梦磊 ,  王建涛 ,  谢宝柱 ,  闫显光 ,  王思琦 ,  戴晓慧 ,  丁成会 ,  耿楠 ,  孙恒 ,  孙玉倩 ,  张文文 ,  季鸿宇

IPC: C12P13/00 ,  C12P41/00 ,  C12N15/70 ,  C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种生物催化合成沙库巴曲中间体(2R，4S)‑5‑([1,1'‑联苯]‑4‑基)‑4‑氨基‑2‑甲基戊酸的方法。包括以下步骤：以(R，E)‑5‑([1,1'‑联苯]‑4‑基)‑4‑氨基‑2‑甲基‑2‑戊烯酸为底物，加入烯醇还原酶、NADP辅酶、葡萄糖和葡萄糖脱氢酶；所述烯醇还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示，所述沙库巴曲中间体为(2R，4S)‑5‑([1,1'‑联苯]‑4‑基)‑4‑氨基‑2‑甲基戊酸。本发明的方法利用烯醇还原酶，结合葡萄糖脱氢酶再生NADPH辅酶，合成沙库巴曲中间体，合成工艺路线简单、绿色环保、成本低廉、转化效率高、产率高，适用性更广。

公开(公告)号：CN118516422A

公开(公告)日：2024-08-20

申请号：CN202410427152.3

申请日：2024-04-10

Applicant: 江苏海洋大学 ,  江苏德源药业股份有限公司

Inventor： 张坤晓 ,  杨汉跃 ,  李梦磊 ,  王建涛 ,  谢宝柱 ,  闫显光 ,  史大华 ,  曹阳 ,  王思琦 ,  戴晓慧 ,  丁成会 ,  耿楠 ,  孙恒 ,  孙玉倩 ,  张文文 ,  季鸿宇

IPC: C12P13/00 ,  C12P41/00 ,  C12N15/70 ,  C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种生物催化合成沙库巴曲中间体的方法。包括以下步骤：以(R，E)‑5‑([1,1'‑联苯]‑4‑基)‑4‑((叔丁氧羰基)氨基)‑2‑甲基‑2‑戊烯酸为底物，加入烯醇还原酶、NADP辅酶、葡萄糖和葡萄糖脱氢酶；所述烯醇还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述沙库巴曲中间体为(2R，4S)‑5‑([1,1'‑联苯]‑4‑基)‑4‑((叔丁氧羰基)氨基)‑2‑甲基戊酸。本发明的方法利用烯醇还原酶，结合葡萄糖脱氢酶再生NADPH辅酶，合成沙库巴曲中间体，合成工艺路线简单、绿色环保、成本低廉、转化效率高、产率高，适用性更广。

公开(公告)号：CN118109529A

公开(公告)日：2024-05-31

申请号：CN202410467389.4

申请日：2024-04-10

Applicant: 江苏海洋大学 ,  江苏德源药业股份有限公司

Inventor： 张坤晓 ,  闫显光 ,  李梦磊 ,  杨汉跃 ,  谢宝柱 ,  王建涛 ,  王思琦 ,  戴晓慧 ,  丁成会 ,  耿楠 ,  孙恒 ,  孙玉倩 ,  张文文 ,  季鸿宇

IPC: C12P13/00 ,  C12P41/00 ,  C12N15/70 ,  C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种生物催化合成沙库巴曲中间体(2R，4S)‑5‑([1,1'‑联苯]‑4‑基)‑4‑氨基‑2‑甲基戊酸乙酯的方法。包括以下步骤：以(R，E)‑5‑([1,1'‑联苯]‑4‑基)‑4‑氨基‑2‑甲基‑2‑戊烯酸乙酯为底物，加入烯醇还原酶、NADP辅酶、葡萄糖和葡萄糖脱氢酶；所述烯醇还原酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.6～9所示，所述沙库巴曲中间体为(2R，4S)‑5‑([1,1'‑联苯]‑4‑基)‑4‑氨基‑2‑甲基戊酸乙酯。本发明的方法利用烯醇还原酶，结合葡萄糖脱氢酶再生NADPH辅酶，合成沙库巴曲中间体，合成工艺路线简单、绿色环保、成本低廉、转化效率高、产率高，适用性更广。

公开(公告)号：CN118726509A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410765154.3

申请日：2024-06-14

Applicant: 江苏海洋大学 ,  江苏联宇医疗器械有限公司 ,  连云港博凯莱特生物科技有限公司

Inventor： 张坤晓 ,  张文文 ,  邱敏 ,  谢宝柱 ,  季鸿宇 ,  孙恒 ,  孙玉倩 ,  耿楠 ,  钟继国 ,  侯玉婷 ,  梁蕊 ,  夏雨

IPC: C12P19/26 ,  C12N15/70 ,  C12N9/80 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种用脱乙酰酶催化高效合成氨基葡萄糖的方法，包括以下步骤：以乙酰氨基葡萄糖GlcNAc为底物，加入含有脱乙酰酶的蛋白液，在pH5.0～9.0、温度30～70℃条件下反应，即得氨基葡萄糖；所述脱乙酰酶的氨基酸序列选自SEQ ID NO.1～4。本发明通过重组表达获得了一种耐热性好、对GlcNAc转化率高的脱乙酰酶蛋白，转化率可达95％以上，实现了对氨基葡萄糖的高效生物合成。