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公开(公告)号：CN103992991B
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201310557568.9
申请日：2013-11-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种胆盐水解酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过对胆盐水解酶氨基酸序列比对分析和3-D结构的同源模拟及叠加分析，确定胆盐水解酶底物特异性氨基酸突变位点，利用定点突变技术将底物特异性氨基酸突变为非极性氨基酸，将突变体导入宿主菌，获得突变菌株。突变体所产胆盐水解酶均为活性酶，且与野生型相比，突变体对甘氨结合胆盐的水解能力都有下降的趋势，而对牛磺结合胆盐的水解能力则有增加的趋势。这为提高BSH对牛磺结合胆盐的水解能力和揭示其对底物的结合机制奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102220408B
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201110119378.X
申请日：2011-05-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产胆盐水解酶的乳酸菌及其筛选方法和应用，属于食品生物技术领域。本发明采用改进的定性分析与定量分析相结合的方法，可准确、高效的用于胆盐水解酶菌株的筛选；采用本发明方法筛选出一株具有较高胆盐水解酶活性的植物乳杆菌，该菌株及其产生的胆盐水解酶可应用于食品领域，用于减少人体血清胆固醇含量。
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公开(公告)号：CN102108337B
公开(公告)日：2012-05-30
申请号：CN201010238658.8
申请日：2010-07-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)BBE10-212，保藏编号CCTCC M2010163。该菌株具有较高的藻毒素清除效率，同时该菌株又可高效地清除胆固醇。将该菌株用于保健食品领域，具有提高人体免疫力、协助营养消化等诸多方面的功效。
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公开(公告)号：CN102108337A
公开(公告)日：2011-06-29
申请号：CN201010238658.8
申请日：2010-07-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)BBE10-212，保藏编号CCTCC M2010163。该菌株具有较高的藻毒素清除效率，同时该菌株又可高效地清除胆固醇。将该菌株用于保健食品领域，具有提高人体免疫力、协助营养消化等诸多方面的功效。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103756989A
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201310557570.6
申请日：2013-11-11
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/80 , C12N15/70 , C12Y305/01024
Abstract: 本发明公开了一种利用双精氨酸信号肽发酵生产胆盐水解酶的方法及应用，属于基因工程技术领域。本发明将双精氨酸信号肽基因和胆盐水解酶基因融合，将融合基因转化大肠杆菌宿主得到重组菌，利用重组菌发酵生产胆盐水解酶。胆盐水解酶被成功分泌到了重组菌的胞外，重组菌E.coli？BL21(DE3)pLysS(pET-20b(+)-dmsA-bsh)的胞外BSH活性最高，达到0.72±0.05U？mL-1，本发明为BSH的分离纯化和酶学性质研究奠定了基础，也为其它异源蛋白的分泌表达提供了有效的方法。
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公开(公告)号：CN102220408A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110119378.X
申请日：2011-05-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产胆盐水解酶的乳酸菌及其筛选方法和应用，属于食品生物技术领域。本发明采用改进的定性分析与定量分析相结合的方法，可准确、高效的用于胆盐水解酶菌株的筛选；采用本发明方法筛选出一株具有较高胆盐水解酶活性的植物乳杆菌，该菌株及其产生的胆盐水解酶可应用于食品领域，用于减少人体血清胆固醇含量。
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公开(公告)号：CN103992991A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201310557568.9
申请日：2013-11-11
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/80 , C12Y305/01024
Abstract: 本发明公开了一种胆盐水解酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过对胆盐水解酶氨基酸序列比对分析和3-D结构的同源模拟及叠加分析，确定胆盐水解酶底物特异性氨基酸突变位点，利用定点突变技术将底物特异性氨基酸突变为非极性氨基酸，将突变体导入宿主菌，获得突变菌株。突变体所产胆盐水解酶均为活性酶，且与野生型相比，突变体对甘氨结合胆盐的水解能力都有下降的趋势，而对牛磺结合胆盐的水解能力则有增加的趋势。这为提高BSH对牛磺结合胆盐的水解能力和揭示其对底物的结合机制奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102220276B
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN201110119810.5
申请日：2011-05-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产胆盐水解酶的基因工程菌及其筛构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将植物乳杆菌Lactobacillus plantarum BBE7的胆盐水解酶(bsh)基因克隆连接到大肠杆菌表达载体pET28a(+)，并转化Escherichia coli BL21(DE3)，经筛选鉴定得到一株可以产较高活性胆盐水解酶的重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)-pET28a(+)-bsh，保藏编号为CCTCC NO：M 2011115。该菌株表达的胆盐水解酶对甘氨脱氧胆酸钠(GDCA)的总酶活为3.7819U/mL，比野生菌的总酶活提高了近11倍。这为胆盐水解酶的大规模生产以及其作为功能食品来降低血清胆固醇奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN102220276A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110119810.5
申请日：2011-05-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产胆盐水解酶的基因工程菌及其筛构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将植物乳杆菌Lactobacillus plantarum BBE7的胆盐水解酶(bsh)基因克隆连接到大肠杆菌表达载体pET28a(+)，并转化Escherichia coli BL21(DE3)，经筛选鉴定得到一株可以产较高活性胆盐水解酶的重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)-pET28a(+)-bsh，保藏编号为CCTCC NO：M2011115。该菌株表达的胆盐水解酶对甘氨脱氧胆酸钠(GDCA)的总酶活为3.7819U/ml，比野生菌的总酶活提高了近11倍。这为胆盐水解酶的大规模生产以及其作为功能食品来降低血清胆固醇奠定了良好的基础。
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