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公开(公告)号：CN109943515B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201910360379.X
申请日：2019-04-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产羧酸酯酶的重组菌及其应用，属于酶工程领域。本发明将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的羧酸酯酶BaCEs02在大肠杆菌中异源表达，其中粗酶液中以1‑乙酸萘酯和2‑乙酸萘酯为底物的酶活分别为13831.8U/L和8135.9U/L。纯化得到的羧酸酯酶BaCEs02纯酶液对邻苯二甲酸酯类(邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯或邻苯二甲酸二异丁酯)的降解率分别高达92.2％、95.6％、87.3％，提供了一种高效降解塑化剂邻苯二甲酸酯类的方法。
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公开(公告)号：CN109370998B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201811449478.7
申请日：2018-11-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的ω‑转氨酶突变体I215F，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶215位置处的I突变成F，得到了一种催化效率得到提高的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体I215F催化效率Kcat/Km提高了1.92倍，催化(R)‑phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了3.79倍。本发明得到的突变体比天然ω‑转氨酶更适用于在工业上的应用。
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公开(公告)号：CN109943515A
公开(公告)日：2019-06-28
申请号：CN201910360379.X
申请日：2019-04-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产羧酸酯酶的重组菌及其应用，属于酶工程领域。本发明将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的羧酸酯酶BaCEs02在大肠杆菌中异源表达，其中粗酶液中以1-乙酸萘酯和2-乙酸萘酯为底物的酶活分别为13831.8U/L和8135.9U/L。纯化得到的羧酸酯酶BaCEs02纯酶液对邻苯二甲酸酯类(邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯或邻苯二甲酸二异丁酯)的降解率分别高达92.2％、95.6％、87.3％，提供了一种高效降解塑化剂邻苯二甲酸酯类的方法。
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公开(公告)号：CN110038250B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201910360374.7
申请日：2019-04-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降解含金属离子或有机溶剂的邻苯二甲酸酯类的方法，属于酶工程领域。本发明将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的羧酸酯酶BaCEs01在大肠杆菌中异源表达，得到的羧酸酯酶BaCEs01最适反应温度为40℃，在40℃下放置1小时后，酶活性保持在40％以上，具有良好的温度稳定性。纯化得到的羧酸酯酶BaCEs01对邻苯二甲酸酯类(邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二异丁酯)的降解率分别高达84.2％、89.6％、81.3％，提供了一种高效降解塑化剂邻苯二甲酸酯类的方法。
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公开(公告)号：CN110713997A
公开(公告)日：2020-01-21
申请号：CN201911065858.5
申请日：2019-11-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降解产物均一的琼胶酶及其应用，属于酶工程领域。本发明将类芽孢杆菌(Paenibacillus odorifer)来源的琼胶酶AgaP1(其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示)在大肠杆菌中异源表达，其中粗酶液中琼脂糖和琼脂粉为底物的酶活分别为5716.68U/L和4116.96U/L。纯化得到的琼胶酶AgaP1纯酶液能够降解琼脂糖得到单一降解产物新琼二糖，是一种具有工业应用前景的琼胶酶。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110066759A
公开(公告)日：2019-07-30
申请号：CN201910361159.9
申请日：2019-04-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种耐金属离子和有机溶剂的羧酸酯酶及其应用，属于酶工程领域。本发明将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的羧酸酯酶BaCEs04在大肠杆菌中异源表达，得到的羧酸酯酶BaCEs04在Zn2+，NH4+存在下，分别提高了24.3％和23.5％的酶活，其余金属离子Na+，K+，Mg2+，Ca2+，Cu2+，Fe3+对酶活几乎没有影响甚至有略微的提高，说明该羧酸酯酶在存在金属离子的环境中较为稳定。该酶在丙酮，正己烷，异丙醇中放置1h后，酶活分别提高了22％、30％、26％，说明该酶具有较好的有机溶剂耐受性。
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公开(公告)号：CN109402188B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201811219769.7
申请日：2018-10-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种来自短小芽孢杆菌的ω‑转氨酶及在生物胺化中的应用，属于生物工程技术领域。本发明首次从Bacillus pumilus W3中分离、鉴定了ω‑转氨酶基因，并选用大肠杆菌重组表达系统生产密码子优化后的ω‑转氨酶能大幅提高其产量，使更易达到工业化应用要求。本发明发现该ω‑转氨酶以(R)‑α‑phenethylamine为底物时，最适作用pH为7.0，最适作用温度为45℃；同时，该R‑ω‑转氨酶pH稳定性及温度稳定性都非常好，对实验组(以(R)‑α‑phenethylamine为底物)的催化活性优于对照组(以(S)‑α‑phenethylamine为底物)，表明该重组ω‑转氨酶具有很好选择性合成R‑手性胺的功能，具有较大应用潜力。
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公开(公告)号：CN110038250A
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201910360374.7
申请日：2019-04-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降解含金属离子或有机溶剂的邻苯二甲酸酯类的方法，属于酶工程领域。本发明将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的羧酸酯酶BaCEs01在大肠杆菌中异源表达，得到的羧酸酯酶BaCEs01最适反应温度为40℃，在40℃下放置1小时后，酶活性保持在40％以上，具有良好的温度稳定性。纯化得到的羧酸酯酶BaCEs01对邻苯二甲酸酯类(邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二异丁酯)的降解率分别高达84.2％、89.6％、81.3％，提供了一种高效降解塑化剂邻苯二甲酸酯类的方法。
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公开(公告)号：CN109486780A
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201811350818.0
申请日：2018-11-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的ω-转氨酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω-转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω-转氨酶215位置处的I突变成M，得到了一种催化效率得到提高的ω-转氨酶突变体。本发明突变体I215M催化效率Kcat/Km提高了17.39倍，催化(R)-phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了6.99倍。本发明得到的突变体比天然ω-转氨酶更适用于在工业上的应用。
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公开(公告)号：CN110066759B
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN201910361159.9
申请日：2019-04-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种耐金属离子和有机溶剂的羧酸酯酶及其应用，属于酶工程领域。本发明将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的羧酸酯酶BaCEs04在大肠杆菌中异源表达，得到的羧酸酯酶BaCEs04在Zn2+，NH4+存在下，分别提高了24.3％和23.5％的酶活，其余金属离子Na+，K+，Mg2+，Ca2+，Cu2+，Fe3+对酶活几乎没有影响甚至有略微的提高，说明该羧酸酯酶在存在金属离子的环境中较为稳定。该酶在丙酮，正己烷，异丙醇中放置1h后，酶活分别提高了22％、30％、26％，说明该酶具有较好的有机溶剂耐受性。
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