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公开(公告)号：CN115335536B
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202280002216.4
申请日：2022-01-07
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/686 , C12N9/22 , C12Q1/6897 , C12R1/93
Abstract: 提供了用于简单、无仪器且灵敏的方法的组合物和方法，该方法能够对目的核酸分子进行快速、即时检测。这基于一个令人惊讶的发现，即扩增及基于CRISPR的切割和检测的相对效率可以调整为利于扩增，直到生成足够的扩增产物实现检测。示例方法包括设计向导RNA和引物以靶向非最优PAM序列，或序列工程化Cas核酸酶以降低其在与该向导RNA形成核糖核蛋白或者结合或切割底物核酸方面的活性。
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公开(公告)号：CN117737208B
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202311783425.X
申请日：2023-12-22
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/70 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于室温检测RNA的组合物及试剂盒，该组合物包括：目标RNA的反转录引物和反转录酶，用于合成目标RNA的反向互补序列，反转录引物的长度为10～20个核苷酸；RPA反向引物、RPA正向引物、重组酶、DNA聚合酶、T7RNA聚合酶，用于扩增目标RNA的双链DNA扩增子，并以双链DNA扩增子为底物合成包含目标RNA的反向互补序列的长链RNA；双链DNA扩增子由目标RNA及其反向互补序列碱基互补配对形成，RPA反向引物的5’端包含T7RNA聚合酶启动子序列；Cas13a蛋白及其crRNA，crRNA用于靶向识别目标RNA的反向互补序列，Cas13a蛋白用于切割目标RNA的反向互补序列；TaqMan荧光探针，其能在目标RNA的反向互补序列被切割时被Cas13a蛋白非特异切割，释放荧光基团。该组合物能在20℃、30min内检测到0.5cp/μL的目标RNA。
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公开(公告)号：CN116286734B
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202211514174.0
申请日：2022-11-29
Applicant: 武汉大学
IPC: C12N9/22 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12Q1/6858
Abstract: 本申请公开了一种野生型LbCas12a蛋白的突变体及其SNP检测用途，野生型LbCas12a蛋白的氨基酸序列如Seq_1所示，该突变体至少在Seq_1所示的氨基酸序列的第174位存在突变。该突变体与野生型LbCas12a蛋白相比，具有SNP识别能力，基于该突变体设计的CRISPR‑Cas系统，可以在30分钟内识别基因组中的SNP，该系统的样品制备过程非常简单，既可以避免交叉污染，又可以降低操作难度和检测成本。
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公开(公告)号：CN115335536A
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN202280002216.4
申请日：2022-01-07
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/686 , C12N9/22 , C12Q1/6897 , C12R1/93
Abstract: 提供了用于简单、无仪器且灵敏的方法的组合物和方法，该方法能够对目的核酸分子进行快速、即时检测。这基于一个令人惊讶的发现，即扩增及基于CRISPR的切割和检测的相对效率可以调整为利于扩增，直到生成足够的扩增产物实现检测。示例方法包括设计向导RNA和引物以靶向非最优PAM序列，或序列工程化Cas核酸酶以降低其在与该向导RNA形成核糖核蛋白或者结合或切割底物核酸方面的活性。
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公开(公告)号：CN118715317A
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202280091683.9
申请日：2022-12-14
Applicant: 武汉大学
IPC: C12N9/22 , C12N9/12 , C12N15/85 , C12Q1/6844
Abstract: 提供了用于在靶基因组序列中插入或替换核酸片段的成分和方法。与传统的Prime编辑器不同，所披露的方法不需要逆转录酶或pegRNA。相反，Cas蛋白与DNA聚合酶融合、以其他方式结合或存在于同一细胞中，利用单链供体DNA生成所需的插入序列。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119744299A
公开(公告)日：2025-04-01
申请号：CN202380057546.8
申请日：2023-05-30
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本公开提供了用于复制/扩增目标片段的组合物和方法，适用于目标DNA序列(如基因组序列)。该编辑系统采用一对pegRNA，其通过在目标片段两侧的靶向位点，结合包含在pegRNA中的逆转录酶(RT)模板，扩展目标片段。由于这两个RT模板至少包括彼此互补的部分，它们可以形成双链区，从而为DNA聚合酶提供起始点，合成目标片段每条链的新链，从而复制目标片段。继续这一过程将引发对该靶序列的扩增。或者，这一过程也可以通过pegRNA/sgRNA或sgRNA/sgRNA的组合来实现。在sgRNA/sgRNA的PAM外位点情况下，不需要RT酶和模板。
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公开(公告)号：CN117658839A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311578993.6
申请日：2023-11-22
Applicant: 武汉大学
IPC: C07C229/12 , A61K9/51 , A61K47/18 , A61K47/24 , A61K47/28 , A61K31/7088
Abstract: 本发明公开了一种含羟基可电离脂质及其制备方法与应用，属于核酸药物载体技术领域。本发明的含羟基可电离脂质的结构式如下所示，其可用于制备脂质体纳米粒子或核酸药物载体。本发明的可电离脂质中侧链羟基的引入，联合头部羟基，可以显著增加可电离脂质与核酸分子的结合能力，提高脂质体纳米颗粒的载药量，显著减少脂质体纳米颗粒制备时总脂质的投入量，降低脂质体纳米颗粒的毒性。
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公开(公告)号：CN110894557A
公开(公告)日：2020-03-20
申请号：CN201911380405.1
申请日：2019-12-27
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12N15/113 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及生物化学中核酸检测的技术领域，具体涉及一种基于CRISPR方式检测非洲猪瘟病毒的crRNA及试剂盒。所述crRNA根据如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:6所示的靶向位点设计得到。一种基于CRISPR方式检测非洲猪瘟病毒的试剂盒，其包括所述的crRNA、单链DNA报告序列、缓冲液、试纸条、分析缓冲液及Cas蛋白。利用Cas蛋白在crRNA指导下切割非洲猪瘟病毒双链DNA底物后释放PAM远端产物，激活非特异性切割单链DNA活性的特点而设计的一种高灵敏度，高特异性的快速检测非洲猪瘟病毒的试剂盒。
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公开(公告)号：CN119913238A
公开(公告)日：2025-05-02
申请号：CN202411221633.5
申请日：2022-01-07
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/6844 , C12N9/22
Abstract: 提供了用于简单、无仪器且灵敏的方法的组合物和方法，该方法能够对目的核酸分子进行快速、即时检测。这基于一个令人惊讶的发现，即扩增及基于CRISPR的切割和检测的相对效率可以调整为利于扩增，直到生成足够的扩增产物实现检测。示例方法包括设计向导RNA和引物以靶向非最优PAM序列，或序列工程化Cas核酸酶以降低其在与该向导RNA形成核糖核蛋白或者结合或切割底物核酸方面的活性。
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公开(公告)号：CN119899837A
公开(公告)日：2025-04-29
申请号：CN202510016521.4
申请日：2025-01-06
Applicant: 武汉大学
IPC: C12N15/113 , C12N9/22 , C12N9/12 , C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种倒位目标DNA序列的DNA先导编辑系统、重组载体、试剂盒和方法，涉及基因编辑技术领域。DNA先导编辑系统包括Cas蛋白和逆转录酶、pegRNA‑A和pegRNA‑B；pegRNA‑A包括第一向导RNA、第一引物结合位点和第一逆转录模板，pegRNA‑B包括第二向导RNA、第二引物结合位点和第二逆转录模板；第一逆转录模板包括第一配对片段，第二逆转录模板包括第二配对片段；第一配对片段与第二配对片段的序列互补；pegRNA‑A和pegRNA‑B分别引导Cas蛋白切割目的片段位于双链DNA的同一条链的两侧的酶切位点。本发明提供了基于相同技术构思的四套DNA先导编辑系统。这四套DNA先导编辑系统都是通过特殊设计的pegRNA，在目标DNA序列的两端生成3’单链DNA，通过配对片段的互补作用实现目标DNA的倒位编辑。
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