-
公开(公告)号：CN119913099A
公开(公告)日：2025-05-02
申请号：CN202510320302.5
申请日：2025-03-18
Applicant: 新乡医学院 , 鹤壁国立光电科技股份有限公司 , 郑州大学
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明属于细胞培养技术领域，具体涉及一种无血清间充质干细胞培养基及其制备方法。本发明提供的无血清间充质干细胞培养基是以DMEM/F12基础培养基为基础，添加了补充因子：酵母水解物、胰岛素、白蛋白、地塞米松、牛磺酸、红景天苷、大豆异黄酮、黄芩素、人血小板裂解液、苦瓜皂苷和金丝桃苷后制备得到的。本发明提供的无血清间充质干细胞培养基实现了不需要补充血清也可以维持细胞正常形态、实现快速增殖，维持间充质干细胞生物特性。
-
公开(公告)号：CN106520832B
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201611024593.0
申请日：2016-11-17
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明公开了一种双顺反子表达载体、表达系统、制备方法及应用，属于基因工程技术领域。该表达载体包含核基质结合区序列、内核糖体进入位点序列和筛选标记，通过在启动子与IRES序列之间插入目的基因，可构成目的基因‑IRES序列‑筛选标记基因依次连接的双顺反子序列。表达载体的结构为：MAR‑启动子‑目的基因‑IRES序列‑筛选标记‑PolyA‑MAR。该载体利用一个启动子实现目的基因和筛选标记的同时表达，可减少由于不同表达框存在导致的假阳性细胞克隆，提高阳性细胞克隆筛选率，并克服传统载体目的基因与筛选标记表达不均衡的问题；载体上包含MAR序列能克服转基因沉默，实现转基因在宿主细胞中的高效、长期表达。
-
公开(公告)号：CN107058387B
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201710240457.3
申请日：2017-04-13
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及一种适合HEK293细胞的双顺反子表达载体及其制备方法、表达系统、应用，属于基因工程技术领域。本发明的适合HEK293细胞的双顺反子表达载体，包含如下元件：第一核基质结合区序列‑启动子‑目的基因‑内部核糖体进入位点序列‑筛选标记基因‑Poly A–第二核基质结合区序列。该载体利用优化的MAR序列可以显著提高HEK293细胞转基因表达，克服转基因沉默，实现转基因在宿主细胞中的高效、长期表达。同时可实现目的基因和筛选标记的同时表达，可减少由于不同表达框存在导致的假阳性细胞克隆，提高阳性细胞克隆筛选率，并克服传统载体目的基因与筛选标记基因表达不均衡的问题。
-
公开(公告)号：CN105039411B
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201510534187.8
申请日：2015-08-27
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/867 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种附着型慢病毒载体、制备方法及应用，属于生物技术领域。本发明中附着型慢病毒载体由pLRZM载体与包装系统共同转染宿主细胞获得，pLRZM载体为pLVX‑IRES‑ZsGreen1载体中土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件替换为人源性MAR序列或其95％以上同源序列所得，土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件序列如SEQ ID NO.2所示，人源性MAR序列如SEQ ID NO.3中第14～2161位碱基所示。该附着型慢病毒载体附着于宿主细胞染色体上，而非整合到宿主细胞染色体中，并且能够介导外源基因在哺乳动物细胞中稳定、高效、持久的表达，可用于基因治疗，具有广阔的市场前景。
-
公开(公告)号：CN106497973A
公开(公告)日：2017-03-15
申请号：CN201611019369.2
申请日：2016-11-18
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/85
CPC classification number: C12N15/85 , C12N2800/107
Abstract: 本发明公开了一种人类和其他哺乳动物细胞附着体表达载体、表达系统、制备方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。该附着体表达载体上插入有如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的分段β-干扰素MAR序列(或者与该序列95％以上同源的核苷酸序列)，相较包含全长MAR序列或387bp MAR序列的表达载体，该载体能高效、持续、稳定地表达外源目的基因，尤其是包含E段MAR序列的载体表达最佳，可用于基因治疗。在该载体中，分段MAR序列插入载体的多克隆位点也即eGFP下游处，一方面能克服转基因沉默，另一方面能提高目的蛋白的表达水平以及后续单克隆细胞株筛选的有效性。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105039411A
公开(公告)日：2015-11-11
申请号：CN201510534187.8
申请日：2015-08-27
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/867 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种附着型慢病毒载体、制备方法及应用，属于生物技术领域。本发明中附着型慢病毒载体由pLRZM载体与包装系统共同转染宿主细胞获得，pLRZM载体为pLVX-IRES-ZsGreen1载体中土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件替换为人源性MAR序列或其95％以上同源序列所得，土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件序列如SEQ ID NO.2所示，人源性MAR序列如SEQ ID NO.3中第14～2161位碱基所示。该附着型慢病毒载体附着于宿主细胞染色体上，而非整合到宿主细胞染色体中，并且能够介导外源基因在哺乳动物细胞中稳定、高效、持久的表达，可用于基因治疗，具有广阔的市场前景。
-
公开(公告)号：CN103435711A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310301338.6
申请日：2013-07-17
Applicant: 新乡医学院
IPC: C08B37/00
Abstract: 本发明公开了一种黑丑多糖的提取方法，包括：原料除杂，粉碎过筛，脱脂脱色，热水提取，离心，浓缩，脱蛋白，干燥，得粗多糖，复溶，分级醇沉，离心，冻干，得白色黑丑多糖，经试验并修正得最佳提取条件为提取温度85℃、提取时间4.25h、液料比为51∶1(mL/g)，具有方案工艺简单，操作便捷，多糖的得率较高，可达25.5％，经过分级醇沉后多糖的纯度也很高，有望实现工业化的应用的优点。
-
公开(公告)号：CN101781662A
公开(公告)日：2010-07-21
申请号：CN201010116202.4
申请日：2010-02-24
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明公开了一种人类和哺乳动物细胞游离表达载体。本发明涉及一种DNA。本发明的目的是提供一种安全性能好、效率高的人类和哺乳动物细胞游离表达载体。本发明的技术方案是，所述载体的多克隆位点下游和上游分别含有人源性的MAR和有治疗作用的外源基因DNA片段且只含有真核表达元件的表达载体。本发明用于基因治疗。
-
公开(公告)号：CN110343718A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201810291628.X
申请日：2018-04-03
Applicant: 新乡医学院 , 华兰生物疫苗有限公司
IPC: C12N15/85
Abstract: 本发明涉及一种高效稳定的细胞表达载体、表达系统及其制备方法、应用，属于基因工程技术领域。本发明中的细胞表达载体包含MAR from the DHFR intron序列，该段序列具有普通MAR序列和内含子的双重功能，能更好的提高CHO细胞中外源蛋白表达水平，由其构建得到的表达载体能驱动目的基因高效、持续、稳定表达，同等条件下，与不含MAR from the DHFR intron序列及包含来自CHO细胞的MAR-6序列的表达载体相比，本发明中表达载体能显著提高外源基因的表达水平，可用于重组蛋白的生产等。
-
公开(公告)号：CN107058387A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201710240457.3
申请日：2017-04-13
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及一种适合HEK293细胞的双顺反子表达载体及其制备方法、表达系统、应用，属于基因工程技术领域。本发明的适合HEK293细胞的双顺反子表达载体，包含如下元件：第一核基质结合区序列‑启动子‑目的基因‑内部核糖体进入位点序列‑筛选标记基因‑Poly A–第二核基质结合区序列。该载体利用优化的MAR序列可以显著提高HEK293细胞转基因表达，克服转基因沉默，实现转基因在宿主细胞中的高效、长期表达。同时可实现目的基因和筛选标记的同时表达，可减少由于不同表达框存在导致的假阳性细胞克隆，提高阳性细胞克隆筛选率，并克服传统载体目的基因与筛选标记基因表达不均衡的问题。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
21
records
(took 0.022 seconds)
