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公开(公告)号：CN115181715A
公开(公告)日：2022-10-14
申请号：CN202210955587.6
申请日：2022-08-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种能高效生产单磷酸类脂A疫苗佐剂的重组大肠杆菌，属于基因工程和合成生物学领域。本发明敲除了大肠杆菌MG1655基因组上O‑抗原基因簇gnd‑galF，核心糖基因簇rfaD‑waaQ，肠共同抗原基因簇rfe‑rffM，克拉酸基因簇wcaM‑wza和磷脂转运系统mlaA、mlaC和pldA基因，并过表达弗朗西斯菌染色体中的FnlpxE和沙门氏菌染色体中的SepagP，SepagL基因得到重组菌MW012/pWEPL。通过简单的发酵，MW012/pWEPL菌株能高效合成单磷酸六酰化类脂A(MPL)，MPL在全部类脂A中的比例高达到75％。
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公开(公告)号：CN118086159A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410076549.2
申请日：2024-01-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种能生产单磷酸类脂A疫苗佐剂的重组大肠杆菌，属于基因工程和合成生物学领域。本发明敲除了大肠杆菌MG1655基因组上磷脂转运系统的mlaE和pldA基因，调控PagP表达的hns基因，并通过缺失替换其他与磷脂转运相关的基因簇ybgC‑cpoB和letAB依次整合来自弗朗西斯菌的FnlpxE和来自沙门氏菌的SepagL基因，获得重组菌WZM012。通过简单的发酵，WZM012菌株能高效合成单磷酸六酰化类脂A(MPL)，发酵24h即可产生32.76mg/L的MPL，MPL在全部类脂A中的比例高达到70％。
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公开(公告)号：CN115181715B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202210955587.6
申请日：2022-08-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种能高效生产单磷酸类脂A疫苗佐剂的重组大肠杆菌，属于基因工程和合成生物学领域。本发明敲除了大肠杆菌MG1655基因组上O‑抗原基因簇gnd‑galF，核心糖基因簇rfaD‑waaQ，肠共同抗原基因簇rfe‑rffM，克拉酸基因簇wcaM‑wza和磷脂转运系统mlaA、mlaC和pldA基因，并过表达弗朗西斯菌染色体中的FnlpxE和沙门氏菌染色体中的SepagP，SepagL基因得到重组菌MW012/pWEPL。通过简单的发酵，MW012/pWEPL菌株能高效合成单磷酸六酰化类脂A(MPL)，MPL在全部类脂A中的比例高达到75％。
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公开(公告)号：CN116536233A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202310404567.4
申请日：2023-04-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种能高效生产单磷酸类脂A疫苗佐剂的重组大肠杆菌，属于基因工程和合成生物学领域。本发明敲除大肠杆菌MG1655中膜壁表层分子、磷脂和葡萄糖转运、磷酸乙醇胺修饰以及enoyl‑ACP还原酶相关的132个基因，表达类脂A修饰基因FnlpxE、SepagP和SepagL，构建了菌株MW021/pTEPL。MW021/pTEPL的生长性能大幅度提高且发酵过程中不再需要抗生物和诱导剂；在2‑L发酵罐体系中，MW021/pTEPL生长的最高OD600能达到38.54，能生产13.84g/L的干细胞和约88.99mg/L的总lipid A；总lipid A中只含有两种结构，分别为MPL和D‑MPLA。
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