一种乳酸乳球菌胆汁耐受能力提高的胆盐水解酶变异体

    公开(公告)号:CN105505905A

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201511032048.1

    申请日:2015-12-31

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12N9/80 C12Y305/01024

    Abstract: 本发明公开了一种乳酸乳球菌胆汁耐受能力提高的胆盐水解酶变异体,属于酶工程领域。本发明采用基因改组技术将胆盐水解酶进行定向进化,改变了胆盐水解酶的活力及底物特异性,进化的酶蛋白表达菌株胆汁耐受能力比野生酶蛋白的表达菌株提高了1.3倍。本发明获得的乳酸乳球菌菌株和胆盐水解酶变异体可用于食品、医药、农业等领域,如用作微生态制剂、药物表达载体、饲料添加剂等,胆盐水解酶变异体可用于开发为重组蛋白产品,亦可用作基因工程表达系统的筛选标记及菌种的分子改造。

    一种增强乳酸菌胆汁耐受能力的方法

    公开(公告)号:CN105349564A

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201510918010.8

    申请日:2015-12-11

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种增强乳酸菌胆汁耐受能力的方法,采用重组DNA技术将唾液乳酸杆菌Lactobacillus salivarius LMG14476的胆盐水解酶基因克隆连接到乳酸乳球菌表达载体pNZ8148,并转化至Lactococcus lactis NZ9000,经筛选鉴定得到具有胆盐水解酶活性的重组乳酸乳球菌。该菌株胆汁耐受能力比野生菌提高了近5倍。采用本发明方法构建出的具有胆盐水解酶活性的乳酸乳球菌可作为具有降低血清胆固醇功能的益生菌制剂的模式菌株,应用于医药、食品领域。

    一种提高益生菌清除微囊藻毒素效率的方法

    公开(公告)号:CN101715908A

    公开(公告)日:2010-06-02

    申请号:CN200910250614.4

    申请日:2009-12-11

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种提高益生菌清除微囊藻毒素效率的方法,属于食品生物技术领域。本发明采用益生菌作为生物催化剂,通过液体深层发酵制备富含益生菌的发酵液或将发酵液精制得到菌泥,将所得益生菌发酵液或菌泥投入水体中,同时投入葡萄糖作为外源添加物,37℃、150rpm振荡培养24-30h,益生菌对微囊藻毒素的清除效率明显提高。由于葡萄糖和益生菌对人畜安全无害并有益生功效,本发明可广泛应用于食品领域,得到营养成分丰富、健康安全的产品。

    一种微生物发酵法制备开菲尔多糖的方法

    公开(公告)号:CN1884570A

    公开(公告)日:2006-12-27

    申请号:CN200610040607.8

    申请日:2006-05-19

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 王淼 毕洁

    Abstract: 一种微生物发酵法制备开菲尔多糖的方法,涉及发酵法制备开菲尔多糖的技术领域。本发明采用乳酸菌(Lactobacillus kefiranofaciens)JCM6985为发酵菌株,经种子培养后,接种于经改进的发酵培养基中进行静置培养,得到一种分子量数量级为1.5×105Da;葡萄糖与半乳糖的比率为1∶10;β-型吡喃多糖中含有β-糖苷键;特性粘度[η]为73.86[溶液浓度为1g/100mL]的开菲尔多糖。本发明的优点是在其它培养条件相同的情况下,改变发酵培养基的成分后不仅提高开菲尔多糖的产量,还获得了结构新颖的开菲尔多糖,这大大有利于实现发酵法制备开菲尔多糖的产业化生产,还拓宽了开菲尔多糖的应用范围。

    一种增强乳酸菌胆汁耐受能力的方法

    公开(公告)号:CN105349564B

    公开(公告)日:2019-04-02

    申请号:CN201510918010.8

    申请日:2015-12-11

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种增强乳酸菌胆汁耐受能力的方法,采用重组DNA技术将唾液乳酸杆菌Lactobacillus salivarius LMG14476的胆盐水解酶基因克隆连接到乳酸乳球菌表达载体pNZ8148,并转化至Lactococcus lactis NZ9000,经筛选鉴定得到具有胆盐水解酶活性的重组乳酸乳球菌。该菌株胆汁耐受能力比野生菌提高了近5倍。采用本发明方法构建出的具有胆盐水解酶活性的乳酸乳球菌可作为具有降低血清胆固醇功能的益生菌制剂的模式菌株,应用于医药、食品领域。

    一种产胆盐水解酶变异体的基因工程菌及其制备方法

    公开(公告)号:CN105567619B

    公开(公告)日:2018-11-09

    申请号:CN201610027472.5

    申请日:2016-01-15

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产胆盐水解酶变异体的基因工程菌及其制备方法,属于基因工程技术领域。本发明将胆盐水解酶变异体基因克隆连接到大肠杆菌表达载体pET‑20b(+),转化至Escherichia coli BL21(DE3),经筛选鉴定得到一株过量表达胆盐水解酶变异体的重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)‑pET20b(+)‑bsh1v;蛋白纯化步骤为分步超滤结合分子筛,获得了单一重组蛋白。本发明制备的重组蛋白底物专一性提高,能够改善作为信号物质的胆汁组成,应用于医药、食品领域。

    一种稳定性提高的胆盐水解酶突变体

    公开(公告)号:CN105543200A

    公开(公告)日:2016-05-04

    申请号:CN201610064273.1

    申请日:2016-01-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种稳定性提高的胆盐水解酶突变体,属于酶工程领域。本发明通过定点突变的方式,将来源于唾液乳酸杆菌的胆盐水解酶BSH2分子中位于疏水腔入口处的氨基酸谷氨酰胺突变成丙氨酸,改变了分子内部疏水性,提高了胆盐水解酶的热稳定性及氧化稳定性。改造后的酶蛋白,稳定性提高,更适合工业生产应用。

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